簡(jiǎn)介：隨著科技的發(fā)展，各類電子產(chǎn)品、電力設(shè)備廣泛使用，由此產(chǎn)生的各種不同頻率的電磁場(chǎng)已經(jīng)成為繼空氣、噪聲和水源污染后的第四大污染，嚴(yán)重影響和威脅人類健康。極低頻電磁場(chǎng)（ELFEMF）和射頻電磁場(chǎng)（RFEMF）是我們?nèi)粘Ｉ钪薪佑|到的最普遍的兩種電磁場(chǎng)。許多研究表明，ELFEMF和RFEMF暴露與人類健康損害和部分疾病的發(fā)生具有一定的相關(guān)性，包括兒童白血病、腦腫瘤、LOUGEHRIG疾病以及老年癡呆癥病等。由于雄性生殖器官對(duì)環(huán)境有害物質(zhì)非常敏感，隨著近年來(lái)精液質(zhì)量下降和不育的人群越來(lái)越多，人們開(kāi)始密切關(guān)注ELFEMF和RFEMF對(duì)雄性生殖健康的潛在危害。然而，目前關(guān)于ELFEMF和RFEMF是否具有明顯的雄性生殖毒性的流行病學(xué)研究以及實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果還很不一致，而且關(guān)于ELFEMF和RFEMF暴露對(duì)（男）雄性生殖毒性以及機(jī)制也均不清楚。因此系統(tǒng)的開(kāi)展ELFEMF和RFEMF生殖毒性效應(yīng)及其機(jī)制的研究，對(duì)于全面認(rèn)識(shí)二者對(duì)人類健康的影響及防治具有重要的意義。DNA甲基化是表觀遺傳修飾的途徑之一。它指的是在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下將活性S腺甲硫胺酸SAM轉(zhuǎn)移至DNA分子胞嘧啶環(huán)5C位點(diǎn)使其轉(zhuǎn)變?yōu)?甲基胞嘧啶的過(guò)程。DNA甲基化是一種廣泛的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制。一般而言，基因啟動(dòng)子區(qū)高甲基化會(huì)抑制其表達(dá)。因此DNA甲基化在基因表達(dá)調(diào)控中起重要作用，而且廣泛參與了各種生命活動(dòng)和疾病的發(fā)生。MIRNA是表觀遺傳學(xué)調(diào)控的另一重要途徑，作為一類內(nèi)源性非編碼小RNA（長(zhǎng)度大約在1925核苷酸），它幾乎存在于所有的生物體中，包括動(dòng)物、植物和病毒。MIRNA主要的生物學(xué)功能是通過(guò)結(jié)合靶基因的3’非翻譯區(qū)從而在轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控基因的表達(dá)。MIRNA通過(guò)與靶基因的結(jié)合能夠抑制靶MRNA的翻譯或提高M(jìn)RNA的降解。MIRNA介導(dǎo)的細(xì)胞調(diào)控是一種重要的表觀遺傳機(jī)制的調(diào)控途徑，人類基因組中約60％的基因都受到MIRNA的調(diào)控，MIRNA介導(dǎo)的細(xì)胞調(diào)控幾乎涉及參與全部的細(xì)胞進(jìn)程，如細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡以及細(xì)胞周期等，且MIRNA與多種人類腫瘤和男性生殖障礙密切相關(guān)。越來(lái)越多的證據(jù)表明，DNA甲基化和MIRNA對(duì)精子的生成和男性的生育能力至關(guān)重要。鑒于EMF暴露對(duì)雄性生殖健康的潛在危害值得關(guān)注，但現(xiàn)有研究未得出明確的結(jié)論。存在較大爭(zhēng)議的原因一方面可能與無(wú)標(biāo)準(zhǔn)暴露裝置，暴露頻率、強(qiáng)度、時(shí)間不一，檢測(cè)方法和細(xì)胞敏感性不同等有關(guān)；另一方面，不少研究發(fā)現(xiàn)ELFEMF和RFEMF沒(méi)有明顯的遺傳毒性。因此，本研究擬從表觀遺傳學(xué)這一新的角度入手，系統(tǒng)的評(píng)價(jià)EMFS暴露是否對(duì)DNA甲基化以及MIRNA等主要的表觀遺傳學(xué)調(diào)控產(chǎn)生影響；篩選關(guān)鍵性DNA甲基化調(diào)控應(yīng)答基因和MIRNA，并初步分析相關(guān)的DNA甲基化調(diào)控基因和MIRNA在EMFS暴露過(guò)程中的功能及其機(jī)制。為進(jìn)一步全面認(rèn)識(shí)電磁輻射的損傷效應(yīng)與醫(yī)學(xué)防護(hù)提供理論依據(jù)和研究材料。本論文主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下（1）50HZELFEMF的表觀遺傳學(xué)研究①以不同電場(chǎng)強(qiáng)度（1MT，2MT和3MT），間歇式暴露模式（5MIN開(kāi)10MIN關(guān)）建立50HZELFEMF暴露條件下小鼠GC2細(xì)胞的表觀遺傳學(xué)細(xì)胞研究模型。