形覺剝奪和閃爍光對C57BL-6J小鼠視網膜基因和蛋白質表達的影響與近視眼發(fā)生機制研究.pdf

1、中山大學碩士學位論文形覺剝奪和閃爍光對C57BL6J小鼠視網膜基因和蛋白質表達的影響與近視眼發(fā)生機制研究姓名：李賽群申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學指導教師：鐘興武20090413中山大學碩士學位論文中文摘要作為空白對照。其中I組和IⅡ組小鼠采用正常日光燈照明，而II組小鼠暴露于20Hz左右的閃爍光。匹配三組小鼠眼水平的光照度為301u)【，光照周期為12h：12h。視覺處理14天后，斷頸法處死動物，分離視網膜，提取視網膜總蛋白，進行雙向

2、凝膠電泳。凝膠采用銬瑪斯亮藍染色后，應用ImageMaSter2DPlatin啪50軟件分析凝膠，根據(jù)差異倍數(shù)2倍選取差異表達蛋白點。切取差異表達蛋白點用胰酶消化并進行MALDIT’OF質譜分析和NCBI數(shù)據(jù)庫查詢。選取差異倍數(shù)最大的蛋白點進行WesternB10tting驗證。結果：凝膠圖像分析軟件分析顯示，形覺剝奪組實驗眼(FDTreated)和形覺剝奪閃爍光組實驗眼(Flicker1’reated)之間存在5個差異表達蛋白。質譜分

3、析最后確認這5個蛋白點均歸屬于晶狀體蛋白家族的成員：aA晶體蛋白、晶體蛋白DAl、aA晶狀體蛋白、晶體蛋白pA2、晶體蛋白DAl。然后，通過對QA晶體蛋白的WeStemBloning驗證分析發(fā)現(xiàn)，相對空白對照眼(ContmI)，形覺剝奪組實驗眼(FDTreated)視網膜aA晶體蛋白表達顯著上調(P：0033)；相反，相對于形覺剝奪組實驗眼(FDTreated)，形覺剝奪閃爍光組實驗眼(nicker1’reated)視網膜僅A晶體蛋白的

4、表達下調。結論：形覺剝奪和閃爍光已被證實分別為近視誘導／阻遏的視覺信號。本實驗結果顯示，形覺剝奪能使aA晶體蛋白等部分晶體蛋白家族成員表達上調，相反，閃爍光則下調這些晶體蛋白家族成員的表達。這表明，晶體蛋白家族的某些成員可能參與了近視眼眼球生長調控。本課題的下一步研究將進一步深入探討晶體蛋白相關的蛋白網絡在近視眼發(fā)生中扮演的角色。(二)形覺剝奪和閃爍光對視網膜基因差異表達譜的影響研究目的：采用基因芯片技術研究短時間形覺剝奪和閃爍光導致的