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1、目的:探討大麻素CB2受體在小鼠骨癌痛形成中的作用。
方法:C3H/He小鼠隨機(jī)分為四紐,即腫瘤組(T組)、給藥組(J組)、溶媒紐(D組)和假手術(shù)組(S組)。將含2*105個(gè)纖維肉瘤細(xì)胞NCTC2472的最小必需培養(yǎng)基(α-MEM)接種到C3H/He小鼠右側(cè)股骨遠(yuǎn)端骨髓腔制作骨癌痛模型,S組小鼠注入不含腫瘤細(xì)胞的α-MEM。所有小鼠均于接種前及接種后第5d、7d、10d、14d檢測(cè)痛行為學(xué)指標(biāo),包括機(jī)械縮足閾值(PWMT)
2、和熱縮足潛伏期(PWTL)。J組和D組分別于鞘內(nèi)注射2μg JWH015和4%DMSO,注藥體積均為5.0μl。兩組于鞘內(nèi)注射后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h和72 h測(cè)定痛行為學(xué)。選取接種后5 d、7 d、10 d、14 d和給藥后12 h的各組小鼠提取脊髓腰膨大進(jìn)行western blot檢測(cè)CB2表達(dá)水平,取材均于行為學(xué)測(cè)定后進(jìn)行。
結(jié)果:
1)小鼠于接種后7 d,PWMT為(1.27±0
3、.28)g(P<0.05),此后逐漸下降,于接種后14 d達(dá)N(0.53±0.20)g,鞘內(nèi)注射JWH015后6 h PWMT升高至(1.00±0.20)g(P<0.05),12 h達(dá)到高峰,PWMT為(1.40±0.39)g,48 h后逐漸衰減,72 h回復(fù)至給藥前水平;小鼠于接種后10 d出現(xiàn)熱痛敏,PWTL為(16.85±0.39)s(P<0.05),接種后14 d達(dá)N(11.45±0.67)s,鞘內(nèi)注射JWH015后6 h回升至
4、(15.71±1.87)s(P<0.05),12 h達(dá)到高峰為(18.57±2.34)s,48 h衰減至72 h回復(fù)至給藥前水平。
2)Western Blot結(jié)果:從接種后第5 d開始,CB2表達(dá)水平逐漸增高。與接種后5 d CB2(0.190+0.010)相比,接種后14 d CB2水平增加到0.660±0.010(P<0.05);與D組CB2(0.903±0.006)比較,鞘內(nèi)注射JWH015后12 h J組CB2的
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