簡(jiǎn)介：柑橘黃龍?。–ITRUSHUANGLONGBING，HLB）是當(dāng)前世界柑橘產(chǎn)業(yè)的頭號(hào)殺手。該病能侵染幾乎所有的柑橘栽培品種，目前尚無(wú)有效治愈手段。其病原暫定于Α變型菌綱（PROTEOBACTERIA）、韌皮桿菌屬（LIBERIBACTER），是一種韌皮部專性寄生的難培養(yǎng)革蘭氏陰性細(xì)菌，根據(jù)16SRDNA序列不同可將其分為三個(gè)種亞洲種（‘CIDATUSLIBERIBACTERASIATICUS’LAS）、非洲種（‘CALIBERIBACTERAFRICANUS’LAF）、美洲種（‘CALIBERIBACTERAMERICANUS’LAM），其中LAS分布最廣，且危害最大。迄今，在柑橘栽培種中尚未發(fā)現(xiàn)黃龍病抗性基因，嚴(yán)重制約了抗性育種的進(jìn)程。有研究表明，馬蜂柑（CITRUSHYSTRIX）對(duì)黃龍病具有一定的耐病性，但其耐病機(jī)制尚不清楚。中國(guó)是世界柑橘的重要起源中心，有著豐富的野生柑橘資源，而這些野生資源對(duì)黃龍病的抗感性缺乏系統(tǒng)研究。因此，本研究以馬蜂柑、宜昌橙（CICHANGENSIS）、道縣野橘（CDAOXIANENSIS）等野生柑橘資源為研究材料，以甜橙（CSINENSIS）為敏感對(duì)照品種，接種毒源后進(jìn)行生物學(xué)癥狀觀察，并利用定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（QUANTITATIVEPOLYMERASECHAINREACTIONQPCR）定期檢測(cè)LAS在不同寄主中的含量變化；同時(shí)對(duì)其進(jìn)行比較轉(zhuǎn)錄組分析，以期從轉(zhuǎn)錄水平上解析野生柑橘和甜橙對(duì)LAS的應(yīng)答機(jī)制差異，為抗耐黃龍病常規(guī)和轉(zhuǎn)基因育種提供新思路。所獲得的主要研究結(jié)果如下1通過毒源嫁接和QPCR定期檢測(cè)，結(jié)果表明，野生柑橘和甜橙均在接種約90D能檢測(cè)到LAS。進(jìn)一步比較宜昌橙、道縣野橘和甜橙中病原菌含量的變化，發(fā)現(xiàn)從接種約120D開始，LAS在甜橙中的含量遠(yuǎn)高于宜昌橙和道縣野橘，初步表明LAS在甜橙中的增殖速度高于野生柑橘；癥狀觀察發(fā)現(xiàn)，馬蜂柑和宜昌橙幾乎不顯癥，道縣野橘部分葉片出現(xiàn)輕微黃化，而甜橙感染黃龍病后表現(xiàn)出明顯的葉片變小、黃化的現(xiàn)象，表明馬蜂柑和宜昌橙對(duì)黃龍病具有潛在的耐病性。2對(duì)感染初期的耐病品種馬蜂柑和感病品種甜橙進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，篩選出耐病相關(guān)的差異表達(dá)基因并進(jìn)行了QPCR驗(yàn)證。結(jié)果表明，甜橙感染LAS后共有604個(gè)基因差異表達(dá)，其中254個(gè)上調(diào)，350個(gè)下調(diào)，而馬蜂柑感染LAS后共252個(gè)基因差異表達(dá)，其中179個(gè)上調(diào)，73個(gè)下調(diào)，染病馬蜂柑與染病甜橙相比共有4651個(gè)基因差異表達(dá)，其中2137個(gè)上調(diào)，2514個(gè)下調(diào)。LAS誘導(dǎo)的代謝途徑涉及糖代謝、光合作用、細(xì)胞壁代謝、次生物質(zhì)代謝、PR蛋白（PATHOGENESISRELATEDPROTEIN）、氧化還原反應(yīng)等。值得注意的是，與健康對(duì)照相比，染病甜橙中編碼淀粉合成酶（GLGA）的兩個(gè)基因上調(diào)表達(dá)4倍以上，與淀粉分解有關(guān)的Β淀粉酶（BAM）基因下調(diào)表達(dá)，而它們?cè)谌静●R蜂柑中表達(dá)無(wú)顯著差異。染病馬蜂柑中大部分與細(xì)胞壁和次生產(chǎn)物代謝途徑相關(guān)的基因上調(diào)表達(dá)，而甜橙中該途徑相關(guān)基因大部分下調(diào)表達(dá)。另外，多個(gè)與植物抗病相關(guān)的PR蛋白相關(guān)基因被LAS誘導(dǎo)差異表達(dá)，部分抗病蛋白相關(guān)基因的表達(dá)水平較敏感品種更高。RTQPCR驗(yàn)證結(jié)果表明，在挑選的20個(gè)差異表達(dá)基因中，18個(gè)基因的驗(yàn)證結(jié)果與RNASEQ測(cè)序結(jié)果的變化趨勢(shì)基本保持一致，表明了RNASEQ具有較高的可靠性和準(zhǔn)確性。3對(duì)宜昌橙、道縣野橘和甜橙進(jìn)行了感病后期的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，結(jié)果顯示，宜昌橙、道縣野橘和甜橙接種LAS約240D分別有592、987和2844個(gè)基因差異表達(dá)，與其接種LAS后的顯癥程度呈現(xiàn)出一致性。LAS侵染后期，與致病相關(guān)的淀粉合成、PP2蛋白相關(guān)基因在甜橙和道縣野橘中均上調(diào)表達(dá)，尤其是甜橙，但在宜昌橙中沒有明顯變化，推測(cè)可能是宜昌橙不顯癥的主要原因。