硫酸鋅對高脂喂養(yǎng)ApoE基因敲除小鼠保護作用研究.pdf

1、目的和意義：
　　 動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是一種多因素疾病，涉及基因、環(huán)境、代謝等諸多因素。近年研究顯示，氧化應激是動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的重要因素，貫穿于動脈粥樣硬化斑塊的形成、發(fā)展以及破裂并觸發(fā)臨床事件的始終。此外，脂質代謝紊亂被認為與動脈粥樣硬化關系緊密，其中高脂血癥被認為是動脈粥樣硬化的主要危險因素之一；而且高脂喂養(yǎng)通過增強自由基產(chǎn)生的線粒體呼吸鏈增加了可獲得的氧化底物和自由基的數(shù)量。鋅(zi

2、nc，Zn)是廣泛存在于人體內(nèi)的一種必需微量元素，它具有抗氧化作用，在清除氧自由基過程中發(fā)揮重要作用。本實驗通過低劑量長期補充鋅的方式對高脂喂養(yǎng)的ApoE基因敲除小鼠進行干預，探討通過補充微量元素的方式對實驗動物心臟的保護作用及相關機制，以及對肝臟的損傷影響及肝臟中脂代謝調(diào)節(jié)情況。為日常合理補鋅預防和降低動脈粥樣硬化的發(fā)病及干預疾病進展提供依據(jù)，對于降低我國心血管疾病的發(fā)病率具有重大的社會價值和現(xiàn)實意義。
　　 研究方法：

3、>　　 將30只清潔級雄性純合子載脂蛋白E(AopE)基因敲除小鼠隨機分為高脂模型組、低劑量組、高劑量組，每組10只；并以10只C57BL/6J小鼠作為對照組。實驗期間，全部實驗動物飼以“西方類型”膳食，除對照組和高脂模型組自由飲用去離子水外，低劑量組和高劑量組分別連續(xù)14周自由飲用濃度為2.5mmol/L和25mmol/L的硫酸鋅水溶液。小鼠處死后測定全血和股骨中鋅和鐵含量；檢測心臟組織中SOD、T-AOC和MDA水平，以及血脂水平

4、和心臟組織中MTmRNA水平；蘇木素-伊紅染色觀察動脈中動脈粥樣硬化斑塊情況。檢測肝臟組織的中SOD、T-AOC和MDA水平，以及血清中AST、ALT水平；蘇木素-伊紅染色觀察肝臟組織中脂肪蓄積的情況。
　　 結果：
　　 1.低劑量和高劑量補鋅實驗組小鼠全血中鋅含量分別為（5.15±0.36）mg/L和（5.11±0.44）mg/L，明顯高于其它兩組(P＜0.05)；并且補鋅組股骨鋅也明顯增加(P＜0.05)；但沒有明

5、顯改變?nèi)凸晒侵需F的含量(P＞0.05)。
　　 2.補鋅后低劑量組和高劑量組心臟組織中T-AOC和SOD水平明顯增加（P＜0.05），而MDA水平明顯降低（P＞0.05）。
　　 3.低劑量組和高劑量組小鼠血清中甘油三酯明顯低于高脂模型組(P＜0.05)，但對血清中總膽固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白沒有明顯的影響。
　　 4.高劑量組小鼠心臟組織中MTmRNA水平明顯高于其它兩組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計

6、學意義。
　　 5.加鋅組冠狀動脈蘇木素-伊紅染色，低劑量組冠狀動脈中動脈粥樣硬化斑塊明顯小于高脂模型組。
　　 6.補充鋅后血清中ALT和AST水平明顯低于其它兩組（P＜0.05），但蘇木素一伊紅染色觀察發(fā)現(xiàn)補鋅不能明顯改善肝臟細胞內(nèi)脂肪蓄積。
　　 結論：
　　 1.補充鋅對高脂喂養(yǎng)造成ApoE基因敲除小鼠心臟的氧化損傷具有明顯保護作用，這可能是通過鋅在體內(nèi)誘導的金屬硫蛋白完成的。
　　 2.

7、補充鋅能調(diào)節(jié)甘油三酯代謝并能減緩動脈粥樣硬化斑塊的形成。
　　 3.補鋅對高脂造成的肝臟脂肪蓄積沒有明顯的調(diào)節(jié)作用。
　　 創(chuàng)新點：
　　 1.有研究顯示氧化應激是動脈粥樣硬化發(fā)生的危險因素，必需微量元素鋅具有抗氧化作用可以改善實驗動物兔的動脈粥樣硬化，我們首次利用硫酸鋅對ApoE基因敲除小鼠這種成熟動脈粥樣硬化模型進行干預，并探討長期低劑量補鋅對心臟的保護作用及對動脈粥樣硬化斑塊形成和發(fā)展的影響，具有積極的理論