五甲基槲皮素改善DIO小鼠代謝異常和NAFLD的作用及機制研究.pdf

1、高脂飲食(High fat diet, HFD)誘導的肥胖小鼠模型是最常用的DIO(Diet-induced obesity,DIO)模型之一，該模型小鼠主要表現(xiàn)為向心性肥胖、糖脂代謝異常、胰島素抵抗和肝臟病變等。PMQ(Pentamethylquercetin, PMQ)是天然的多甲氧基黃酮類化合物，本課題組前期研究表明PMQ可改善MSG-IO小鼠的肥胖及相關(guān)癥狀。本研究擬建立DIO小鼠代謝異常和非酒精性脂肪肝病(Non-alcoho

2、lic fatty liver disease, NAFLD)模型，在該模型上求證PMQ對代謝異常和NAFLD的改善作用，并對作用機制進行更深入的探討。
　　第一部分：DIO小鼠模型的建立。
　　目的：建立DIO小鼠模型。
　　方法：將C57/BL6小鼠于第5周齡時隨機分為兩組，即：NFD正常組和HFD模型組，每組15只，按組別分別給予正常飼料和高脂飼料，自由進食和飲水，每周稱量體重并計算體重增量。22周齡時進行口服糖

3、耐量試驗(oral glucose tolerance test,OGTT)，24周齡時宰殺收集樣本并檢測各組小鼠肝臟病理狀況和血生化指標。采用RT-PCR檢測各組小鼠肝臟代謝相關(guān)重要因子mRNA的表達。
　　結(jié)果：（1）DIO小鼠出現(xiàn)明顯的肥胖癥狀，主要表現(xiàn)為體重、腰圍、Lee指數(shù)及脂肪顯著增加；（2）DIO小鼠出現(xiàn)糖耐量受損，甘油三酯、總膽固醇、LDL-C、空腹血糖、血清胰島素升高，出現(xiàn)胰島素抵抗的癥狀；病理結(jié)果顯示肝臟出現(xiàn)明

4、顯的脂肪變性；（3）高脂飲食導致FASN、CD36、PPARγ、PCSK9、SREBPs以及TNFα mRNA表達上調(diào)； PGC1α、PGC-1β、PPARβ、SIRT6和PTEN mRNA表達下調(diào)。
　　結(jié)論：DIO小鼠出現(xiàn)明顯的向心性肥胖、糖脂代謝異常、胰島素抵抗和肝臟病變等，為深入探索代謝異常和NAFLD的病理機制及相關(guān)藥效學研究提供理想病理模型。
　　第二部分：五甲基槲皮素改善DIO小鼠非酒精性脂肪肝病。
　　

5、目的：探索PMQ改善DIO小鼠非酒精性脂肪肝病的作用及機制。
　　方法：將C57/BL6小鼠于第5周齡時隨機分為正常組（NFD）、模型組（HFD）、HFD+溶劑、HFD+PMQ5、HFD+PMQ10、HFD+PMQ20、HFD+RSD5和HFD+MET300共8組，每組15只。正常組給予正常飼料飼養(yǎng)，而其他組均給予高脂飼料飼養(yǎng)，并同時開始按Vehicle、PMQ5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg，RSG5mg/kg，ME

6、T300mg/kg灌胃給藥。22周齡時進行口服糖耐量試驗，24周齡時宰殺收集樣本，記錄肝臟、皮下脂肪、肩胛脂和附睪脂重量，檢測各組小鼠肝臟病理狀況和血生化指標。采用RT-PCR檢測各組小鼠肝臟代謝相關(guān)重要因子mRNA的表達。
　　結(jié)果：（1）與溶劑組比，PMQ能夠明顯改善 DIO小鼠肥胖狀態(tài)，DIO小鼠的體重、腰圍、Lee指數(shù)明顯降低；（2）與溶劑組比，PMQ能夠明顯改善DIO小鼠血清TC、TG、LDL-C、空腹血糖、OGTT、血

7、清胰島素及胰島素抵抗指數(shù)等指標；病理結(jié)果提示PMQ能夠緩解肝臟脂肪變性；（3）與溶劑組比，PMQ能夠調(diào)控肝臟mRNA表達水平，不同程度下調(diào)FASN、CD36、PCSK9、SREBPs、TNFαmRNA的表達；上調(diào)PGC-1α、PGC-1β、PPARβ、SIRT6和PTEN mRNA的表達。
　　結(jié)論：（1）PMQ能夠明顯改善DIO小鼠的代謝異常和非酒精性脂肪肝病；（2）以下信號通路可能參與五甲基槲皮素改善代謝異常和NAFLD：①P