同時(shí)，次生產(chǎn)物代謝途徑在3個(gè)品種中被激活，纖維素合成相關(guān)基因在宜昌橙和道縣野橘中上調(diào)表達(dá)，但在甜橙中下調(diào)表達(dá)；甜橙中大量PR蛋白相關(guān)基因表達(dá)被抑制，而宜昌橙和道縣野橘相對(duì)較少；部分抗病蛋白基因在野生柑橘品種中表達(dá)水平較高。4不同野生柑橘品種對(duì)LAS侵染的應(yīng)答反應(yīng)存在一定的相似性，尤其是馬蜂柑和宜昌橙。4個(gè)柑橘品種感染黃龍病后，與植物防御相關(guān)的代謝途徑中大量差異表達(dá)基因均被誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。然而，3個(gè)野生柑橘品種中均有部分抗病蛋白相關(guān)基因的表達(dá)水平較甜橙更高，在一定程度上增強(qiáng)了耐病性。此外，道縣野橘中淀粉代謝、PP2蛋白相關(guān)基因的表達(dá)雖上調(diào)但不及甜橙顯著，推測(cè)這可能是道縣野橘染病后出現(xiàn)輕微黃化的主要原因，而馬蜂柑和宜昌橙中該類基因均未被誘導(dǎo)差異表達(dá)，這與它們表現(xiàn)出的較高耐病性相符合?？偠灾?，生物學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究在一定程度上揭示了野生柑橘（馬蜂柑和宜昌橙）的耐病機(jī)制。

簡(jiǎn)介：西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文亞洲玉米螟OSTRINIAFURNACALIS（GUENEE）生物學(xué)特性及飼養(yǎng)技術(shù)研究姓名喬利申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師仵均祥20080501THESTUDIESONTHEBIOLOGYANDREAR【NGOF偽驢加砌乃朋口∞凰沁EN6EABSTRACT仍F砌缸聲朋口C口凰孫ELL6EIS觚IMPONANTPESTATTACKIILGMAIZE，∞RGH啪鋤DCOTTON11LCNEWLYHATCHEDLAN，∞OFTEILD鋤AGE1EAVESOFTHCHOSTP1觚T如DTHEOLDERBOREII炯MESTALL【S鋤DTHE丘UITS，W11ICHRESUNSILLAPOOR，IELDOFDIFRERERLTHOSTSTHERCW勰AAPPROXIINATELY10％REDUCING姐ELDOFMAIZEING鋤慣ALYEARS，ANDEVENTHELO豁OFMAIZERE∞HED30％ASI觚COMBORERINFESTINGS嘶OUSLY1LLEBIOLOGY鋤DRE碰NGTECLLLLIQUESWAS咖DIEDINAS沁COMBORERANDTHELIFC訕LEOFCXPERIMENTALPOPULATIONOFASIANCOMBORERW觴SETUP11圮MAILLRESE鯽CHIT伽【LS觚DTHEIESULTS鋤EASF0LLOWS1AILEWPRESCRIPTIONMORCSUITABLE10R鏟OWTHDEVELOPMENTANDR印RODUCTIONOFASI孤COMBORCRW嬲FBULLDTHEMAINCORLLPONEILTS盯EMAIZEFLOUR860％，SOYBE肌F10UR860％，VCO29％，AGARAG盯115％，YEASTPOWDER516％，SORBIC∞ID029％，哲UCOSE430％，WATER7161％2ULLDERTHECONDITIONOF26士1℃，RH76％，16L／8D，TLLEINTRILLSICRATEOFINCREA∞㈦，F(xiàn)INITE船TEOFIILCREASE的，NETR印RODUCTIONRATER0，ME觚GELL酬ION岫ET鋤DD0UBLEPOPULATIONTIIILETOF伽砌妞屈朋口C口凰GU脅6CLABORAT0巧POPULATIONWERE0047，1049／D，513050，4231D鋤D14633D，RESPECTIVELY3ASI鰣F(tuán)ICAMDI保礬MCEW弱FOUILDB咖EEILMALEPUPAWEI班柚DF翎1ALEPUPAWEI班111EWEIGHTOFMALEPUPAIS舶M006429T0O07019鋤DMATOFF鋤ALEPUPABE帆E∞O0939T0O102490NTHEB弱ISOF95％PROBABILI夠SO，ⅡLEGELLDEROFPUPAC觚BEIILFEREDBYITSWEIGHT4THECOLONYRAISINGISMORE跚ITABLET0ME孕OW虹LDE、，E10PM％TOFASI孤COMBORER虹LALLSIIL舀ERE撕NGUNDERTHECONDITIONOFCOLOILYRCARING，廿LEREAREOF0BVIOLLSLYSHONERLIFE印鋤4198DANDDOUBLEPOPULATIONTIME995DTHAILTHOSEUNDERTLLESINGLERE撕NG5540D觚D1585DRESPECTIVELYME鋤WHILEMERCW弱OFAGRCATERINT血塔ICRATEOFINCREASEO07TLLAILTLLATOFTLLELA仕CRO04MO啪VERPUPATINGRATE7133％，鋤E唱ELLCINGRATE8980‘拗觚DSLLⅣIVALRATE64腫呦OFACBLLILDERMEC010NYRE撕NGⅢ66％、7825％觚D3460％WEREALLB甜ERTH觚THOSE岫DERSINGLE陀撕NGUNDERMESUMCI鋤TSPACE鋤DTLLESUITABLEFOODTU正缸IMCOMBORERSELDOMTAL【ESPLACE覷嘶CIDESOWEC鋤’TC0NSIDERTHE觚CIDEUNDERTHEROOMRAISING

