脂筏在CB2受體介導的內源性大麻素AEA抑制大鼠肝星狀細胞增殖活性中的作用.pdf

1、目的：
　　 探討脂筏在CB2受體介導的內源性大麻素AEA抑制大鼠肝星狀細胞增殖活性中的作用及作用機制。
　　 方法：
　　 1．采用MTT法檢測不同濃度的AEA和MCD對HSC的作用效應；
　　 2．構建Cnr2-shRNA轉染HSC細胞，采用MTT法檢測轉染前后不同濃度的AEA和MCD對HSC的作用效應；
　　 3．采用Western Blot檢測不同濃度內源性大麻素AEA及MCD作用后

2、HSC中p-P38MAPK和p-JNK的表達量；
　　 4．采用激光共聚焦法檢測HSC上的LRs以及CB2受體的表達；
　　 5．采用蔗糖密度梯度離心法提取LRs，Western Blot鑒定LRs并檢測LRs中CB2受體的表達
　　 結果：
　　 1．成功構建Cnr2-ShRNA轉染篩選Cnr2-單克隆細胞株，MTT檢測發(fā)現(xiàn)轉染后CB2受體的減少能減弱AEA對HSC細胞增殖的抑制作用，然而用MCD

3、預處理HSC細胞后CB2受體的減少對AEA的效應無明顯影響。
　　 *國家自然科學基金（NO：30571627）
　　 2．P-P38MAPK和p-JNK的表達與AEA濃度有依賴關系，且可以被MCD部分拮抗。
　　 3．CB2受體在HSC膜脂筏和胞漿中均有表達，但用蔗糖密度梯度離心法提取AEA刺激前HSC細胞脂筏，發(fā)現(xiàn)未受AEA刺激時脂筏中含有的CB2受體量很少，CB2受體大部分存在于HSC細胞胞漿中。