天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對小鼠小腸黏膜免疫的影響及其作用機制.pdf

1、目的：研究天蠶素 A-馬蓋寧雜合肽對小鼠小腸黏膜免疫功能的影響并探討其作用機制。
　　方法：表達天蠶素A-馬蓋寧雜合肽混合檢測蛋白質濃度；取18只SPF級雌性、6周齡、體重相近的BALB/c小鼠隨機分組：空白組（0.9％生理鹽水0.75mL）、低劑量雜合肽組（1/2原液蛋白質濃度雜合肽0.75mL）、高劑量雜合肽組（原液蛋白質濃度雜合肽0.75mL）灌胃六周。于灌胃開始前后記錄空腹體重并計算平均日增重； HE染色觀察小腸黏膜形態(tài)；

2、平板計數(shù)測定盲腸內(nèi)容物腸道菌群；BrdU摻入法檢測Peyer’s patches處 T、B淋巴細胞的增殖能力；免疫組化測定小腸黏膜內(nèi) IgA的陽性表達量； ELISA測定小腸組織勻漿液中IL-2、IFN-γ和IL-4的含量以及IFN–γ/IL-4；Real-time PCR檢測小腸組織NF-КB mRNA水平及ELISA測定小腸組織勻漿液內(nèi)NF-КB蛋白的表達量。
　　結果：天蠶素A-馬蓋寧雜合肽有明顯抑菌活性，混合后蛋白質濃度為

3、0.52 mg/mL；灌胃6周后，雜合肽組小鼠體重顯著大于空白組（P<0.05）；十二指腸絨毛長度顯著大于空白組（P<0.05）；各段小腸隱窩深度均明顯低于空白組（P<0.05）且V/C均明顯高于空白組（P<0.05）；雜合肽組盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌數(shù)量顯著低于空白組（P<0.05），雙歧桿菌與乳酸桿菌數(shù)量顯著高于空白組（P<0.05）且有劑量依賴性；雜合肽組小腸集合淋巴結內(nèi)CD3+T細胞中CD3+BrdU+細胞百分率及B220+B細胞中

4、B220+BrdU+細胞百分率均顯著高于空白組（P<0.05）；雜合肽組小腸黏膜內(nèi)IgA及IL-2、IFN-γ和IL-4的陽性表達水平均顯著升高（P<0.05），IFN-γ/IL-4差異不顯著（P<0.05）；小腸組織中NF-КB mRNA水平及蛋白表達量均顯著高于空白組（P<0.05）。
　　結論：天蠶素 A-馬蓋寧雜合肽雜合肽灌胃6周后可提高小鼠的體重及小腸黏膜免疫水平。機制是有效改善小腸黏膜結構促進營養(yǎng)物質的消化吸收；顯著降