清肝滋腎中藥激活高脂喂養(yǎng)SHR大鼠肝臟組織SIRT1表達(dá)減輕其脂肪沉積改善代謝紊亂的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　觀察清肝滋腎中藥（針箭顆粒Ⅱ號(hào)）對(duì)高脂喂養(yǎng)的SHR大鼠血糖、肝臟組織的脂質(zhì)浸潤(rùn)狀況及對(duì)肝臟組織SIRT1、PTP1B蛋白表達(dá)水平變化的影響，并初步探討其作用的分子機(jī)制。
　　方法：
　　選用18只4周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)，隨機(jī)的分成對(duì)照組、模型組及針箭顆粒組，各組均為6只。適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后，對(duì)照組予基礎(chǔ)飼料和相同劑量0.5％纖維素鈉安慰劑灌胃，模型組予高脂飼料和相同劑量0.5％纖維素鈉安慰劑灌胃

2、，針箭顆粒組予高脂飼料和清肝滋腎中藥（針箭顆粒Ⅱ號(hào)）混懸液(22.5g/kg/d)灌胃，共灌胃9周。在灌胃第8周時(shí)，各組大鼠禁食8-12小時(shí)，然后分別進(jìn)行口服糖耐量試驗(yàn)，測(cè)定0min、30min、60min、90min、120min時(shí)血糖值，記錄結(jié)果。待灌胃結(jié)束后，處死大鼠，提取各組大鼠的肝臟組織，生理鹽水沖洗，4％的多聚甲醛固定，石蠟包埋、切片，分組予HE染色、油紅0染色觀察肝臟細(xì)胞脂肪浸潤(rùn)情況，采用Western blot法測(cè)定肝臟

3、組織Sirt1、PTP1B蛋白的表達(dá)，并運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)上述所得數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05為差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　糖耐量試驗(yàn)(OGTT)結(jié)果:與對(duì)照組比較，模型組大鼠60 min、90 min血糖水平均明顯增高（P值依次為0.018、0.044＜0.05），且120 min血糖仍未回到空腹水平;而與模型組比較，針箭顆粒組各時(shí)段血糖水平下降不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　Western blo

4、t法檢測(cè)各組大鼠肝臟組織Sirt1、PTP1B蛋白的表達(dá):
　　(1)肝臟組織Sirt1蛋白表達(dá)中:與對(duì)照組相比，模型組肝臟組織Sirt1蛋白表達(dá)水平顯著下降（P=0.000＜0.01）;與模型組比較，針箭顆粒組肝臟組織Sirt1蛋白表達(dá)水平也明顯上調(diào)（P=0.042＜0.05），差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(2)肝臟組織PTP1B蛋白表達(dá)中:與對(duì)照組相比，模型組的肝臟組織PTP1B蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)（P=0.000＜0.

5、01）;與模型組比較，針箭顆粒組肝臟組織PTP1B蛋白表達(dá)則明顯下降（P=0.000＜0.01），差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　大鼠肝臟組織病理形態(tài)觀察:
　　(1) HE染色結(jié)果對(duì)照組大鼠的肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞索整齊，核結(jié)構(gòu)也較清晰，肝細(xì)胞無(wú)明顯病理改變;模型組大鼠肝組織結(jié)構(gòu)紊亂，細(xì)胞索不整齊，部分肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性、沉積，呈大泡樣改變;針箭顆粒組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)較模型組有所恢復(fù)，雖亦可見少許脂肪浸潤(rùn)及脂肪空泡，但較模型組的

6、程度明顯減輕，且未見明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　(2)油紅0染色結(jié)果對(duì)照組大鼠肝臟組織未見脂肪沉積，而模型組大鼠肝臟組織可見密集的脂滴，顯示大量脂肪浸潤(rùn)，而針箭顆粒組肝臟組織的脂滴密度和大小較模型組均有顯著降低。
　　結(jié)論：
　　1.清肝滋腎中藥（針箭顆粒Ⅱ號(hào)）能一定程度改善高血壓合并代謝紊亂的血脂代謝異常，減輕肝臟組織脂肪沉積、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，而對(duì)血糖的影響在本實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)不明顯。
　　2.高血壓伴有代謝紊亂較單純高血