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文檔簡介
1、單寧酶全稱單寧酯酰水解酶(Tannase,EC3.11.20),可水解水解類單寧和沒食子酸酯類中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和葡萄糖。自然界中產(chǎn)單寧酶的微生物很多,目前研究最多的生產(chǎn)菌種是曲霉屬和青霉屬。與霉菌相比,酵母菌具有細胞結(jié)構(gòu)簡單,易于改造,生長繁殖快等優(yōu)勢。本研究從自熱環(huán)境中篩選獲得一株產(chǎn)單寧酶的酵母菌株,并進行了菌種鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化、粗酶性質(zhì)及應(yīng)用于改善茶湯澄清度等方面的研究。主要研究結(jié)果如下:
采用富集培養(yǎng)技
2、術(shù)、平板透明圈法和搖瓶發(fā)酵篩選相結(jié)合的方法,從土壤中篩選獲得了一株產(chǎn)單寧酶的菌株FC6-1,初篩酶活力為2.86U/mL,通過對菌株FC6-1的形態(tài)學(xué)和26S rDNA分子生物學(xué)鑒定,確定該菌株FC6-1屬于短梗霉屬酵母菌,并采用薄層色譜法和SBA-40D生物傳感分析儀等方法對該單寧酶酶解產(chǎn)物進行了分析,結(jié)果表明該菌株產(chǎn)生的單寧酶能夠有效的水解單寧酸生成沒食子酸和葡萄糖。
采用單因素試驗和正交試驗對酵母菌株FC6-1的發(fā)酵培養(yǎng)
3、基組成和培養(yǎng)條件進行優(yōu)化,確定的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L):單寧酸30,玉米淀粉10,豆粕30,硫酸鎂2.0,磷酸氫二鉀1.0,氯化鈉0.5,硫酸錳0.4,氯化鈣0.2;最佳培養(yǎng)條件為:初始pH3.0,發(fā)酵溫度28℃,搖床轉(zhuǎn)速180rpm,裝液量35mL/250mL,接種量10%,發(fā)酵時間72h。優(yōu)化后酵母菌株FC6-1產(chǎn)單寧酶酶活力達到4.83U/mL,較優(yōu)化前提高了1.68倍。
對菌株FC6-1的粗酶性質(zhì)進行了初步研究
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