老齡ApoE基因敲除小鼠主要動脈血管病理學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中，基因工程小鼠已成為人類疾病動物模型研究的重要來源。基因工程小鼠對于研究人類疾病的發(fā)生、發(fā)展及治療具有很高的應(yīng)用價值。用轉(zhuǎn)基因或基因敲除方法制作的人類疾病動物模型在科學(xué)研究應(yīng)用前，必須對其生物學(xué)性狀進(jìn)行深入細(xì)致的研究。其生物學(xué)性狀的研究是基因工程動物使用前必須具備的基礎(chǔ)條件，這些研究也是當(dāng)前動物模型研究的重點內(nèi)容之一。
　　 載脂蛋白E(apolipoprotein E ApoE)基因敲

2、除小鼠是較為公認(rèn)的動脈粥樣硬化(AS)病變以及易損斑塊機(jī)制研究的重要動物模型之一。通過給ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)飼喂高脂飼料，研究AS的動物模型應(yīng)用較多。但作為AS的ApoE-/-小鼠，飼喂普通飼料至老齡時，其相關(guān)生物學(xué)性狀的特征及數(shù)據(jù)未見詳盡報道。本研究通過給ApoE-/-小鼠飼喂普通飼料至18月齡時，觀察其冠狀動脈、腦基底動脈、頸動脈、腹主動脈、腎動脈等血管及肝臟的病理變化情況，同時對與AS相關(guān)的部分血液生化和敏感

3、性指標(biāo)進(jìn)行檢測。這些數(shù)據(jù)的獲得可為ApoE-/-小鼠飼喂普通飼料至老齡時的血管病理變化提供基礎(chǔ)背景資料。給使用ApoE-/-小鼠的科研工作者提供參考。
　　 方法:
　　 選取2月齡雄性ApoE-/-小鼠8只，同齡同性別C57BL/6J小鼠8只，飼養(yǎng)于山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心屏障環(huán)境設(shè)施內(nèi)，環(huán)境溫度為20-23℃；濕度為45-55％；光照實行12h更替。飼喂經(jīng)高溫高壓滅菌處理的普通飼料至18月齡。選取主要動脈血管及肝臟進(jìn)

4、行HE染色，運(yùn)用圖像分析系統(tǒng)( Image Pro Plus5.1)對HE染色結(jié)果進(jìn)行分析、處理。
　　 動物腹主動脈抽取全血，利用全自動生化分析儀檢測:總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇( LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)。
　　 利用酶標(biāo)儀測定:血清高敏C反應(yīng)蛋白( hs-CRP)的含量、肝臟過氧化物酶體增殖物激活受體( PPAR)的相對表達(dá)；
　　 所有統(tǒng)計學(xué)資料均使用SP

5、SS13.0軟件分析，所有數(shù)據(jù)以(x)±s表示，組間比較采用單因素方差分析。
　　 結(jié)果:
　　 兩組小鼠飼喂普通飼料至18月齡時，均無死亡。ApoE-/-小鼠采食量相對減少，被毛凌亂:C57BL/6J小鼠個別出現(xiàn)脫毛癥狀。兩組動物的血管和肝臟經(jīng)HE染色后，光鏡觀察顯不:ApoE-/-小鼠冠狀動脈、腦基底動脈未見動脈粥樣硬化斑塊的形成，頸動脈、腹主動脈、腎動脈有明顯的AS斑塊的形成；肝臟組織可見部分中央靜脈周圍有脂質(zhì)沉積

6、。C57BL/6J小鼠各部位血管及肝臟病理顯示均正常。
　　 血脂結(jié)果顯示:TC(2.03±0.25 vs13.82±2.73 mmol/l P＜0.05)、LDL-C(0.20±0.08 vs1.88±0.76 mmol/l P＜0.05), HDL-C(1.52±0.13 vs0.62±0.20 mmol/l P＜0.05)的統(tǒng)計學(xué)有意義。血漿TG(2.02±0.34 vs l.58±0.68 mmol/l P>0.05)統(tǒng)

7、計學(xué)無意義。
　　 血清hs-CRP含量(5.61±0.33 vs6.80±0.38ug/l P＜0.01)，肝臟PPAR相對表達(dá)(247.62±21.74 vs339.43±30.07ng/l P＜0.01))的統(tǒng)計學(xué)有意義
　　 結(jié)論:
　　 ApoE-/-小鼠冠狀動脈、腦基底動脈未見AS斑塊的形成，表明該模型飼喂普通飼料不適合用于腦和心臟動脈粥樣硬化病變方面的研究。
　　 ApoE-/-小鼠頸動脈、