葛根素預(yù)處理對大鼠腦缺血早期腦組織eNOS的影響及腦保護(hù)機(jī)制研究.pdf

1、目的: 腦血管疾病是造成人類死亡和殘障的主要原因,而且其發(fā)病率有逐年增加之趨勢,其中約80％為缺血性腦血管疾病。內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)在大腦血液循環(huán)調(diào)節(jié)中起著重要作用,其活性增強(qiáng)可降低血管張力。腦缺血時(shí)eNOS能增加腦血流量,特別是缺血半影區(qū)的腦血流量,保護(hù)缺血半影區(qū)的腦細(xì)胞。我國傳統(tǒng)中藥葛根素對缺血腦組織的保護(hù)作用早有報(bào)道,尤其是在腦缺血早期,但其作用機(jī)理尚未完全清楚。葛根素在腦缺血早期的腦保護(hù)作用是否與上調(diào)腦組織eNOS表

2、達(dá)有關(guān)?目前尚未見報(bào)道。我們將就此開展研究,為臨床防治腦缺血提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法: 動(dòng)物模型:本研究將線栓從左側(cè)頸總動(dòng)脈插入,制作大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)大鼠模型。動(dòng)物分組:大鼠隨機(jī)分為以下3組:假手術(shù)組(S組、5只)、腦缺血組(M組、20只)和葛根素預(yù)處理組(P組、20只),其中,P組和M組又分別分為腦缺血0.5h、1h、2h、4h四個(gè)亞組(P0.5h、P1h、P2h、P4h和M0.5h、M1h、M2h、M4h),每組5只

3、。P組均在手術(shù)前10min腹腔注射葛根素(100mg/kg),M組和S組在同樣時(shí)間點(diǎn)注射等量生理鹽水。取樣及觀察:各組大鼠分別于相應(yīng)缺血時(shí)間點(diǎn)后被處死,其中S、M2h、M4h、P2h和P4h組大鼠處死前進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分以評價(jià)大鼠神經(jīng)功能變化;各組大鼠均取腦行蘇木素-伊紅(HE)染色和神經(jīng)元尼氏體染色觀察腦組織病理變化;采用免疫組化和Western blot方法檢測腦組織eNOS,觀察其蛋白質(zhì)的分布和表達(dá)水平。
　　結(jié)果: 神經(jīng)

4、功能缺損評分顯示,P組各亞組較對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的M組各亞組均減輕(P<0.05);HE染色顯示,P組神經(jīng)元損傷程度均較M組減輕;神經(jīng)元尼氏體染色顯示,P組神經(jīng)元尼氏小體溶解均相對減少;免疫組化和Western blot檢測顯示,P組各時(shí)間點(diǎn)腦組織eNOS蛋白質(zhì)的表達(dá)均明顯高于對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的M組,M1h和M2h組明顯高于S組(P<0.05或P<0.01),但M0.5h(超早期)組腦組織eNOS蛋白質(zhì)的表達(dá)增加不明顯(P>0.05)。
　　結(jié)