ApoE不同蛋白亞型表達(dá)對腦中apoE脂化及β-淀粉樣蛋白累積的作用研究.pdf

1、在編碼人三種不同apoE蛋白亞型（E2、E3和E4）的APOE等位基因（ε2、ε3和ε4）中，APOEε4等位基因是阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)最重要的遺傳風(fēng)險因子，APOEε2等位基因則具有保護(hù)作用。鑒于apoE蛋白亞型對基于調(diào)節(jié)apoE蛋白表達(dá)的AD治療可能會有不同的影響，通過在人APOE基因定位替換（Targeted replacement，TR）小鼠腦中過表達(dá)不同的人apoE亞型，研究腦中表達(dá)不同

2、apoE亞型對apoE脂化和β-淀粉樣蛋白(Amyloid-β，Aβ)累積的影響。
　　在本研究中，構(gòu)建了在星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性表達(dá)的膠質(zhì)纖維酸蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein，GFAP)啟動子調(diào)控下表達(dá)apoE不同蛋白亞型的腺相關(guān)病毒血清8型重組質(zhì)粒（AAV8-GFAP-apoE-HA），并將重組質(zhì)粒經(jīng)腺相關(guān)病毒包裝后注射到出生2天(Postnatal day2，P2)的apoE3或apoE4-

3、TR小鼠側(cè)腦室中表達(dá)。發(fā)現(xiàn)AAV8-GFAP-apoE質(zhì)粒特異表達(dá)在小鼠不同腦區(qū)域的星形膠質(zhì)細(xì)胞中，并顯著提高了腦中apoE的蛋白水平。在apoE4-TR小鼠中，病毒介導(dǎo)過表達(dá)apoE4蛋白亞型增加了腦中不充分脂化的apoE脂蛋白顆粒并降低了apoE相關(guān)的膽固醇水平。與之相反，過表達(dá)apoE2蛋白亞型則提高了apoE蛋白脂化和apoE相關(guān)的膽固醇水平。在apoE3-TR小鼠中，發(fā)現(xiàn)表達(dá)不同apoE蛋白亞型后，apoE脂化水平也有類似的變

4、化，但不及apoE4-TR小鼠中明顯。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在apoE4-TR小鼠中過表達(dá)apoE4蛋白亞型，顯著提高了小鼠腦內(nèi)源Aβ水平，而過表達(dá)apoE2蛋白亞型趨向于降低Aβ水平。在apoE3-TR小鼠中，過表達(dá)apoE不同蛋白亞型對小鼠腦內(nèi)源Aβ水平則無顯著影響。結(jié)果提示，AAV介導(dǎo)腦中星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)apoE2蛋白亞型或向腦中輸入具有與apoE2蛋白亞型相似功能的模擬物可以作為潛在的AD治療策略，而提高apoE4蛋白亞型水平，特別是