暴露72H后采用CCK8和流式細(xì)胞術(shù)等分析方法發(fā)現(xiàn)，不同場(chǎng)強(qiáng)的50HZELFEMF暴露對(duì)GC2細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的影響，對(duì)GC2細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡也沒(méi)有明顯的影響。表明50HZELFEMF短期暴露在體外沒(méi)有明顯的細(xì)胞功能改變。②全基因組DNA甲基化水平定量分析發(fā)現(xiàn)50HZELFEMF暴露后，1MT暴露組GC2細(xì)胞DNA的甲基化水平明顯降低；2MT和3MT暴露后，GC2細(xì)胞全基因組甲基化水平升高（P③利用DNA甲基化芯片初步篩選了50HZELFEMF暴露條件下主要的差異甲基化基因，建立了全基因組甲基化差異圖譜。其中有400多個(gè)基因發(fā)生了明顯的甲基化改變，表明50HZELFEMF暴露可能通過(guò)調(diào)控相關(guān)基因的甲基化產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。通過(guò)對(duì)部分候選基因DNA甲基化狀態(tài)的進(jìn)一步分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)NOD1、LRRC9、TAGLN等基因啟動(dòng)子區(qū)明顯甲基化，且負(fù)調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，表明相關(guān)基因不僅可以作為50HZELFEMF暴露的候選標(biāo)志物，而且可能在50HZELFEMF誘發(fā)的生物學(xué)效應(yīng)中起重要作用。④利用表達(dá)譜芯片建立了50HZELFEMF暴露下差異基因表達(dá)譜。在1MT暴露條件下共有84個(gè)差異表達(dá)基因（其中包括44個(gè)基因上調(diào)，40個(gè)基因顯著下調(diào)）；在3MT暴露條件下，差異表達(dá)的基因共有324個(gè)，其中包括235上調(diào)的基因和89個(gè)下調(diào)的基因。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)50HZELFEMF暴露下，MAOA、BHMT、GNG8、UGT2B34、DGAT1和ADH1等基因可能是1MT暴露條件下關(guān)鍵應(yīng)答靶基因；而CYP3A11、UGT2B34、ADCY5、PTGS1和CYP2B23等基因是3MT暴露條件下核心的靶基因。通過(guò)對(duì)相關(guān)基因表達(dá)驗(yàn)證結(jié)合生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，這些關(guān)鍵性差異表達(dá)的基因主要涉及到免疫應(yīng)激、組蛋白修飾、氧化應(yīng)激等信號(hào)通路，提示50HZELFEMF可能影響相關(guān)的信號(hào)通路而產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)，為后續(xù)的深入研究提供了研究資料。⑤通過(guò)MIRNA表達(dá)譜芯片建立了50HZELFEMF暴露條件下差異MIRNA表達(dá)譜。結(jié)果表明50HZELFEMF暴露可以明顯誘導(dǎo)MIRNA差異表達(dá)。1MT暴露組共有19個(gè)MIRNA的表達(dá)發(fā)生改變，其中有7個(gè)MIRNA表達(dá)上調(diào)，12個(gè)MIRNA表達(dá)下調(diào)。在3MT暴露組，差異表達(dá)的MIRNA共有36個(gè)，其中有9個(gè)MIRNA表達(dá)上調(diào)，27個(gè)MIRNA表達(dá)下調(diào)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，在1MT暴露組中，MIR2113P、MIR4943P、MIR669F3P和MIR1907是關(guān)鍵性應(yīng)答MIRNA。然而，在3MT暴露組，MIR30E5P、MIR2105P、MIR2245P、MIR196B5P、MIR5043P、MIR669C5P和MIR4553P是關(guān)鍵性應(yīng)答MIRNA。這些差異表達(dá)MIRNA可能與ELFEMF的生物學(xué)效應(yīng)密切相關(guān)。