豚鼠形覺剝奪性近視視網(wǎng)膜中褪黑素受體的表達(dá)及眼壓變化的研究.pdf

1、背景和目的：
　　近視是一種常見類型的屈光不正,多發(fā)生于生長發(fā)育期的青少年,表現(xiàn)為視力障礙、視疲勞及眼位偏斜等。近視眼病因?qū)W的研究已有二百余年的歷史,涉及種族遺傳因素、環(huán)境因素、眼的解剖、生理、血供、營養(yǎng)和植物神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等,包括遺傳傾向,相關(guān)基因定位,鞏膜膠原自體免疫學(xué)說,視網(wǎng)膜生物活性物質(zhì)失調(diào)學(xué)說等等。形覺剝奪學(xué)說認(rèn)為:影響視網(wǎng)膜上正常成像的因素可導(dǎo)致眼球異常生長,表現(xiàn)為眼軸過度增長,形成近視。1977年形覺

2、剝奪性近視(Form Deprived Myopia,FDM)動(dòng)物模型被成功建立,從此近視的基礎(chǔ)研究取得了突破性的進(jìn)展。褪黑素(melatonin)為一種吲哚按類激素,在眼病理生理學(xué)中起重要的作用。哺乳動(dòng)物及人眼部視網(wǎng)膜及其外大部分眼部組織中存在褪黑素受體MT1、MT2,褪黑素通過其受體MT1、MT2可調(diào)節(jié)眼軸長度和房水生成,兩者均可以參與調(diào)節(jié)眼壓。近視的形成與眼壓有關(guān),眼壓與眼軸長度呈正相關(guān)。
　　本實(shí)驗(yàn)的目的是檢測形覺剝奪性近

3、視視網(wǎng)膜組織中褪黑素受體MT1表達(dá)以及眼壓的變化,進(jìn)而研究兩者是否參與了形覺剝奪性近視的形成。
　　材料和方法：
　　選用出生5~7d的豚鼠20只,實(shí)驗(yàn)前對(duì)豚鼠進(jìn)行散瞳檢影驗(yàn)光,排除先天性近視,用形覺剝奪的方法建立近視眼動(dòng)物模型。用半透明眼罩遮蓋豚鼠右眼,作為實(shí)驗(yàn)組;左眼開放作為正常對(duì)照組。形覺剝奪8周后,兩組均采用視網(wǎng)膜檢影驗(yàn)光檢測屈光度;眼科A超測定活體眼軸長度;分別于實(shí)驗(yàn)前和遮蓋8周后測量實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組眼壓。摘出眼球,

4、取赤道部后鞏膜及視網(wǎng)膜組織,清除角膜,晶狀體,玻璃體及周圍結(jié)締組織,固定、脫水、二甲苯透明、石蠟包埋,4μm連續(xù)切片。采用SP免疫組織化學(xué)技術(shù),檢測視網(wǎng)膜中MT1的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　(1)形覺剝奪前,實(shí)驗(yàn)眼和對(duì)照眼屈光度和眼軸長度無明顯差異(P>0.05)。形覺剝奪8周后與對(duì)照眼相比,實(shí)驗(yàn)眼誘導(dǎo)出-6.65±0.65D(t=59.035,P<0.01)的相對(duì)近視,眼軸較對(duì)照眼延長(0.85±0.24)mm(t=23

5、.83,P<0.01)。
　　(2)形覺剝奪前雙眼眼壓無明顯差異(P>0.05)。形覺剝奪8周后實(shí)驗(yàn)眼眼壓較對(duì)照眼升高(4.06±1.37)mmHg(t=21.37,P<0.01)。
　　(3)MT1免疫組化染色結(jié)果:MT1蛋白在豚鼠自身對(duì)照眼的視網(wǎng)膜內(nèi)免疫陽性產(chǎn)物主要位于色素上皮層、外核層和內(nèi)核層,細(xì)胞核和胞漿內(nèi)均表達(dá);而在實(shí)驗(yàn)眼中主要表達(dá)于內(nèi)核層的胞漿內(nèi)。實(shí)驗(yàn)眼平均灰度值和陽性區(qū)(內(nèi)核層)灰度值較自身對(duì)照眼相比均減少,差