簡(jiǎn)介：密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文亞洲小車蝗宜生區(qū)劃分方法研究PARTITIONMETHODONINHABITABLEAREAOFOEDALEOUSASIATICUSBBIKEO碩士研究生黃訓(xùn)兵指導(dǎo)教師張澤華研究員申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究方向害蟲防治培養(yǎng)單位植物保護(hù)研究所研究生院2015年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名茛訓(xùn)L時(shí)間加侈年期圩日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名煎移IL裊時(shí)間矽F羅年朋F9日導(dǎo)師簽名狗亥時(shí)間≥DF芏年多月2日

簡(jiǎn)介：密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文潛葉蠅的2種共存寄生蜂的生活史及控害行為比較THECOMPARISONOFLIFEHISTORYANDHOSTKILLINGOFTWOCOEXISTINGEULOPHIDPARASIOTOIDSAGAINSTAGROMYZIDLEAFMINERS碩士研究生陸書龍指導(dǎo)教師劉萬(wàn)學(xué)副研究員申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)業(yè)推廣碩士專業(yè)領(lǐng)域名稱植物保護(hù)培養(yǎng)單位植物保護(hù)研究所研究生院提交日期2015年6月獨(dú)創(chuàng)性聲明本夫拶斕耩譬突辯埝文楚撬沓走蓖譬釃豢簿’F您稽鰓戮篦?！陻f藏敬搿的戮籠液繁。琴狻艨綴豫’R變巾蔣潮翻鞭豁漣黲熬趲盼堍方磐。諗震；秘蠶毽溶葵魑久瞧縫鬣菠藏辮翳過麓磷宄箴襞，遜攀鍵衾魏藕攢孛瓣畚照辯掌簸簸蕻窀贛1簿撬褥辯學(xué)鏈麓滋FI螽I菠黲過豹瓣褥，晦凌嘲‘￡簿黲溺基瓣攀磁筏掰皴勰給鱗囊漩麴已巍稔望申洚7湖驤豹遵鯔黲襲攀了謝懣。錯(cuò)寵壘繁鸛；孕蠹移菠辯瀚；鼬；歲軍6甥裁弼關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明零匙究壘了辯侉輞農(nóng)毀褥攀虢蠢莢鐮霸、鎪翊攀澎避變?nèi)谧彺?。閹；?zhēng)國(guó)袋避秘學(xué)魏裔投德辮送窩瓷交購(gòu)笈躥襻鞫驥黢允誨論鬟被辮瓣釉纓溺，舔；瑕袋潮影球。嬤辯；藏翱搭簿簸翻舉漤繇锫、鬏鑣掌縋滄交。瓣惑◇辮數(shù)逝秘譬麓霹激毽舉悶剪筑巍搴辯；糕薄。T笈蕊、臻疆攀緞?wù)敺喊陦救锎魈倥瑑?nèi)轡。磷窺氅簽名靜蛭簸鬻做穢龍刊霄詹辯翹2QL≯擎‘弱Z髑鼗潤(rùn)；Z豢L≥誓香籟鐮

簡(jiǎn)介：SECRECYNO．CHINESEACADEMYOFAGRICULTURALSCIENCESDISSERTATIONGENOMESEQUENCING，COMPARATIVEGENOMICSANDINSULINSIGNALINGPATHWAYANALYSESOFTAENIASAGINATAANDPH．DCANDIDATE“WANGSHUAIADVISORMAJORSPECIALTYPROFESSORCAIXUEPENGPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEANIMALVACCINEANDMOLECULARIMMUNOLOGYMAY2015中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文評(píng)閱人、答辯委員會(huì)簽名表論文題目牛帶絳蟲和亞洲帶絳蟲全基因組測(cè)序、比較基因組及胰島素信號(hào)通路研究論文作者王帥專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物疫苗及其分子免疫學(xué)指導(dǎo)教師才學(xué)鵬培養(yǎng)單位研究所、中心蘭州獸醫(yī)研究所碩博姓名職稱單位專業(yè)簽名導(dǎo)師盲評(píng)碩導(dǎo)口＼＼評(píng)博導(dǎo)口閱盲評(píng)碩導(dǎo)口＼＼博導(dǎo)口人碩導(dǎo)口＼盲評(píng)博導(dǎo)口答辯碩導(dǎo)口主周澤揚(yáng)教授博導(dǎo)∥重慶師范大學(xué)應(yīng)用生物學(xué)‰席碩導(dǎo)口楊孝樸教授甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