雙苯氟嗪對(duì)大鼠腦缺血再灌注保護(hù)作用和機(jī)制研究.pdf

1、鑒于溶栓療法目前已被臨床首選治療腦梗塞病人,細(xì)胞凋亡已被認(rèn)作缺血再灌注腦損傷,特別是遲發(fā)性神經(jīng)元死亡的主要形式,該研究擬在大鼠中動(dòng)脈缺血再灌注模型,以細(xì)胞凋亡和自由基產(chǎn)生作為主要評(píng)價(jià)指標(biāo),進(jìn)一步觀察雙苯氟嗪對(duì)腦缺血再灌注所致腦損傷有無(wú)保護(hù)作用,并從雙苯氟嗪對(duì)Caspase-3、細(xì)胞色素c (Cytochrome c, Cyt c)、Bcl-2、及線粒體通透性轉(zhuǎn)變(Mitochondrial permeability transition

2、,MPT)等細(xì)胞凋亡相關(guān)因素的影響,進(jìn)一步闡明其保護(hù)缺血再灌注腦損傷的分子機(jī)制.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果如下:1.不同腦缺血再灌注時(shí)間所致腦損傷模型比較目的:研究腦缺血再灌注后不同時(shí)相細(xì)胞損傷的變化,以確定評(píng)價(jià)抗缺血藥物的最佳模型.結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)用的HE染色、甲苯安藍(lán)染色、caspase-3蛋白及MDA指標(biāo)均隨腦缺血再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)而明顯改變,提示可作為從不同角度的映腦缺血再灌注損傷的靈敏指標(biāo),而這些指標(biāo)均在缺血2h再灌注2h時(shí)達(dá)到顯著改變,可用作

3、評(píng)價(jià)抗腦缺血藥物的動(dòng)物模型.2.雙苯氟嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后細(xì)胞凋亡的影響目的:研究雙苯氟嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后細(xì)胞凋亡的影響.結(jié)論:缺血再灌注時(shí),腦組織有明顯的損傷,表現(xiàn)為大量的凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞,缺血再灌注使O<,2><'->產(chǎn)生增多和抗氧化酶(SOD)消耗增加,脂質(zhì)過(guò)氧化,MDA增多.雙苯氟嗪具有抗凋亡作用及抗氧化作用,其作用與抑制O<,2><'->過(guò)多產(chǎn)生,減少抗氧化酶消耗有關(guān).3.雙苯氟嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后

4、Caspase-3、Cyt c和Bcl-2蛋白的影響目的:研究雙苯氟嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后Caspase-3、Cytc和Bcl-2蛋白的變化.結(jié)論:缺血再灌注早期Caspase-3和Cyt c蛋白表達(dá)增加,是引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡的重要機(jī)制;缺血再灌注早期Bcl-2蛋白表達(dá)增加,是神經(jīng)細(xì)胞凋亡調(diào)控的機(jī)制之一;雙苯氟嗪抗細(xì)胞凋亡作用,與抑制Cyt c蛋白自線粒體中的釋放,減少Caspase-3蛋白表達(dá)和增加Bcl-2蛋白的表達(dá)有關(guān).4.雙

5、苯氟嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后bcl-2mRNA和caspase-3mRNA表達(dá)的影響目的:研究雙苯氟嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后bcl-2mRNA和caspase-3mRNA表達(dá).結(jié)論:缺血再灌注早期Caspase-3 mRNA表達(dá)增加,是引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡的重要機(jī)制;缺血再灌注早期bcl-2mRNA表達(dá)增加,表明缺血再灌注早期在轉(zhuǎn)錄水平啟動(dòng)了機(jī)體的內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制;雙苯氟嗪抗細(xì)胞凋亡作用,與在轉(zhuǎn)錄水平減少Caspase-3 mRNA表