耶羅維亞酵母對(duì)葡萄上OTA產(chǎn)生菌株的拮抗作用及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、赭曲霉毒素(OTA)為一種由青霉屬霉菌等代謝生成的一種有毒的次級(jí)代謝物。赭曲霉毒素被證實(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身體具有多種毒副作用，如致突變性、致畸性等，所以對(duì)人類和動(dòng)物的身體安全存在巨大的負(fù)面危害。
　　利用物理方法控制葡萄及其制品中OTA污染，抑制水果表面致病霉菌的生長(zhǎng)繁殖或降低已經(jīng)產(chǎn)生的赭曲霉毒素含量，但不能將OTA徹底地去除。而化學(xué)方法雖然具有高效性，但安全性問(wèn)題堪憂。拮抗生物防治法是一種對(duì)環(huán)境無(wú)污染、對(duì)動(dòng)植物健康無(wú)威脅的方法，被認(rèn)為

2、是現(xiàn)階段最具有發(fā)展前景的無(wú)公害方法。拮抗生物處理法是利用某些有益微生物對(duì)真菌具有很強(qiáng)的抑制作用，或者對(duì)毒素具有降解作用。尤其是成為重點(diǎn)研究對(duì)象的酵母菌類真菌，其代謝產(chǎn)物中一般沒有對(duì)人體有毒有害的物質(zhì)，安全性相對(duì)細(xì)菌更安全，且酵母菌的遺傳物質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定、細(xì)胞效價(jià)高、對(duì)不適宜生長(zhǎng)的逆境環(huán)境下也具有一定的耐受性，同時(shí)酵母菌細(xì)胞可以與化學(xué)藥劑及物理處理共同發(fā)揮作用。所以拮抗酵母菌發(fā)展為生物防治法中的主要研究目標(biāo)。
　　本研究論文采用我們課題

3、組實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)篩選分離并鑒定的耶羅維亞酵母（Y.lipolytica）為研究對(duì)象，探究了Y.lipolytica對(duì)由OTA產(chǎn)生菌O-1引起的葡萄采后果實(shí)青霉病害的生物抗病效果，在體內(nèi)試驗(yàn)中探究了葡萄果實(shí)自然腐爛率及漿果各種貯藏品質(zhì)指標(biāo)的作用，初步研究了Y.lipolytica抑制OTA產(chǎn)生菌O-1生長(zhǎng)繁殖的生理機(jī)制及Y.lipolytica體外抑制OTA產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)繁殖及其降解OTA的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　1.利用高效液

4、相熒光檢測(cè)法和紫外熒光檢測(cè)法相結(jié)合的方法，從病害葡萄的表面、果肉組織中分離并篩選到幾株OTA產(chǎn)生菌株，測(cè)序分析其中產(chǎn)毒素含量最高的一株霉菌O-1的5.8S rDNA-ITS區(qū)的基因序列，并對(duì)其形態(tài)學(xué)進(jìn)行了鑒定。
　　2.不同的氣候影響著赭曲霉毒素產(chǎn)生菌的種類及其OTA濃度，對(duì)葡萄制品的污染狀況也有很大的影響，研究不同的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、pH、溫度等因素對(duì)產(chǎn)毒菌株O-1的生長(zhǎng)和產(chǎn)毒素含量的影響發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)條件不同，島青霉O-1菌絲生

5、長(zhǎng)和產(chǎn)毒素能力也不同。
　　3.Y.lipolytica能夠有效控制由產(chǎn)毒素菌株P(guān).islandicum引起的產(chǎn)后葡萄病害，降低青霉病的發(fā)病率，減少葡萄產(chǎn)后損失，并對(duì)果實(shí)的貯藏品質(zhì)沒有不良影響。Y.lipolytica抑制產(chǎn)毒素菌株O-1的生理機(jī)制包括以下幾方面:Y.lipolytica能迅速在葡萄創(chuàng)傷處生長(zhǎng)繁殖，同霉菌P.islandicum O-1競(jìng)爭(zhēng)傷口處的營(yíng)養(yǎng)和空間;在體外培養(yǎng)基試驗(yàn)處理中Y.lipolytica能有效地抑