)靠冽博導(dǎo)∥碩導(dǎo)口融眨殷宏研究員博導(dǎo)吖蘭州獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)答碩導(dǎo)口上私參、曾巧英教授博導(dǎo)盯甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)辯扒V’朱興全研究員碩導(dǎo)口委博導(dǎo)酉蘭州獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)付寶權(quán)研究員碩導(dǎo)口磁電切貝博導(dǎo)留蘭州獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)碩導(dǎo)口硼膨狠駱學(xué)農(nóng)研究員博導(dǎo)D蘭州獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)’一碩導(dǎo)口博導(dǎo)口會(huì)議記錄秘書張少華論文答辯時(shí)間地點(diǎn)2015年5月17R，蘭州獸醫(yī)研究所綜合樓5樓報(bào)告廳

簡(jiǎn)介：李忠亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的克隆、表達(dá)分析及RNAI摘要亞洲玉米螟OSTRINIAFURNACALIS是一種分布廣泛且多食性的害蟲，對(duì)我國(guó)的玉米、棉花危害較大。為研究亞洲玉米螟的吐絲機(jī)理，本文克隆了亞洲玉米螟的絲素輕鏈基因片段且進(jìn)行了全長(zhǎng)拼接，并研究了在其不同發(fā)育階段、不同溫度、不同寄主條件下該基因的相對(duì)表達(dá)量；同時(shí)，通過飼喂法對(duì)亞洲玉米螟絲素輕鏈基因進(jìn)行了RNA干擾?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下1、采用RACE技術(shù)克隆到亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的CDNA全長(zhǎng)己提交GENEBANKKF669645。該基因全長(zhǎng)1098BP，自39BP至830BP為其開放閱讀框，起始密碼子ATG，終止密碼子T從，一共編碼263個(gè)氨基酸，相對(duì)分子量為92．76KDA，等電點(diǎn)PI為4．99。通過同源性比對(duì)，亞洲玉米螟絲素輕鏈基因與棉大卷葉螟SYLEPTADEROGATAFABRICIUS同源性最高，為75％，與外米綴蛾CORCYRACEPHALONICA的同源性為69％；與大蠟螟GALLERIAMELLONELLA的同源性為68％。2、運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR，檢測(cè)了在不同發(fā)育階段、不同溫度條件、喂食不同寄主后亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果表明，絲素輕鏈基因在5齡幼蟲時(shí)相對(duì)表達(dá)量最高，其次是2齡幼蟲與3齡幼蟲；當(dāng)幼蟲進(jìn)入預(yù)蛹后，該基因相對(duì)表達(dá)量開始降低，至成蟲時(shí)，相對(duì)表達(dá)量幾乎為零；研究了22“C，25℃，28℃，31℃，34。C條件下亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)34℃時(shí)相對(duì)表達(dá)量最高；在棉花、玉米、酸模葉蓼三種寄主間，取食棉花的亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的表達(dá)量最高，其次分別是玉米、酸模葉蓼。文章對(duì)處于逆境條件下玉米螟絲素輕鏈基因的相對(duì)表達(dá)量較高進(jìn)行了討論。3、通過飼喂法，將表達(dá)目標(biāo)基因DSRNA的菌液飼喂亞洲玉米螟幼蟲，檢測(cè)沉默效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于喂食添加了清水的常規(guī)飼料的亞洲玉米螟幼蟲CK，喂食添加了表達(dá)DSRNA菌液飼料的亞洲玉米螟的絲素輕鏈基因表達(dá)量分別下調(diào)了34．81％、35．05％。經(jīng)過RNA干擾后，相對(duì)于對(duì)照，亞洲玉米螟的幼蟲發(fā)育歷期縮短0．99D、蛹重下降8．53％、單雌產(chǎn)卵量減少34．86％。這表明絲素輕鏈基因表達(dá)量的降低與亞洲玉米螟的生長(zhǎng)發(fā)育是有關(guān)聯(lián)的。關(guān)鍵詞亞洲玉米螟；絲素輕鏈基因；表達(dá)分析；RNA干擾IIIIIIIIIIULLIIIIIIIUIIIY2908427李忠亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的克隆、表達(dá)分析及RNAI目錄第一章文獻(xiàn)綜述????????????????????????????????????L1昆蟲吐絲概況及其他吐絲生物????????????????????????????11．