采用GO和KEGG對(duì)MIRNA靶基因所涉及的信號(hào)通路分析發(fā)現(xiàn)，相關(guān)的MIRNA靶基因主要參與MT信號(hào)通路、晝夜節(jié)律信號(hào)通路、P53信號(hào)通路、長(zhǎng)期抑郁和MAPK信號(hào)通路等信號(hào)通路，提示50HZELFEMF可能通過(guò)MIRNA影響上述信號(hào)通路和相關(guān)的生物學(xué)功能。我們的研究也表明這些顯著改變的MIRNA可作為候選的生物標(biāo)志物。⑥首次發(fā)現(xiàn)不同場(chǎng)強(qiáng)的50HZELFEMF能夠改變GC2細(xì)胞中MIR26B5P的表達(dá)水平。單獨(dú)過(guò)表達(dá)或者沉默MIR26B5P對(duì)GC2細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡以及細(xì)胞周期沒(méi)有明顯影響。但是過(guò)表達(dá)MIR26B5P再暴露于3MT50HZELFEMF會(huì)引起GC2細(xì)胞由G0G1期向S期轉(zhuǎn)換，提示MIR26B5P與50HZELFEMF存在著明顯的交互作用。進(jìn)一步的機(jī)制分析表明，CCND2是MIR26B5P的一個(gè)直接的靶基因，MIR26B5P的表達(dá)與CCND2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明50HZELFEMF與MIR26B5P表達(dá)都可以改變CCND2MRNA和蛋白的表達(dá)水平從而影響細(xì)胞周期。相關(guān)研究首次表明MIR26B5PCCND2在GC2細(xì)胞暴露于50HZELFEMF過(guò)程中對(duì)細(xì)胞周期的調(diào)控發(fā)揮重要作用。（2）1800MHZRFEMF的表觀遺傳學(xué)研究①以不同比吸收率（1WKG、2WKG和4WKG），間歇式暴露模式（5MIN開(kāi)10MIN關(guān)）分別建立了1800MHZRFEMF暴露條件下小鼠GC2細(xì)胞的表觀遺傳學(xué)細(xì)胞研究模型。暴露72H后采用CCK8和流式細(xì)胞術(shù)等方法分析發(fā)現(xiàn)不同比吸收率的1800MHZRFEMF暴露對(duì)GC2細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的影響。不同比吸收率的1800MHZRFEMF對(duì)GC2細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡也沒(méi)有明顯的影響。②采用DOTBLOT方法分析1800MHZRFEMF暴露后GC2細(xì)胞全基因組甲基化水平，分析結(jié)果表明1WKG和2WKGRFEMF暴露時(shí)全基因組甲基化水平無(wú)明顯變化，而4WKGRFEMF暴露條件下GC2細(xì)胞全基因組甲基化水平升高。進(jìn)一步的機(jī)制分析發(fā)現(xiàn)1800MHZRFEMF可改變DNMTSMRNA和蛋白水平的表達(dá)。表明4WKGRFEMF暴露能導(dǎo)致GC2細(xì)胞DNA甲基化異常改變，且DNMTS參與了4WKGRFEMF誘導(dǎo)的全基因組甲基化水平改變調(diào)控。③利用DNA甲基化芯片對(duì)差異甲基化調(diào)控基因進(jìn)行了篩選，發(fā)現(xiàn)4WKGRFEMF暴露條件下，共有132個(gè)差異甲基化位點(diǎn)（54高甲基化和78低甲基化）。深入分析發(fā)現(xiàn)CYCS、XPNPEP3、NMUR2和MOB1A等基因的甲基化改變較為明顯，且負(fù)調(diào)控相應(yīng)基因的表達(dá)，提示我們DNA甲基化可能參與了1800MHZRFEMF的生物效應(yīng)過(guò)程。④通過(guò)MIRNA表達(dá)譜芯片建立了1800MHZRFEMF暴露條件下差異MIRNA表達(dá)譜。分析結(jié)果表明4WKGRFEMF暴露可以誘導(dǎo)MIRNA差異表達(dá)。通過(guò)QRTPCR驗(yàn)證和生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，MIR19A3P、MIR291B5P、MIR76845P、MIR69583P、MIR344G5P、MIR669N和MIR1896可能是4WKGRFEMF暴露條件下主要應(yīng)答MIRNA。這些差異表達(dá)MIRNA可能與4WKGRFEMF的生物學(xué)效應(yīng)密切相關(guān)。⑤通過(guò)表達(dá)譜芯片建立了4WKGRFEMF暴露后全基因組表達(dá)譜。發(fā)現(xiàn)共511差異表達(dá)基因，其中255個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，256個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。