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1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文RNA干擾EGFR基因?qū)β殉舶┘?xì)胞生長和化療敏感性的影響姓名：杜鵑申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：陳愛平20080517EffectofsilencingEGFRgeneexpressionbyRNAinterferenceonthegrowthandchemosensitivityofovariancancercelllineskov3AbstractObjectiveToconstructexpress
2、ionvectorofEGFRspecificsiRNAandtransfectitintohumanovariancancercelllineskov3ToinvestigatetheeffectofRNAinterferenceonthetargetgeneexpression，cellgrowthandthechemosensitivityofthecelllineMethodsAccordingtoEGFRmRNAsequenc
3、e，wedesignedandsynthesizedshRNAtargetedEGFRwhichweredirectlyclonedintopSilencerrM21一U6neoplasmidDNAsequencingconfirmedwhethertheinsertionsequencewascorrectornotThentransfectedtherecombinantplasmidintohumanovariancancerce
4、lllineskov3withHifectinIITherewerethreegroups：normalcontrol；non—specifictransfectandEGFRshRNAtransfectTheinhibitiveeffectofRNAionmRNAlevelandproteinlevelwererespectivelydetectedbyRTPCRandimmunocytochemistryCellgrowthandt
5、hechemosensitivitytocisplatinweredetectedbyMTTmethodResultsDNAsequencingconfirmedthattheinsertionsequencewascompletelycorrectSequencespecificshRNAtargetingEGFRobviouslydown—regulatedtheexpressionofEGFRmRNA(F=8773，g=150～1
6、681，P001)andprotein(F=6929，g=114～1471，PO01)，ThegrowthofEGFRshRNAspecifictransfectcellwassignificantlyslowerthantheothertwogroupsItwas30％decreasedonthefifthdayAndthechemosensitivitytocisplatinincreasedby3timesConclusionTh
7、eEGFRspecificshRNAexpressionvectorCaneffectivelysuppresstheexpressionlevelofEGFRgeneandproteinofskov3cellsAlsoitCansuppressthecellgrowthandincreasethechemosensitivitytocisplatinPostgraduatestudent：JuanDu(ObstetricsandGyn
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