遺傳性痙攣性截癱患者SPG4(SPAST)和SPG3A(ATL1)基因突變分析.pdf

1、研究背景:
　　遺傳性痙攣性截癱（hereditaryspasticparaplegia，SPG或HSP），是目前遺傳學上很受關(guān)注的一組具有高度臨床和遺傳異質(zhì)性的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，以緩慢進行性雙下肢肌張力增高和無力為主要特征。1876年由Seeligmuller首先報道，爾后Strümpell和Lorrain作了詳細論述，故又稱為Strümpell-Lorrain病，此病患病率為2.0/10萬至9.6/10萬。依據(jù)臨床特征HSP分

2、為單純型及復(fù)雜型，單純型以逐漸進展的雙下肢肌張力增高、肌無力、腱反射亢進及痙攣步態(tài)為主要特征，可合并膀胱括約肌功能障礙及深感覺障礙;復(fù)雜型除上述臨床表現(xiàn)外還可伴有精神發(fā)育遲滯、錐體外系癥狀、共濟失調(diào)、癲癇、視神經(jīng)萎縮、視網(wǎng)膜色素變性、耳聾、白內(nèi)障、肌肉萎縮、周圍神經(jīng)病及皮膚病變等。按遺傳方式不同HSP可分為四型:常染色體顯性遺傳(autosomaldominant，AD)、常染色體隱性遺傳（autosomalrecessive，AR），

3、X-連鎖遺傳(X-linked，XL)和母系遺傳(maternalinheritance)（或線粒體相關(guān)遺傳），其中以AD遺傳最為常見。SPG4和SPG3A是最常見的AD-HSP亞型，分別占AD-HSP患者的40-45％和10％。SPG4和SPG3A最常見突變類型為微突變，此兩型除微突變外還存在重排突變。
　　目的:
　　1、建立SPG4（SPAST）和SPG3A（ATL1）微突變的聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechai

4、nreaction，PCR)-直接測序技術(shù)診斷平臺和多重連接探針擴增(multiplexligation-dependentprobeamplification，MLPA)技術(shù)結(jié)合毛細管電泳診斷重排突變平臺;
　　2、明確中國漢族人群中AD-HSP患者及散發(fā)HSP患者中SPG4（SPAST）和SPG3A（ATL1）微突變及重排突變頻率。
　　方法:
　　研究對象為17個AD-HSP家系和18個散發(fā)HSP患者。我們聯(lián)合應(yīng)

5、用PCR-直接測序方法對17個AD-HSP家系患者和18個散發(fā)患者，進行ATL1（SPG3A致病基因）微突變檢測;應(yīng)用MLPA技術(shù)結(jié)合毛細管電泳對17個AD-HSP家系進行SPAST(SPG4致病基因)和ATL1重排突變檢測。（注:SPG4致病基因SPAST微突變檢測已在本課題組前期工作中完成，故此部分不再研究）
　　結(jié)果:
　　結(jié)果在ATL1中發(fā)現(xiàn)1個新的插入突變c.1466_1467insTG、一個新的點突變c.1242

6、C＞G和3個已報道單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphisms，SNPs)即c.84A＞G、c.351G＞A和c.1635A＞G;在SPAST中發(fā)現(xiàn)2個重排突變del.ex.13-15和del.ex.10-16;ATL1未發(fā)現(xiàn)重排突變。
　　結(jié)論:
　　1、建立了利用MLPA對AD-HSP進行SPG4致病基因SPAST和SPG3A致病基因ATL1重排突變檢測的技術(shù)平臺。
　　2、在AD-H