Caspase-3抑制劑Ac-DEVD-CHO抑制雞形覺剝奪性近視眼視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文Caspase3抑制劑AcDEVDCHO抑制雞形覺剝奪性近視眼視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的研究姓名：毛俊峰申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：劉雙珍20050501博士學(xué)位論文中文摘要結(jié)論：雞FDM發(fā)展過程中隨著眼球異常生長，眼底發(fā)生退行性改變，視網(wǎng)膜內(nèi)、外核層細(xì)胞出現(xiàn)明顯的凋亡現(xiàn)象，凋亡是其視網(wǎng)膜細(xì)胞死亡的機(jī)制之一。第二章：Ac—DEvD—cHo抑制雞形覺剝奪性近視眼視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡目的：探討雞FDM視網(wǎng)膜內(nèi)、外核層細(xì)胞凋

2、亡的分子機(jī)制及caspase一3抑制劑Ac—DEⅧ一cH0對其視網(wǎng)膜細(xì)胞的保護(hù)作用。方法：眼瞼縫合法建立雞FDM模型。90只海蘭雞雛隨機(jī)分為6組：A組(正常對照組)、B組(眼瞼縫合12wk組)、C組(眼瞼縫合12wk生理鹽水組)、D組(眼瞼縫合12、vkAc—DEVDCH0lug組)、E組(眼瞼縫合12wkAcDEVDCHO5ug組)、F組(眼瞼縫合12wkAcDEVDCHO10ug)組，每組15只。除A組外，各組均以對側(cè)未縫合眼作自身

3、對照，觀察雞FDM形成。按預(yù)定時(shí)間縫合眼玻璃體腔注射AcDEVDCH0或生理鹽水后檢影驗(yàn)光，游標(biāo)卡尺測眼球外徑，TuNEL技術(shù)及流式細(xì)胞術(shù)檢測視網(wǎng)膜凋亡細(xì)胞，免疫組化染色法、流式細(xì)胞術(shù)和色敏比色法分析視網(wǎng)膜Caspase3蛋白的表達(dá)情況及活性變化。結(jié)果：B、C、D、E、F組縫合眼分別與自身對照眼、A組比較，其屈光度加深、眼球外徑增大。在B、c、D、E組縫合眼視網(wǎng)膜內(nèi)、外核層及F組視網(wǎng)膜內(nèi)核層發(fā)現(xiàn)凋亡細(xì)胞，凋亡率均高于A組(P005)，其

4、視網(wǎng)膜caspase3蛋白陽性表達(dá)率及活性亦高于A組(P：O05)。玻璃體腔注射Ac_DEVD—CH0后，縫合眼視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡率、Caspase一3蛋白的陽性表達(dá)率及活性均降低，且Ac—DEvD—cH0抑制視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的作用隨劑量增大而增強(qiáng)?？p合眼視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡率與caspase3蛋白的陽性表達(dá)率(r=0898，仁O000)及活性(嚴(yán)O959，盧0ooO)均有直線相關(guān)關(guān)系。結(jié)論：caspase一3在雞FDM視網(wǎng)膜內(nèi)、外核層細(xì)胞的凋亡過