皂角刺對(duì)肺癌的防治作用及其機(jī)制初步探討.pdf

1、肺癌是一種對(duì)生命和人類健康威脅最大的惡性腫瘤，在我國(guó)的發(fā)病率占惡性腫瘤的首位，并逐年增加，因此對(duì)肺癌的預(yù)防和治療作用的研究具有重要的意義。目前治療肺癌大多采用化學(xué)藥物，但在治療過(guò)程中存在毒副作用和多藥耐藥性等治療缺陷。中醫(yī)藥在治療腫瘤方面有毒副作用小、能提高患者的生活質(zhì)量，并且長(zhǎng)期用藥費(fèi)用低等優(yōu)勢(shì)贏得了患者的認(rèn)可，也成為開(kāi)發(fā)新型抗腫瘤藥物的重要源泉，因此篩選中醫(yī)藥抗腫瘤藥物成為藥理學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。
　　皂角刺的中醫(yī)臨床應(yīng)用歷史悠

2、久，已被列為抗癌中草藥之一。前期各項(xiàng)探索結(jié)論已經(jīng)證明了多種腫瘤細(xì)胞增殖能夠顯著地被皂角刺抑制。鑒于中藥善于治“未病”的特點(diǎn)，本課題探討的目的是考察皂角刺水煎液對(duì)肺癌細(xì)胞及肺癌模型的預(yù)防作用和治療作用，并探討其可能隱含的新機(jī)制。
　　本課題體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法，檢測(cè)不同濃度的皂角刺水煎液對(duì)小鼠肺癌細(xì)胞(Lewis)、小鼠胚肺成纖維細(xì)胞(L929)、小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖、小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化效應(yīng)細(xì)胞及細(xì)胞黏附的影響，并用劃痕標(biāo)記染料示蹤技

3、術(shù)觀察其對(duì)細(xì)胞間隙連接通訊功能影響;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用Lewis肺癌小鼠皮下移植模型、Lewis肺癌小鼠實(shí)驗(yàn)性肺癌轉(zhuǎn)移模型和烏拉坦誘導(dǎo)的小鼠肺癌模型，評(píng)價(jià)皂角刺水煎液對(duì)Lewis肺癌模型的預(yù)防和治療作用。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠的外觀、體溫、生存期和自主活動(dòng)觀察，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)小鼠的中醫(yī)學(xué)體征的變化;通過(guò)肺組織HE染色法，觀察肺癌組織病理學(xué)變化;通過(guò)檢測(cè)血清指標(biāo):層粘連蛋白(LN)、血小板活化因子(PAF)、酪氨酸激酶受體B(TrkB)、酪氨酸激酶受體A(T

4、rkA)、小鼠免疫球蛋白G(IgG)的含量變化，評(píng)價(jià)皂角刺水煎液對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠血清的影響;通過(guò)免疫組化法，觀察皂角刺水煎液對(duì)Cx43表達(dá)的影響，驗(yàn)證其抗肺癌的機(jī)制。
　　體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:皂角刺水煎液呈劑量相關(guān)性地抑制Lewis肺癌細(xì)胞增殖（IC50=146μg/ml），但對(duì)L929胚肺成纖維細(xì)胞增殖無(wú)顯著影響。皂角刺水煎液對(duì)Lewis肺癌細(xì)胞細(xì)胞增殖影響較小的劑量可降低Lewis肺癌細(xì)胞黏附，并呈劑量相關(guān)性促進(jìn)Lewis肺癌細(xì)胞間連

5、接通訊，但對(duì)L929胚肺成纖維細(xì)胞黏附無(wú)影響。同時(shí)能提高體外培養(yǎng)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖率及脾淋巴細(xì)胞的殺傷力。
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與未治療的Lewis肺癌皮下移植模型和Lewis肺癌實(shí)驗(yàn)性肺癌轉(zhuǎn)移模型比較，皂角刺水煎液高劑量和低劑量均可減緩腫瘤生長(zhǎng)、阻止腫瘤轉(zhuǎn)移、延長(zhǎng)荷瘤小鼠存活時(shí)間。注射烏拉坦的模型小鼠肺部有數(shù)目和大小不等的腫瘤結(jié)節(jié)，而皂角刺水煎液高劑量組和低劑量組小鼠肺部腫瘤結(jié)節(jié)明顯減少，甚至阻止腫瘤發(fā)生。同時(shí)，皂角刺水煎液

6、能維持小鼠體溫恒定和生存質(zhì)量，降低血清中LN、PAF、TrkB、TrkA水平，提高IgG含量。
　　病理結(jié)果顯示:與模型組的肺癌組織比較，皂角刺水煎液高劑量組和低劑量組均能改善肺組織病理變化。免疫組化結(jié)果顯示:皂角刺水煎液高劑量組和低劑量組均能增強(qiáng)致癌小鼠肺部的Cx43免疫組化顯色密度。
　　綜上所述，皂角刺水煎液對(duì)肺癌有確切的預(yù)防和治療作用，其機(jī)制是增加免疫功能，增強(qiáng)細(xì)胞間連接通訊，恢復(fù)細(xì)胞間連接通訊的正?；瑥亩茏柚鼓[