1昆蟲吐絲的作用?????????????????????????????????L1．2昆蟲的絲????????????????????????????????????21．2．1絲素蛋白?????????????????????????????????．31．2．2絲膠蛋白?????????????????????????????????．42RNAI研究概況??????????????????????????????????．42．1RNAI的發(fā)現(xiàn)??????????????????????????????????．．42．2RNAI的作用機(jī)制????????????????????????????????．．52．2．1SIRNA的形成???????????????????????????????．52．2．2SIRNA的效應(yīng)階段?????????????????????????????．52．2．3SIRNA的擴(kuò)增???????????????????????????????．52．3RNAI的特點(diǎn)???????????????????????????????????．62．4昆蟲RNAI的應(yīng)用方法??????????????????????????????72．4．1注射法??????????????????????????????????．72．4．2飼喂法??????????????????????????????????72．4．3其他方法?????????????????????????????????83立題依據(jù)及目的意義???????????????????????????????．．8第二章亞洲玉米螟絲素輕鏈基因的克隆??????????????????????????LO2．1試驗(yàn)材料???????????????????????????????????．102．1．1．蟲源??????????????????????????????????????????????102．1．2試驗(yàn)試劑????????????????????????????????一102．1．3試驗(yàn)儀器????????????????????????????????．．102．2總RNA提取??????????????????????????????????112．3CDNA第一條鏈的合成??????????????????????????????112．4亞洲玉米螟絲素輕鏈基因中間片段擴(kuò)增??????????????????????。122．4．1引物設(shè)計(jì)與合成??????????????????????????????122．4．2絲素輕鏈基因中間片段的擴(kuò)增????????????????????????122．4．3目的基因片段產(chǎn)物的回收與純化???????????????????????122．4．4目的基因產(chǎn)物的連接與轉(zhuǎn)化?????????????????????????132．4．5單菌落PCR檢測(cè)?????????????????????????????．132．4．6測(cè)序??????????????????????????????????．．142．4．7序列分析????????????????????????????????。142．5絲素輕鏈基因的3’RACE?????????????????????????????．142．5．1反應(yīng)原理與引物設(shè)計(jì)????????????????????????????142．5．23’RACE的擴(kuò)增??????????????????????????????152．6絲素輕鏈基因的5’RACE?????????????????????????????．162．6．1反應(yīng)原理與引物設(shè)計(jì)????????????????????????????162．6．25’RACE的擴(kuò)增??????????????????????????????172．7序列分析???????????????????????????????????．202．8結(jié)果與分析??????????????????????????????????．212．8．1絲素輕鏈基因中間片段擴(kuò)增結(jié)果???????????????????????212．8．23’RACE擴(kuò)增結(jié)果?????????????????????????????．22

