NAFLD發(fā)病與小腸黏膜病變關系及替度魯肽對NAFLD治療作用的探討.pdf

1、【目的】
　　通過高脂飲食建立大鼠非酒精性脂肪性肝?。∟on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）模型，觀察NAFLD與小腸黏膜屏障病變的關系，觀察替度魯肽對大鼠NAFLD的治療作用，探討小腸黏膜病變在NAFLD發(fā)生中的潛在作用。
　　【材料和方法】
　　第一章：
　　48只雄性SD大鼠隨機分為正常飲食組（CD組，n=24）和高脂飲食組（HFD組。n=24），各組自由進食，實驗

2、期間，每天觀察大鼠的一般狀況（包括飲食、毛發(fā)等變化），每兩天記錄飼料、飲水量及體重。各組喂養(yǎng)于第6、8、10、12周末，分別從中隨機取6只大鼠，乙醚局部麻醉后眼眶取血，處死大鼠收集肝臟做病理HE染色、十二指腸/空腸標本做病理蘇木素-伊紅（HE）及免疫組化（IHC）染色等相關檢測。
　　第二章：
　　54只雄性SD大鼠隨機分為正常飲食組（ND組，n=18）、NAFLD組（n=18）和GLP-2組（n=18），各組自由進食于第8

3、、10、12周末，分別從中隨機取6只大鼠，GLP-2組每日腹腔注射替度魯肽液（250μg/kg，即0.1 mL/100 g）2次，ND組與NAFLD組每日于腹腔注射等體積生理鹽水2次，注射7天后，各組大鼠乙醚局部麻醉后眼眶取血，處死大鼠收集肝臟、十二指腸、空腸標本進行相關檢測。
　　【結果】
　　第一章：
　?。?）HFD組大鼠體重高于同期CD組大鼠，并于喂養(yǎng)第4周后起差異出現統(tǒng)計學意義；HFD組血清TC、TG、LDL

4、C等血脂水平隨喂養(yǎng)時間延長而升高且較同期CD組高，差異逐漸出現統(tǒng)計學意義；兩組大鼠HDLC水平未見明顯差異；HFD組肝臟勻漿TC、TG水平較同期CD組高（P<0.05）；HFD組血清ALT、AST水平較同期CD組高（P<0.05）。
　　（2）HFD組肝臟NAS評分從第6周起顯著高于同期CD組大鼠（P<0.01）。
　?。?）HFD組十二指腸/空腸HE染色從第8周起可見細胞排列變松弛、細胞間隙增大。HFD組十二指腸/空腸黏膜

5、上皮ZO-1蛋白IHC評分從第10周起明顯低于CD組（P<0.01），而Claudin-2蛋白IHC評分從第10周起明顯高于CD組（P<0.01）。
　　第二章：
　?。?）各組大鼠體重總體呈上升趨勢，NAFLD組、GLP-2組大鼠體重均高于同期ND組，第13周時差異明顯（P<0.05）；GLP-2組血清TC、TG稍高于同期ND組，第13周才有明顯差異（P<0.05）；GLP-2組LDLC水平略高于ND組，僅第9周差異有統(tǒng)計

6、學意義（P<0.05）；三組大鼠HDLC水平未見明顯差異；GLP-2組肝臟勻漿TC及TG水平、血清ALT及AST水平低于同期NAFLD組（P<0.05）但仍高于同期CD組（P<0.05）。
　　（2）GLP-2組肝臟NAS評分從第9周起低于NAFLD組（P<0.01）但仍高于同期CD組（P<0.05）。
　?。?）NAFLD組十二指腸/空腸HE染色可見明顯細胞排列疏松、細胞間隙增大，ND組和GLP-2組均未見細胞間隙明顯增大

7、。GLP-2組十二指腸/空腸ZO-1蛋白IHC評分高于NAFLD組（P<0.01）但低于同期ND組（P<0.05）；十二指腸/空腸黏膜上皮Claudin-2蛋白IHC評分明顯低于同期NAFLD組（P<0.01），僅略高于同期ND組。
　　【結論】
　　NAFLD發(fā)病可導致腸道黏膜細胞間隙增大，ZO-1蛋白表達減少、Claudin-2蛋白表達升高；替度魯肽可能通過調節(jié)NAFLD大鼠腸道黏膜ZO-1和Claudin-2蛋白的表達