SIGNAL分析發(fā)現(xiàn)UGT2A1和CYP2B10可能是重要的靶基因。通過(guò)進(jìn)一步驗(yàn)證和信號(hào)通路分析發(fā)現(xiàn)，4WKGRFEMF暴露條件下主要影響天然免疫反應(yīng)、Β干擾素細(xì)胞反應(yīng)、嗅覺(jué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、神經(jīng)活性的配體受體之間的相互作用、G蛋白偶聯(lián)受體等信號(hào)通路，提示RFEMF暴露對(duì)一些基本生命活動(dòng)有一定的影響。⑥進(jìn)一步對(duì)1800MHZRFEMF作用機(jī)制進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)4WKGRFEMF暴露后與天然免疫反應(yīng)有關(guān)的基因，包括IL1А、IL6、IL10、PSG19、OAS1G和CXCL10表達(dá)水平改變明顯；與嗅覺(jué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)的基因，包括OLFR50、OLFR128、OLFR167等基因的表達(dá)水平也發(fā)生了顯著的改變，表明免疫反應(yīng)和嗅覺(jué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)通路可能在4WKG1800MHZRFEMF的生物效發(fā)揮著重要的作用，具有進(jìn)一步深入研究的必要。綜上所述，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明50HZELFEMF和1800MHZRFEMF短期暴露都可以顯著誘導(dǎo)DNA甲基化和MIRNA差異表達(dá)，具有明顯的表觀遺傳學(xué)效應(yīng)。利用基因組學(xué)技術(shù)和生物信息學(xué)方法初步篩選和確定了兩種不同頻率EMFS暴露條件下的關(guān)鍵性應(yīng)答甲基化調(diào)控基因和MIRNA，建立了應(yīng)答關(guān)鍵基因信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)，表明50HZELFEMF和1800MHZRFEMF暴露可以通過(guò)表觀遺傳學(xué)調(diào)控影響免疫應(yīng)激反應(yīng)等信號(hào)通路從而產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。本研究為后續(xù)EMFS的研究提供可靠依據(jù)和研究資料。

簡(jiǎn)介：南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的成果作品。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名導(dǎo)師簽名哮彭日期砷肜年歲月≥陽(yáng)日期加形年鄉(xiāng)月沖日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于請(qǐng)?jiān)谝韵孪鄳?yīng)方框內(nèi)打“、／”I、保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書(shū)。2、不保密彭作者簽名導(dǎo)師簽名、學(xué)穆日期加76年鄉(xiāng)月沖日日期硼膨年鄉(xiāng)月乙尹日南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要阿爾茨海默病AD是一個(gè)復(fù)雜的多因素導(dǎo)致的神經(jīng)退行性疾病，它已成為一個(gè)很重要的公共健康問(wèn)題。AD是以淀粉樣斑塊形成、神經(jīng)纖維纏結(jié)、神經(jīng)元丟失壞死為基本病理特點(diǎn)。然而，AD的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制在很大程度上仍不清楚。3羥基3甲基戊二酰輔酶A還原酶基因是AD的一個(gè)強(qiáng)有力的候選基因，因?yàn)樗幋a酶的部分他汀類結(jié)合域，這一部分是哺乳動(dòng)物細(xì)胞膽固醇代謝的限速步驟?，F(xiàn)在我們研究HMGCR基因的位點(diǎn)RS3846662在AD相關(guān)病理中的潛在作用，我們通過(guò)對(duì)神經(jīng)影像學(xué)的生物標(biāo)記評(píng)估來(lái)實(shí)現(xiàn)這一研究。我們從ADI經(jīng)影像學(xué)行動(dòng)計(jì)劃數(shù)據(jù)庫(kù)中納入了812個(gè)受試者。