人尿激肽原酶對大鼠腦缺血再灌注后作用機制的研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：人尿激肽原酶對大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞凋亡的影響
　　 目的：觀察人尿激肽原酶(HUK)對大鼠腦缺血再灌注(I/R)后大腦缺血側(cè)皮質(zhì)缺血灶周圍區(qū)Caspase-3、凋亡誘導因子(AIF)和Survivin的時相表達及其對神經(jīng)細胞凋亡的影響。
　　 方法：將Wistar大鼠隨機分為假手術組、模型組及HUK干預組，應用線栓法建立大鼠大腦中動脈阻塞(MCAO)再灌注模型。假手術組于

2、術后，模型組、HUK干預組于缺血2h再灌注6h、24h、48h、72h，應用免疫組化技術和原位末端標記法(TUNEL)檢測不同時相各組缺血灶周圍腦區(qū)Caspase-3、AIF、Survivin和TUNEL陽性細胞的表達。
　　 結(jié)果：大鼠I/R后在缺血灶周圍區(qū)各個時間點均可以見到Caspase-3、AIF、Survivin和TUNEL陽性細胞的表達，HUK組與模型組相比較，兩組Caspase-3、AIF、Survivin和TUN

3、EL陽性細胞的表達趨勢基本一致，Caspase-3、AIF和TUNEL的表達高峰在I/R后24h，Survivin的表達高峰在I/R后48h。HUK組各時間點Caspase-3、AIF和TUNEL陽性細胞的光密度值較模型組明顯降低，Survivin的光密度值較模型組明顯升高。
　　 結(jié)論：HUK對大鼠腦缺血再灌注損傷有保護作用，其作用機制可能與HUK抑制Caspase-3、AIF的表達，促進Survivin的表達，減輕遲發(fā)性神經(jīng)

4、元的凋亡有關。
　　 第二部分：人尿激肽原酶對大鼠腦缺血再灌注后空間學習記憶功能及皮質(zhì)巢蛋白表達的影響
　　 目的：探討人尿激肽原酶(HUK)對大鼠局部腦缺血再灌注后缺血側(cè)皮質(zhì)巢蛋白(nestin)的表達及空間學習記憶能力障礙的作用。
　　 方法：線栓法制作大鼠大腦中動脈阻塞(MCAO)再灌注模型,HUK治療組于術后2周內(nèi)腹腔注射HUK，第15天開始各組大鼠采用Morris水迷宮裝置評價大鼠的空間學習記憶能力，尼

5、氏染色觀察缺血側(cè)皮質(zhì)神經(jīng)元數(shù)量的變化，免疫組化染色檢測缺血側(cè)皮質(zhì)nestin的表達。
　　 結(jié)果：腦缺血組大鼠在定向航行試驗和空間探索試驗中均表現(xiàn)出明顯的空間認知功能障礙。在定向航行試驗中，HUK中、高劑量治療組大鼠平均逃避潛伏期與缺血組比較明顯縮短。在空間探索試驗中，HUK中、高劑量治療組大鼠原平臺象限停留時間百分比以及穿過原平臺位置次數(shù)均大于腦缺血組。缺血側(cè)皮質(zhì)尼氏染色結(jié)果顯示，HUK中、高劑量治療組大鼠缺血側(cè)皮質(zhì)存活神經(jīng)元