發(fā)酵木糖產(chǎn)乙醇野生酵母菌株的篩選及其特性研究.pdf

1、從自然界中分離篩選得到了35株可以發(fā)酵木糖產(chǎn)乙醇的野生菌株，對(duì)其中的3號(hào)和621號(hào)菌株的形態(tài)特征和發(fā)酵特性進(jìn)行了細(xì)致的研究。菌株3和621具有典型的酵母菌形態(tài)學(xué)特征，以出芽方式繁殖，可以利用葡萄糖，乳糖等常見碳源。菌株3可以利用銨態(tài)氮和硝態(tài)氮；菌株621可以利用銨態(tài)氮，不能利用硝態(tài)氮。菌株3的最適生長(zhǎng)pH范圍是6.6～7.0，溫度為28℃。菌株621的最適生長(zhǎng)pH范圍是5.2～6.4，溫度為28℃。18SrDNA序列分析顯示，3號(hào)菌株與

2、中型假絲酵母(Candidaintermedia)，621號(hào)菌株與熱帶假絲酵母(Candidatropicalis)有99.0％的同源性。 菌株3和621對(duì)木糖和葡萄糖均有很好的發(fā)酵性能。菌株3在28℃，120r/min，72h條件下，發(fā)酵30g/L木糖的乙醇產(chǎn)率最高，達(dá)到理論值的43.70％；發(fā)酵70g/L木糖得到的乙醇產(chǎn)量最高，為6.480g/L；發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)到156h，可以利用80g/L木糖產(chǎn)乙醇21.225g/L，產(chǎn)率為

3、理論值的72.87％。該菌株還可以在同樣條件下，發(fā)酵130g/L葡萄糖得到乙醇50.965g/L，達(dá)到理論值的76.90％。將80g/L木糖按照30g/L，20g/L和30g/L的比例分3次添加，乙醇的產(chǎn)率比一次性添加80g/L木糖的提高了9.91％。在葡萄糖和木糖的混合培養(yǎng)基中，優(yōu)先利用葡萄糖，同時(shí)還表現(xiàn)出葡萄糖對(duì)木糖發(fā)酵的促進(jìn)作用，當(dāng)20g/L的木糖與60g/L葡萄糖混合時(shí)，乙醇產(chǎn)量比兩者單獨(dú)發(fā)酵的加和提高了25％。 菌株6

4、21在28℃，120r/min，72h條件下，在木糖濃度為30g/L時(shí)，產(chǎn)率最大，為理論值的35.08％；發(fā)酵90g/L木糖得到的乙醇產(chǎn)量最高，為6.059g/L；發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)到156h，發(fā)酵80g/L木糖產(chǎn)乙醇15.59g/L。將80g/L木糖按照30g/L，20g/L和30g/L的比例分3次添加，乙醇的產(chǎn)率比一次性添加80g/L木糖的提高了11.00％。在葡萄糖和木糖的混合培養(yǎng)基中，優(yōu)先利用葡萄糖，同時(shí)還表現(xiàn)出葡萄糖對(duì)木糖發(fā)酵的促進(jìn)

5、作用，當(dāng)60g/L木糖與20g/L葡萄糖混合時(shí)，乙醇產(chǎn)量比兩者單獨(dú)發(fā)酵的加和提高了22％。對(duì)這兩個(gè)菌株發(fā)酵不同糖的產(chǎn)物進(jìn)行了氣相色譜分析GC，純度高，雜質(zhì)少。提高通氧水平對(duì)發(fā)酵也有促進(jìn)作用。 另外，發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)菌株具有很好的耐高滲性能。兩菌株有較好的耐高滲透壓生長(zhǎng)特性，試驗(yàn)表明菌株3可以耐受12％的NaCl，6％的乙醇和58％的葡萄糖；菌株621可以耐受16％的NaCl，4％的乙醇和61％的葡萄糖。10％的NaCl對(duì)其發(fā)酵木糖和葡