經(jīng)過(guò)研究我們認(rèn)為在兩年后的隨訪研究中，HMGCR的位點(diǎn)RS3846662可以減慢右側(cè)內(nèi)嗅皮質(zhì)區(qū)P003385和左海馬區(qū)FP001839的體積萎縮。并且這個(gè)位點(diǎn)可減輕右側(cè)顳葉的糖代謝的降低。但是我們并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)嬲儺的位點(diǎn)與P淀粉樣蛋白A13沉積之間的關(guān)系。我們?cè)诜纸M的AD、輕度認(rèn)知功能障礙MCI、正常對(duì)照叫C人群中驗(yàn)證我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在納入MCL人群中，我們的所有結(jié)果被證實(shí)。即在MCL人群中，HMGCR的位點(diǎn)RS3846662可以減慢右側(cè)內(nèi)嗅皮質(zhì)區(qū)P003385和左海馬區(qū)PO01839的體積萎縮。并且RS3846662可減輕右側(cè)顳葉的糖代謝的降低。我們的研究結(jié)果表明HMGCR的位點(diǎn)RS3846662在AD的病理形成中起著關(guān)鍵作用，它的作用主要表現(xiàn)在影響腦的結(jié)構(gòu)和影響糖代謝上。關(guān)鍵詞阿爾茨海默?。籋MGCR基因；神經(jīng)影像；糖代謝

簡(jiǎn)介：⑧論文作者簽名蕉塑璺指導(dǎo)教師簽名論文評(píng)閱入1評(píng)閱人2評(píng)閱人3評(píng)閱人4評(píng)閱人5巫應(yīng)隱名雙向隱名塑?chē)杷苊車(chē)杪∶車(chē)杪∶疝q委員會(huì)主席余海＼教授＼浙江大學(xué)委員1陳麗榮＼教授＼浙江大學(xué)委員2吳南翔＼教授＼浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院委員3朱善寬＼教授＼浙江大學(xué)委員4朱益民＼教授＼浙江大學(xué)委員5浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得逝婆太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名蚴簽字日期勱／歹年多月／歲日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解逝望盤(pán)堂有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝姿盤(pán)堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū)學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名簽字日期勱／名年歹月／歹日簽字日期加／伽中F多年∥月，歲日

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R7421密級(jí)UDC編號(hào)學(xué)位論文一個(gè)一個(gè)罕見(jiàn)腦橋小腦發(fā)育不全家系臨床研究罕見(jiàn)腦橋小腦發(fā)育不全家系臨床研究及遺傳學(xué)分析及遺傳學(xué)分析ACLINICALGEICRESEARCHOFARAREPONTOCEREBELLARHYPOPLASIAFAMILY潘晴晴指導(dǎo)教師姓名王玉主任醫(yī)師教授安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱神經(jīng)病學(xué)提交論文日期201603論文答辯日期201605學(xué)位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學(xué)201607答辯委員會(huì)主席評(píng)閱人2016年05月

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多四個(gè)嬰兒眼球震顫綜合征家系的分子遺傳學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的了解乙肝高危兒童乙肝免疫預(yù)防的效果，探討乙型肝炎病毒（HEPATITISBVIRUS，HBV）母嬰傳播的影響因素，分析HLADPDQ基因遺傳變異與兒童乙肝感染的關(guān)聯(lián)，為揭示兒童乙肝的發(fā)病機(jī)制和制定相關(guān)防控措施提供科學(xué)依據(jù)。方法⑴采用病例對(duì)照研究的流行病學(xué)方法，于2013年10月至2015年8月間，分別在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、重慶市渝中區(qū)婦幼保健院及成都市婦女兒童中心醫(yī)院收集資料。