斷奶仔豬腸道UCP2表達與腸道發(fā)育的關系及NAC的調(diào)控作用.pdf

1、目的：早期斷奶應激是仔豬營養(yǎng)學急需解決的重要命題之一。前期研究發(fā)現(xiàn)斷奶后仔豬體內(nèi)活性氧（ROS）失衡是導致斷奶應激產(chǎn)生的重要原因，解偶聯(lián)蛋白2（UCP2）具有調(diào)控ROS產(chǎn)生和能量代謝的功能，而有關UCP2如何調(diào)控斷奶仔豬腸道ROS產(chǎn)生及與腸道發(fā)育的關系目前并不明確。本試驗旨在探究斷奶過程中仔豬腸道 UCP2的表達規(guī)律，UCP2與ROS和腸道發(fā)育的關系，以及N-乙酰半胱氨酸（NAC）對UCP2表達的調(diào)控作用，闡明氧化應激對腸上皮細胞UCP

2、2表達的影響，探究NAC在氧化應激狀態(tài)下對UCP2調(diào)控的機理，為解決仔豬斷奶應激提供新的理論支持。
　　方法：試驗一，選擇12窩20日齡哺乳仔豬，隨機選擇6窩并從每窩選取1頭接近平均體重的仔豬處死采樣，21日齡時，12窩仔豬隨機分成2組，一組斷奶，一組不斷奶，分別于仔豬22日齡、25日齡和28日齡時每窩選取一頭仔豬處死采樣。采樣結束后分別測定血清抗氧化指標，腸道發(fā)育指標和小腸組織ROS含量，并采用qRT-PCR和免疫組化技術檢測U

3、CP2表達變化，分析其與腸道發(fā)育指標和ROS含量的關系。
　　試驗二，選擇10窩7日齡哺乳仔豬，隨機分為2組，NAC處理組和對照組，每組5窩。7日齡時仔豬開始補飼基礎日糧。NAC處理組在基礎飼糧中添加NAC(500 mg/kg)。在21日齡時兩組同時斷奶。25日齡時從對照組和NAC組中每窩隨機挑選一頭仔豬處死采樣，測定血清抗氧化指標，腸道NO和H2O2含量以及UCP2在mRNA水平和蛋白水平表達變化，分析NAC對UCP2的調(diào)控作用

4、。
　　結果：試驗一，斷奶顯著降低了仔豬的抗氧化能力，斷奶仔豬血清SOD和GSH-Px酶活力顯著降低（P<0.05），MDA含量顯著增加（P<0.05）。小腸組織中ROS的含量顯著上升（P<0.05），同時斷奶降低了仔豬小腸絨毛高度，增加了隱窩深度。通過熒光定量和免疫組化等技術研究發(fā)現(xiàn)，UCP2在腸道中有分布，斷奶顯著上調(diào)了UCP2在mRNA和蛋白水平的表達。通過相關分析發(fā)現(xiàn)，仔豬小腸絨毛高度與UCP2蛋白表達量存在顯著負相關（P

5、<0.05），隱窩深度與UCP2蛋白表達量存在顯著正相關（P<0.05）。小腸組織NO含量和H2O2含量均與UCP2表達量存在顯著正相關關系（P<0.05）。
　　試驗二：21日齡斷奶仔豬日糧中添加500 mg/kg的NAC后，抗氧化能力顯著上升，血清SOD和GSP-Px酶活力增加（P<0.05），H2O2和NO水平顯著下降（P<0.05），同時小腸組織中的ROS含量也顯著下降（P<0.05）。NAC能抑制UCP2的表達，研究發(fā)現(xiàn)