簡(jiǎn)介：研究承蒙國(guó)家自然科學(xué)基金（31260430）亞洲玉米螟不同地理種群滯育控制的光周期時(shí)間測(cè)量特性比較資助目錄目錄目錄I摘要IIIABSTRACTV第一章綜述11昆蟲滯育12滯育的地理變異121滯育誘導(dǎo)的地理變異122臨界光周期的地理變異123滯育強(qiáng)度的地理變異23滯育遺傳分析24生活史相關(guān)的理論研究241生活史理論242可塑性理論343發(fā)育時(shí)間與體型關(guān)系的理論35生活史特性與適應(yīng)性的關(guān)系351成蟲體型與適應(yīng)性的關(guān)系352發(fā)育時(shí)間與適應(yīng)性的關(guān)系453生長(zhǎng)速率與適應(yīng)性的關(guān)系46溫度對(duì)生活史特性的影響561溫度對(duì)發(fā)育時(shí)間的影響562溫度對(duì)體型的影響563溫度對(duì)生長(zhǎng)速率的影響564溫度對(duì)成蟲壽命的影響67生活史特性的地理變異671昆蟲體重和體型大小的地理變異672發(fā)育時(shí)間的地理變異78性別對(duì)生活史特性的影響781性別對(duì)昆蟲體型的影響782性別對(duì)發(fā)育時(shí)間的影響783性別對(duì)壽命的影響89研究?jī)?nèi)容和意義8第二章亞洲玉米螟光周期誘導(dǎo)的滯育遺傳91前言92材料和方法1021供試蟲源和飼養(yǎng)方法1022自交和雜交10

簡(jiǎn)介：CLONING，CHARACTERIZATIONANDEXPRESSIONOFPG恥APATTERNRECOGNITIONRECEPTORRELATEDTOIMMUNITYOFOSTRINIAFURNACALISGUEN6ELARVAEATHESISSUBMITTEDASPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFMASTERWITHMAJORINAGRICULTURALENTOMOLOGY＆PESTCONTROLINYANGZHOUUNIVERSITYCANDIDATETAOYANWUSUPERVISORPROFCONGJINGFENGAPRIL，2015YANGZHOU，PRCHINA28OFFL一』3GRP基因的5RACE2028】TAKARA5’RACE反應(yīng)原理和引物設(shè)計(jì)20282操作步驟2L28357RACE產(chǎn)物的克隆測(cè)序2329序列的生物信息學(xué)分析24291數(shù)據(jù)庫(kù)搜索及亞洲玉米螟OFFL1，3一GRP基因編碼蛋白的理化性質(zhì)分析24292亞洲玉米螟OFFLJ，3GRP基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)和功能預(yù)測(cè)24293基于昆蟲OFFL1，3GRP核苷酸序列推導(dǎo)的氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建25210夠P1，3GRP重組蛋白原核表達(dá)探索一252101重組表達(dá)質(zhì)粒PET28BOFFL1，3一GRP的構(gòu)建252102重組表達(dá)25211亞洲玉米螟OFFL1，3GRP基因表達(dá)的REALTIMEPCR檢測(cè)282111細(xì)菌誘導(dǎo)物的制備282112亞洲玉米螟幼蟲細(xì)菌誘導(dǎo)物的注射及解剖282113REALTIMEPCR檢測(cè)292114數(shù)據(jù)分析303結(jié)果與分析3031OFP一』，3GRP基因CDNA全長(zhǎng)序列30311OF伊』，3GRP中間片段的克隆30312OFFL一，，3GRP基因全長(zhǎng)CDNA序列的3’RACE和57RACE32313OFFL1，3GRP基因全長(zhǎng)CDNA序列的克隆3332OFFL13GRP基因的生物信息學(xué)分析34321OFFL一，。3GRP基因的核苷酸序列和氨基酸序列34322OFFL一，，3GRP基因核苷酸序列和氨基酸序列的BLASTP分析36323OFP1，3GRP基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹38324OFFL13GRP基因信號(hào)肽、跨膜結(jié)構(gòu)、翻譯后修飾以及疏水性分析38325OFP13GRP的三維結(jié)構(gòu)以及功能結(jié)構(gòu)域分析4L33OFPJ3GRP基因的原核表達(dá)42331OFFLJ，3GRP基因表達(dá)載體的構(gòu)建42332PET28BOFFLJ3一GRP原核表達(dá)條件的篩選45

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多亞洲玉米螟不同地理種群滯育控制的光周期時(shí)間測(cè)量特性比較.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬口蹄疫亞洲Ⅰ型病毒分離鑒定、VP1基因和疫苗免疫研究姓名羅昊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王紅寧黃勇20080601四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文逐漸減弱。同時(shí)通過加強(qiáng)免疫組監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，抗體滴度L092值在低于4．0以下時(shí)進(jìn)行免疫，可以提高抗體滴度。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，推薦豬群在首次免疫采用ASIAI單價(jià)疫苗，母豬采用1．5倍劑量免疫，首次免疫后120天可以加強(qiáng)一次。小豬在免疫后抗體滴度低于母豬，．推薦小豬采用正常劑量免疫，免疫后15日時(shí)加強(qiáng)一次免疫，首次免疫后120天時(shí)加強(qiáng)一次。關(guān)鍵詞口蹄疫病毒；電鏡；豬口蹄疫疫苗；ELISA；免疫程序；‘本研究為國(guó)家”I．_一五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目課題編02006BADL4805．5