以2011年4月至2014年8月在重醫(yī)附一院及成都市婦女兒童中心醫(yī)院分娩的HBSAG陽(yáng)性母親及其所生乙肝高危兒童作為研究對(duì)象，使用流行病學(xué)調(diào)查表收集母親基本情況、兒童的出生情況、喂養(yǎng)情況及疫苗接種史，采集兒童靜脈血，分離血清及血凝塊后凍存?zhèn)錂z，乙肝血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)采用ELISA法。以HBSAG陽(yáng)性的兒童為病例組，HBSAG陰性者為對(duì)照組，采用14匹配病例對(duì)照研究的方法，進(jìn)行條件LOGISTIC回歸模型分析乙肝母嬰傳播的影響因素。⑵以上述在重慶的三所醫(yī)院成功采集到血樣的兒童為研究對(duì)象，提取血樣DNA，挑選位于HLADPDQ基因上的7個(gè)標(biāo)簽SNPS，采用SEQUENOMMASSARRAY方法對(duì)樣本進(jìn)行基因分型，采用二元非條件LOGISTIC回歸模型分析各SNPS與兒童乙肝感染的關(guān)系，采用PHASE20軟件進(jìn)行單倍型連鎖分析，采用MDR302和GMDR07軟件分析各SNPS的交互作用。結(jié)果①乙肝高危兒童乙肝免疫預(yù)防效果乙肝高危兒童的乙肝疫苗接種率為100％，9655聯(lián)合注射了乙肝疫苗和HBIG。乙肝高危兒童HBSAG陽(yáng)性率為309，各年齡組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HBSAB陽(yáng)性率為6915，隨年齡增長(zhǎng)陽(yáng)性率逐步下降（Χ228135，P＜0001）。不同性別HBSAB和HBSAG陽(yáng)性率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②乙肝高危兒童HBV母嬰傳播影響因素母親為HBSAG、HBEAG雙陽(yáng)性的高危兒童乙肝感染率（1509）高于單純HBSAG陽(yáng)性母親（022），P＜001。母親HBEAG陽(yáng)性是乙肝高危兒童HBV母嬰傳播的重要危險(xiǎn)因素（33534，95CI4365257596）。③HLADPDQ基因遺傳變異與兒童乙肝感染的關(guān)聯(lián)分析單因素結(jié)果顯示HLADPA1基因上的RS3077和HLADPB1基因上的RS9277535在兒童HBV病例組和對(duì)照組中基因型頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005），RS3077和RS9277535的G等位基因與A相比，能增加兒童乙肝感染的風(fēng)險(xiǎn)（1309，95CI10461639；1411，95CI11251771）。校正兒童性別、年齡及母親是否乙肝患者因素后發(fā)現(xiàn)，與TT基因型相比，位于HLADPB2基因上的RS9366816TC基因型能增加兒童乙肝感染的風(fēng)險(xiǎn)（1789，95CI11182863）。此外基因模型分析還發(fā)現(xiàn)，與GGAA基因型相比，位于HLADPB1基因上的RS2281388GA基因型能增加兒童乙肝感染的風(fēng)險(xiǎn)（143095CI10411966）。⒁單因素結(jié)果顯示RS3077和RS9277535的GA基因型在乙肝高危兒童HBV突破感染組和未感染組的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005），且RS9277535G等位基因能增加乙肝高危兒童HBV突破感染的風(fēng)險(xiǎn)（151095CI10292215）。對(duì)乙肝高危兒童HBV突破感染的多種基因模型分析發(fā)現(xiàn)，與GAAA基因型相比，RS9277535GG基因型能增加乙肝高危兒童HBV突破感染的風(fēng)險(xiǎn)（203195CI11673534）；而與GG基因型相比，GA基因型能降低乙肝高危兒童HBV突破感染的風(fēng)險(xiǎn)（005095CI00060392）。結(jié)論⑴乙肝高危兒童HBSAB陽(yáng)性率較低，且隨年齡增高逐漸下降。⑵母親HBEAG陽(yáng)性是乙肝高危兒童母嬰傳播的危險(xiǎn)因素。⑶位于HLADP基因上的四個(gè)SNPSRS3077、RS9277535、RS2281388和RS9366816與兒童HBV感染有關(guān)。⑷HLADPB1基因上的RS9277535與出生于HBSAG陽(yáng)性母親的乙肝高危兒童HBV突破感染有關(guān)。

