五甲基槲皮素對(duì)MSG肥胖小鼠肝臟氧化應(yīng)激和胰島素抵抗的作用研究.pdf

1、五甲基槲皮素（pentamethylquercetin，PMQ）是一種多甲氧基黃酮類(lèi)化合物，前期研究已證實(shí)PMQ可在多種肥胖小鼠模型中改善糖脂代謝、緩解胰島素抵抗，其作用機(jī)制尚待深入研究。氧化應(yīng)激對(duì)胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展具有重要影響?？寡趸瘧?yīng)激蛋白Sestrin2促進(jìn)Keap1自噬降解，釋放Nrf2入核，改善氧化應(yīng)激。Kelch樣ECH相關(guān)蛋白-1（Kelch-like ECH-associated protein1，Keap1）-核因子

2、E2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor-2，Nrf2）信號(hào)通路及其調(diào)控的抗氧化蛋白是關(guān)鍵的內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)。有研究表明活化Nrf2通路能夠改善高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠胰島素抵抗。本課題在谷氨酸鈉（monosodium glutamate，MSG）誘導(dǎo)的肥胖小鼠模型上，就肝臟Sestrin2-Keap1-Nrf2信號(hào)通路及其調(diào)控探討PMQ對(duì)肝臟氧化應(yīng)激和胰島素抵抗的作用及可能機(jī)制。

3、
　　目的：研究五甲基槲皮素抗肝臟氧化應(yīng)激和胰島素抵抗的作用及可能機(jī)制。
　　方法：從CD1乳鼠出生第2天起，使用微量注射器皮下注射MSG（3mg/g），每天1次，連續(xù)注射7天。正常對(duì)照組皮下注射等量生理鹽水（Control）。21天后將斷乳小鼠雌雄分籠飼養(yǎng)。選取雄性MSG造模小鼠，隨機(jī)分為MSG模型組、PMQ給藥組（分為PMQ5、10、20mg/kg三個(gè)劑量組）和陽(yáng)性藥二甲雙胍（metformin，Met）給藥組（劑量30

4、0mg/kg），每組12只小鼠。正常對(duì)照組（n=12）和MSG模型組小鼠持續(xù)飼以常規(guī)食水，PMQ給藥組從8周齡起飼以含不同劑量PMQ的飼料和常規(guī)飲水，Met給藥組從8周齡起飼以含藥飲水和常規(guī)飼料。實(shí)驗(yàn)期間監(jiān)測(cè)小鼠每周的食水耗量及體重。18周齡時(shí)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（oral glucose tolerance test,OGTT）。24周齡時(shí)測(cè)量各組小鼠的體重、腰圍和體長(zhǎng)，經(jīng)眼眶采血后處死小鼠，測(cè)量總體脂和附睪脂肪重量、肝臟重量，留取肝

5、臟組織標(biāo)本。檢測(cè)血清中甘油三酯（triglyceride，TG）、膽固醇（total cholesterol，TC）、葡萄糖和胰島素含量；行肝臟組織切片進(jìn)行HE染色和油紅O染色；檢測(cè)肝臟組織超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；RT-PCR及Western blot法檢測(cè)小鼠肝臟組織Keap1、Nrf2、血紅素氧合酶1（Heme oxygenase-1，

6、HO-1）和sestrin2的mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：（1）與Control組相比，MSG造模小鼠具有明顯肥胖和糖脂代謝紊亂特征，表現(xiàn)為體重、體重增重、腰圍、Lee指數(shù)、總體脂和附睪脂重量顯著增加，口服葡萄糖耐量受損，胰島素抵抗指數(shù)升高，空腹血糖、血胰島素以及血TG、TC水平明顯增高；MSG肥胖小鼠出現(xiàn)肝臟脂肪變性并伴有氧化應(yīng)激損傷，表現(xiàn)為肝臟組織形態(tài)學(xué)發(fā)生明顯改變，肝臟組織SOD含量顯著降低，MDA含量則顯著升高；肝

7、臟組織Nrf2和HO-1的 mRNA表達(dá)明顯降低，而Keap1的mRNA表達(dá)明顯升高，這些因子的蛋白表達(dá)與mRNA表達(dá)的變化趨勢(shì)基本一致；MSG肥胖小鼠肝臟Sestrin2蛋白表達(dá)顯著降低。（2）與MSG模型組相比，不同劑量PMQ給藥組小鼠體重和體重增重均不同程度地減輕，Lee指數(shù)下降，總體脂和肝臟重量降低，且PMQ作用呈劑量依賴(lài)性；PMQ可劑量依賴(lài)性地降低空腹血糖、血胰島素，顯著提高葡萄糖耐量，降低胰島素抵抗指數(shù)；PMQ可明顯降低血T