簡(jiǎn)介：中國(guó)肄耄斜乎御憲院學(xué)位論文學(xué)位論文作者指導(dǎo)教師姓名申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別專業(yè)名稱研究方向論文答辯日期劉學(xué)偉呂全張星耀碩士森林保護(hù)學(xué)林木分子生態(tài)病理2015年6月23日獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得本研究生培養(yǎng)單位或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名蕾融日期刎步多月“日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名太徘功防6月％。日導(dǎo)師簽名寫蓼I／緲年鄉(xiāng)月塔日學(xué)位論文作者畢業(yè)聯(lián)系方式工作單位中國(guó)1|3{{J鉺毋舀覷霸婚缺繯所聯(lián)系電話0086．18811589280電子郵件BABYLIUXUEWEI163．TOM通訊地址、郵編北京市海淀區(qū)香山路中國(guó)林科院森環(huán)森保所118室100091

簡(jiǎn)介：CLASSIFLEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO120910813DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREESCREENINGANDANALYSISOFINSECTICIDALACTIVITYOFPROTEINFROMBACILLUSTHURINGIENSISAGAINSTMYTHIMNASEPARATAWALKERANDOSTRINIAFURNACALISGUEN6ECANDIDATEYANGSUJUANSUPERVISORPROLESSORZHANGJIEDEGREECATEGORYMASTERFORSCIENCECOLLEGENORTHEASTAGRICULTURALUNIVERSITYFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYHARBINJUNECHINA2015東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文222PCR擴(kuò)增15223酶切反應(yīng)16224PCR和載體酶切產(chǎn)物的純化16225DNA片段的連接16226重組質(zhì)粒PCR鑒定16227大腸桿菌TGL／BL21瓜OSETTA熱擊感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化17228大腸桿菌中表達(dá)蛋白的提取17229蘇云金芽胞桿菌中表達(dá)蛋白的提取182210SDSPAGE電泳分析及蛋白定量182211東方粘蟲生物活性測(cè)定方法182212亞洲玉米螟的生物活性測(cè)定方法192213小菜蛾的生物活性測(cè)定方法202214棉鈴蟲生物活性測(cè)定方法2L2215甜菜夜蛾生物活性測(cè)定方法213結(jié)果與分析2231大腸桿菌中蛋白的表達(dá)22311CRYLBB蛋白表達(dá)條件的優(yōu)化22312CRYLBE蛋白表達(dá)條件的優(yōu)化23313CRY9EE蛋白表達(dá)條件的優(yōu)化23314大腸桿菌中CRY及VIP蛋白的提取2432蘇云金芽胞桿菌中表達(dá)蛋白的提取2533東方粘蟲生物活性測(cè)定結(jié)果25331東方粘蟲生測(cè)體系的優(yōu)化25332CRY及VIP蛋白對(duì)東方粘蟲生物活性初次測(cè)定25333CRY蛋白對(duì)東方粘蟲生物活性復(fù)篩2834CRY蛋白對(duì)亞洲玉米螟生物活性測(cè)定結(jié)果2835NGL新基因的克隆、表達(dá)與殺蟲活性293。51PET21BNGL表達(dá)載體的構(gòu)建29352NGL蛋白的表達(dá)313。53NGL蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)比較分析3L354NGL蛋白生物活性測(cè)定結(jié)果334討論3541BT蛋白對(duì)東方粘蟲生物活性3542BT蛋白對(duì)亞洲玉米螟生物活性3643NGL新基因的克隆、表達(dá)與殺蟲活性37

