人尿激肽原酶預(yù)處理對(duì)大鼠腦缺血后腦組織中CGRP、RAMP1及VEGF表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景：
　　缺血性腦卒中因其發(fā)病率高、病死率高、致殘率高，以及日趨年輕化等特點(diǎn)使得這一疾病受到各方面的高度重視。靜脈或動(dòng)脈溶栓治療能及早的疏通梗塞，很大程度的減輕梗塞造成的損傷。然而，由于醫(yī)療條件和治療時(shí)間窗的限制，使得溶栓治療受到了很大的阻礙。腦梗死發(fā)生后,梗死灶周圍血管新生增加，增加的新生血管能有效的促進(jìn)受損腦組織的神經(jīng)修復(fù)。目前在臨床與實(shí)驗(yàn)方面，腦梗死后新生血管的研究已成為治療缺血性腦卒中的新方向。激肽原酶屬絲氨酸蛋白酶

2、超家族中的一員，相對(duì)分子質(zhì)量約為54000，主要是通過切割低分子量激肽原，釋放血管活性肽—激肽，進(jìn)而引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)，促進(jìn)梗死后血管新生，在治療缺血性腦卒中取得良好療效。CGRP（降鈣素基因相關(guān)肽）是一個(gè)含37個(gè)氨基酸殘基的辣椒素敏感感覺神經(jīng)的重要肽類遞質(zhì)，在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布（其中以海馬區(qū)表達(dá)較多），具有顯著地促進(jìn)血管生成的作用。RAMP1（受體活性修飾蛋白1）是 CGRP發(fā)揮作用的關(guān)鍵受體亞單位，決定CGRP的受體活性

3、及生物學(xué)作用。VEGF（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子）是一種具有內(nèi)皮細(xì)胞特異性的有絲分裂原,在血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖時(shí)表達(dá)上調(diào)，大量研究表明 VEGF的表達(dá)水平能作為血管新生能力的標(biāo)志。本實(shí)驗(yàn)試圖用過研究激肽原酶預(yù)處理對(duì)大鼠腦缺血后 CGRP、RAMP1及VEGF在腦組織中表達(dá)的影響，去了解CGRP、RAMP1與缺血性腦卒中新生血管之間的相關(guān)性及激肽原酶對(duì)其表達(dá)的影響情況。
　　目的：
　　研究激肽原酶預(yù)處理對(duì)腦缺血大鼠降鈣素基因相關(guān)肽（CG

4、RP）、受體活性修飾蛋白1(RAMP1)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）表達(dá)的影響。方法將80只大鼠隨機(jī)分成4組，假手術(shù)組（S組）、腦缺血組（I組）、激肽原酶低劑量組（3.75×10－3PNA單位/(kg·d),I+Kall組）、激肽原酶高劑量組(17.25×10－3PNA單位/(kg·d),I+Kal2組），每組20只。經(jīng)尾靜脈注射給藥1周后，采用線栓法堵塞大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈，建立右側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血模型。術(shù)后24 h紅四氮唑法測(cè)量腦梗死

5、體積，使用免疫組化和Western blot法觀察CGRP蛋白在海馬組織內(nèi)的表達(dá)及RAMP1和VEGF蛋白在皮層組織內(nèi)的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　與S組相比，I組大鼠腦組織CGRP、RAMP1及VEGF蛋白水平表達(dá)增加（P<0.01）；與I組相比，激肽原酶高低劑量能明顯促進(jìn)腦缺血大鼠腦組織CGRP、RAMP1及VEGF蛋白的表達(dá)(P<0.05)，腦梗死體積縮小(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　激肽原酶促進(jìn)缺血腦組