遺傳性痙攣性截癱spastin基因突變初步分析.pdf

1、目的：建立聯(lián)合應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)擴(kuò)增spastin基因各外顯子序列和變性高效液相色譜分析(denaturing high—performance liquidchromatography，DHPLC)檢測遺傳性痙攣性截癱(hereditary spastic paraplegia，HSP又名SPG)的主要致病基因spastin突變的技術(shù)平臺。探討另外3個遺傳了三代以上常染色體

2、顯性遺傳性痙攣性截癱(autosomal dominant hereditary spasticparaplegia，AD—HSP又名AD—SPG)大家系的臨床特點(diǎn)及其與spastin基因突變的關(guān)系。 方法：應(yīng)用DHPLC技術(shù)對10個SPG家系先證者及18個SPG散發(fā)患者spastin基因各外顯子PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行點(diǎn)突變篩查；經(jīng)DHPLC檢測出異常的PCR擴(kuò)增片段進(jìn)行DNA直接測序，Internet網(wǎng)絡(luò)查詢基因突變與多態(tài)數(shù)據(jù)庫，

3、明確是否已報道致病突變或多態(tài)。對3個AD—SPG大家系進(jìn)行詳細(xì)的臨床檢查，總結(jié)所有患者臨床特點(diǎn)，并應(yīng)用PCR技術(shù)結(jié)合DNA序列分析方法，檢測3個大家系先證者spastin基因的突變情況。 結(jié)果：應(yīng)用DHPLC檢測發(fā)現(xiàn)2個散發(fā)患者有異常峰形，DNA直接測序證實(shí)1例患者有spastin基因2號外顯子無義突變651 C→T(p．Gln144X)；1例患者有spastin基因11號外顯子錯義突變1617C→G(p．Leu466Val)。

4、Internet網(wǎng)絡(luò)查詢基因突變與多態(tài)數(shù)據(jù)庫，未見同樣突變報道。三個大家系中所有患者均具有SPG的典型表現(xiàn)，PCR—DNA序列分析患者spastin基因的17個外顯子均未發(fā)現(xiàn)有異常的突變。 結(jié)論：首次在國內(nèi)應(yīng)用DHPLC技術(shù)對spastin基因進(jìn)行突變檢測；國人SPG患者存在spastin基因無義突變651C→T(p．Gin144X)錯義突變1617C→G(p．Leu466Val)．初步驗(yàn)證了DHPLC進(jìn)行SPG致病基因spas