簡(jiǎn)介：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文亞洲玉米螟耐受甲醇毒性的機(jī)制研究姓名郭蕾申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師李國(guó)清20080601亞洲玉米螟耐受甲醇毒性的機(jī)制研究的作用下，生成C02和H20。3亞洲玉米螟幼蟲對(duì)甲醇非氧化代謝途徑的研究分析了亞洲玉米螟幼蟲對(duì)甲醇非氧化代謝的途徑。1取食含有甲醇食物的個(gè)體，中腸全酯酶的活力顯著高于取食正常飼料的個(gè)體，推測(cè)酯酶可能參與了甲醇解毒的非氧化代謝；2磷酸三苯酯預(yù)處理并不顯著增加取食含甲醇和甲醛飼料后的亞洲玉米螟幼蟲的死亡，表明非氧化代謝途徑可能不是亞洲玉米螟解毒甲醇的主要途徑。4亞洲玉米螟對(duì)甲醇及其代謝產(chǎn)物的感受亞洲玉米螟成蟲對(duì)甲醇及其代謝產(chǎn)物均具有明顯的EAG反應(yīng)。1甲醇激發(fā)的EAG反應(yīng)隨幼蟲期食物差異和成蟲性別差異而不同。2在室內(nèi)，切除了兩只觸角的交配雌蛾不能夠辨別對(duì)照濾紙和滴加抑卵脂肪酸混合物的濾紙，而具有完整觸角和切除一只觸角的雌蛾能辨別。3交配雌蛾的產(chǎn)卵行為表現(xiàn)出明顯的晝夜節(jié)律性，所有的卵都產(chǎn)于暗期并且午夜前的卵塊數(shù)占很大的比例。4在產(chǎn)卵高峰期和低谷期，雌蛾對(duì)肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸和油酸及其甲酯，雄蛾對(duì)大部分被測(cè)化合物表現(xiàn)出顯著高于空白對(duì)照的EAG反應(yīng)。在兩個(gè)測(cè)定時(shí)段內(nèi)，雌蛾對(duì)肉豆寇酸甲酯，雄蛾對(duì)肉豆寇酸，硬脂酸及硬脂酸甲酯表現(xiàn)出顯著的EAG差異。以上結(jié)果表明，亞洲玉米螟成蟲在進(jìn)化過程中均獲得了感受甲醇及其非氧化代謝產(chǎn)物以調(diào)節(jié)自身行為的能力。據(jù)此推測(cè)非氧化代謝途徑應(yīng)在亞洲玉米螟解毒甲醇的過程中發(fā)揮了一定的作用。5亞洲玉米螟初孵幼蟲對(duì)甲醇的定位反應(yīng)甲醇介導(dǎo)亞洲玉米螟初孵幼蟲的定位。1亞洲玉米螟初孵幼蟲可能通過嗅覺感受器檢測(cè)甲醇，在Y型嗅覺儀內(nèi)，當(dāng)測(cè)定濃度為100％、50％、25％時(shí)，初孵幼蟲對(duì)甲醇表現(xiàn)出負(fù)趨性。2在濾紙上，飼料中的甲醇加快亞洲玉米螟初孵幼蟲發(fā)現(xiàn)飼料的速率，但對(duì)最終的引誘率無(wú)顯著影響。以上結(jié)果表明，在自然條件下，植物釋放的甲醇可能影響亞洲玉米螟初孵幼蟲對(duì)寄主幼嫩部位的定位。關(guān)鍵詞亞洲玉米螟、甲醇、耐受能力、解毒能力II

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文亞洲棉CAP基因的克隆、表達(dá)與蛋白鑒定姓名王晟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)作物種質(zhì)資源學(xué)指導(dǎo)教師杜雄明20080601結(jié)果顯示，GACAP蛋白的最適反應(yīng)溫度為36。C，并且可以在一個(gè)較寬的溫度范圍30～60“C內(nèi)保持其高結(jié)合活性60％；該蛋白的最適PH值在5．0～6．0之間，在PH4．0的緩沖液中處理30MIN后，GACAP的蛋白活性仍然有80％，說明該蛋白有一定程度的耐酸性。關(guān)鍵詞棉花，弧洲棉，纖維分化，環(huán)化酶結(jié)合蛋白Ⅱ

簡(jiǎn)介：上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文I上海海洋大學(xué)大學(xué)碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文題目目小黃魚早期生活史不同發(fā)育階段耳小黃魚早期生活史不同發(fā)育階段耳石元素指紋和群體識(shí)別研究石元素指紋和群體識(shí)別研究英文題目英文題目THEELEMENTALFINGERPRINTINDIFFERENTSTAGESOFEARLYLIFEHISTORYANDPOPULATIONIDENTIFICATIONOFSMALLYELLOWCROAKERLARIMICHTHYSPOLYACTIS專業(yè)業(yè)漁業(yè)資源漁業(yè)資源研究方向研究方向漁業(yè)資源和生態(tài)漁業(yè)資源和生態(tài)姓名名徐浩徐浩指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師李圣法李圣法二O一五一五年四月二十二十日學(xué)校代碼10264研究生學(xué)號(hào)M120302594上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文III上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日