產(chǎn)植酸酶菌株的篩選、誘變及產(chǎn)酶性質(zhì)的初步研究.pdf

1、植酸酶是催化植酸及植酸鹽水解成肌醇和磷酸及磷酸鹽的一類酶,將其添加到單胃動物植物性食品與飼料中,可以使植酸水解成肌醇和磷酸而被單胃動物所利用,而且釋放被植酸絡(luò)合的Ca2+、Mg2+、Zn2+等礦物元素和一些蛋白質(zhì),從而解除植酸的抗?fàn)I養(yǎng)作用、提高食品與飼料的利用率、促進(jìn)動物生長、減少了動物糞便中磷的殘留量、降低環(huán)境的磷污染。
　　植酸酶在動物、植物和微生物中均有發(fā)現(xiàn)。微生物植酸酶由于種類豐富、表達(dá)量相對較大、容易提取而成為商品植酸酶

2、的重要來源。雖然國內(nèi)外已經(jīng)有數(shù)種植酸酶商品問世,但還沒有一種非常完美的產(chǎn)品。利用誘變手段改善植酸酶性質(zhì)、提高植酸酶生產(chǎn)能力是當(dāng)今植酸酶研究的主要方向。
　　本實(shí)驗(yàn)室從煙臺大學(xué)校園內(nèi)富含有機(jī)質(zhì)的環(huán)境中采集土樣,通過植酸鈣平板透明圈法初篩和維生素C-硫酸-鉬酸銨-酒石酸銻鉀法測定植酸酶酶活復(fù)篩,共篩選到5株產(chǎn)植酸酶的霉菌,其中植酸酶活性最高的一株酶活為36.7U/ml。對這5株產(chǎn)植酸酶菌株進(jìn)行紫外線誘變,得到3株酶活最高且產(chǎn)酶穩(wěn)定的誘

3、變株UV-117、UV-422和UV-509,酶活分別為47.2U/ml、43.3U/ml和55.0U/ml,將這3株誘變株進(jìn)一步用亞硝基胍誘變,最終獲得一株高產(chǎn)植酸酶突變株NTG-506,酶活達(dá)到112U/ml,比原始出發(fā)菌株的酶活提高了3.2倍。
　　突變株NTG-506進(jìn)行了發(fā)酵產(chǎn)酶條件的優(yōu)化和酶學(xué)性質(zhì)的初步研究,NTG-506在250mL三角瓶中發(fā)酵培養(yǎng),在裝液量60ml,接種量2％時(shí),培養(yǎng)第4d酶活達(dá)到最高,為124.5