實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)兒童急性早幼粒細(xì)胞白血病PML-RAR a融合基因.pdf

1、目的:實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(RQ—PCR)技術(shù)檢測(cè)PML/RARα融合基因已經(jīng)成為監(jiān)測(cè)急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)的微小殘留病(MRD)的重要工具。但在兒童中的研究很少。我們的目的是了解兒童APL中RQ—PCR檢測(cè)PML/RARα融合基因的情況及初步了解其與預(yù)后的相關(guān)性,并與常規(guī)定性PCR(RT—PCR)相比較。探討RQ—PCR監(jiān)測(cè)的必要性。
　　 方法:對(duì)49例初診急性早幼粒細(xì)胞白血病患兒的骨髓或外周血應(yīng)用RT—PCR和/或

2、RQ—PCR的方法檢測(cè)PML/RARα(或RARα/PML)。RQ—PCR反應(yīng)采用TaqMan探針,在ABT7500擴(kuò)增儀上進(jìn)行,選用ABL作為內(nèi)參。統(tǒng)計(jì)49例患兒血液學(xué)和分子生物學(xué)復(fù)發(fā)的記錄。應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以探討RQ—PCR的結(jié)果和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)之間的的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:本組兒童APL的中位年齡9(1.5～16)歲,男性38例,女性11例。WBC>10×109/L者占32.7％。98.0％(48/49)獲得完全緩

3、解。1例(1/49)發(fā)生早期死亡,死于顱內(nèi)出血。5年累積無事件生存(EFS)率、無病生存(DFS)率、總生存(OS)率分別為72.0％、73.5％和98.0％。47例(95.9％)患者PML/RARα陽性。其中34例(72.3％)患者為長(zhǎng)型(L-form)PML/RARα陽性、3例(6.4％)患者為變異型(V—form)PML/RARα陽性、10例(21.2％)患者為短型(S—form)PML/RARα陽性。初診時(shí)PML/RAR a融合

4、基因轉(zhuǎn)錄本的值(PML/RAR a NCN)變異較大。2010年前的25例患兒根據(jù)應(yīng)用誘導(dǎo)治療方案的不同,這些患者被分為2組(組1和組2)。20例患者僅給予全反式維甲酸(組1),5例患者應(yīng)用全反式維甲酸和三氧化二砷聯(lián)合治療(組2)。組1患兒的5年無病生存率為64.8％,組2患兒的5年無病率為100％,兩者雖無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.160),但組2的DFS較組1DFS增高超過30％,提示ATO對(duì)于減少?gòu)?fù)發(fā)有一定的作用。在274例次樣本中

5、,RQ—PCR沒有假陰性,RT—PCR有假陰性(0.8％)。誘導(dǎo)緩解治療后,PML/RARα轉(zhuǎn)錄本(PML/RARα NCN)為0的患兒(13例),5年無病生存率為100％,而PML/RARα轉(zhuǎn)錄本(PML/PARα NCN)沒有降為0的患兒(25例),5年無病生存率為40.3±18.3％(P=0.06)。兩組無病生存率相差超過50％。PML/RARα轉(zhuǎn)錄本(PML/RARα NCN)沒有降為0的患兒中,誘導(dǎo)治療曾應(yīng)用三氧化二砷的,復(fù)發(fā)