對遺傳性痙攣性截癱致病基因SLC33A1功能及致病機制的初步探討.pdf

1、遺傳性痙攣性截癱(Hereditaryspasticparaplegia，HSP或Spasticparaplegiagene，SPG)，是一組在遺傳學和臨床表現上都具有顯著的異質性的神經肌肉疾病。HSP以對稱性雙下肢進行性肌無力和肌張力增高為主要臨床特征，其病理改變主要是脊髓側柱中的雙側皮質脊髓束的軸索變性和脫髓鞘，以胸段最重。
　　目前為止，已經有61個HSP致病基因被定位，確定的致病基因也已達40個。其中SPG42致病基因SL

2、C33A1是由本實驗室利用中國人家系資源定位并確定。SLC33A1基因的p.S113R(c.339T＞G)錯義突變導致HSP的發(fā)生。雖然我們在此基礎上，采用連鎖和突變分析法，對該家系中的兩名患者子代進行了產前診斷，為家系成員解除了憂慮。但要想從根本上解決這類疾病難題還需要了解SLC33A1導致SPG42發(fā)生的分子機制。目前對于SLC33A1基因及其編碼蛋白的功能研究非常少。因此，本課題將利用SLC33A1不同表達水平的細胞模型，對SLC

3、33A1蛋白的功能及作用機制進行初步探討。
　　我們成功構建了SLC33A1高表達和低表達的HEK293細胞模型。并通過原代培養(yǎng)，獲得Slc33a1錯義突變的小鼠雜合子胚胎成纖維細胞。在細胞表型研究中，確定SLC33A1高表達可促進細胞的增殖及存活，抑制細胞的自噬。SLC33A1低表達可抑制細胞增殖和存活，促進細胞自噬。而SLC33A1錯義突變影響細胞的存活，但并不影響細胞的增殖和自噬。在機制方面的研究中，我們確定SLC33A1可

4、通過激活Wnt/β-catenin信號通路來發(fā)揮促增殖作用。此外，SLC33A1發(fā)生錯義突變可通過影響B(tài)MPR1A在溶酶體的降解，導致BMPR1A表達水平明顯上調，并異常激活BMP信號通路，從而調控下游基因的表達。
　　我們還將Slc33a1錯義突變基因敲入小鼠的胚胎成纖維細胞重編程成為誘導性多能干細胞（inducedpluripotentstemcell，iPSCs），為研究SLC33A1在早期胚胎發(fā)育過程中的功能及突變導致的發(fā)