含PML-RARa與ABL雙基因質粒標準品的制備及檢測PML-RARa基因的雙重熒光定量PCR方法的建立.pdf

1、研究目的：
　　 1.獲得穩(wěn)定，準確的含PML/RARa和ABL雙基因質粒標準品。
　　 2.建立檢測PML/RARa和ABL基因雙重熒光定量PCR方法。
　　 3.開發(fā)出可應用于臨床急性早幼粒白血病病人PML/RARa基因檢測試劑盒。
　　 方法：
　　 1.利用RT-PCR從NB4細胞中擴增出ABL基因克隆至質粒PCMV4-PML/RARa中(該質粒由上海交通大學血液學研究所張小偉博士惠贈)送

2、去測序。測序正確后，將重組質粒命名為PCMV4-PML/RARa-ABL，并對質粒穩(wěn)定性和反應性能進行評價。
　　 2.構建穩(wěn)定的檢測PML/RARa和ABL基因的單重熒光定量PCR反應體系，同時在此基礎之上建立穩(wěn)定雙重熒光定量PCR方法，開發(fā)出可應用于臨床檢測白血病病人PML/RARa檢測的試劑盒。
　　 實驗結果：
　　 1.成功構建了含PML/RARa和ABL雙基因質粒標準品，用于白血病病人PML/RARa