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簡(jiǎn)介：目的潰瘍性結(jié)腸炎（ULCERATIVECOLITIS，UC）是一種慢性、反復(fù)發(fā)作性的結(jié)直腸連續(xù)性黏膜炎癥性疾病，多以年輕患者多發(fā)。但其發(fā)病機(jī)制仍不明確。目前，認(rèn)為UC是一種多因素、異質(zhì)性、多基因遺傳的疾病，多種因素包括環(huán)境、遺傳、感染、免疫、腸道微生物等相互作用的結(jié)果。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)表觀遺傳學(xué)是環(huán)境與遺傳因素之間的橋梁，其中DNA甲基化是重要的表觀遺傳修飾之一，它能夠調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的正常發(fā)育、分化，基因表達(dá)和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA甲基化需要甲基供體，包括葉酸、膽堿、B族維生素和甲硫氨酸。DNA高甲基化與基因沉默相關(guān)，而低甲基化則基因表達(dá)活躍。研究發(fā)現(xiàn)在UC患者腸道T淋巴細(xì)胞中，IFNΓ表達(dá)增加與甲基化水平降低相關(guān)，而且IFNΓ基因（IFNG）甲基化水平在調(diào)節(jié)黏膜細(xì)胞因子分泌中有重要作用。眾多證據(jù)表明在哺乳動(dòng)物發(fā)育過(guò)程中，妊娠期和新生兒期的環(huán)境因素通過(guò)影響表觀遺傳修飾，導(dǎo)致表型的永久性改變。因此，改變母體飲食因素可能通過(guò)影響DNA甲基化參與UC發(fā)生、發(fā)展。本研究以BALCC鼠為研究對(duì)象，通過(guò)給予母鼠甲基供體缺乏飲食，構(gòu)建子代小鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型，并檢測(cè)血清葉酸、維生素B12和同型半胱氨酸水平，結(jié)腸黏膜IFNΓ表達(dá)水平，以及IFNG啟動(dòng)子區(qū)DNA甲基化水平，探討母體甲基供體缺乏是否通過(guò)影響DNA甲基化從而參與UC的發(fā)病過(guò)程。方法1動(dòng)物模型建立7周齡BALBC雌鼠在孕前1個(gè)月開(kāi)始分別喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飲食（C，N3）和甲基供體缺乏飲食（D，即無(wú)葉酸、膽堿、維生素B12和甲硫氨酸，N4），持續(xù)到子代斷乳（即出生后21天）；子代小鼠與母鼠相同飲食直到被處死。子鼠出生后第23天，造模組以25％葡聚糖硫酸鈉溶液（DSS）作為飲用水5天，飲食水量不限。子代小鼠分組如下CDSS組、DDSS組、CDSS組、DDSS組，每組6只。2結(jié)腸炎疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）每日觀察子代小鼠身體狀況、體質(zhì)量、糞便性狀、肛周紅腫糜爛和便血程度。根據(jù)體重減輕程度、糞便性狀和便血程度評(píng)分，分?jǐn)?shù)范圍04分，根據(jù)DAI總分?jǐn)?shù)3（04），評(píng)估結(jié)腸炎癥程度。3采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)子代小鼠外周靜脈血清葉酸、維生素B12和同型半胱氨酸（HCY）水平。4采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)子代小鼠結(jié)腸黏膜組織中IFNΓ的表達(dá)水平。5提取結(jié)腸組織樣本基因組DNA，經(jīng)過(guò)亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化，采用SEQUENOMMASSARRAY甲基化檢測(cè)方法檢測(cè)IFNG啟動(dòng)子區(qū)CPG島甲基化水平。結(jié)果1甲基供體缺乏的證據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)飲食組（CDSS和CDSS組）相比，甲基供體缺乏飲食組（DDSS和DDSS組）小鼠的血清葉酸（887±111比1134±031NMOLL，P2甲基供體缺乏對(duì)DAI和組織學(xué)評(píng)分的影響在DSS處理后第5天，結(jié)腸炎癥程度最高。CDSS組較CDSS組的DAI高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P3小鼠結(jié)腸黏膜組織IFNΓ的表達(dá)水平CDSS組和DDSS組IFNΓ表達(dá)水平較CDSS組和DDSS組顯著增高（214875，P4小鼠結(jié)腸黏膜組織IFNΓ表達(dá)水平與DAI的相關(guān)性CDSS組和DDSS組的IFNΓ表達(dá)水平與DAI呈正相關(guān)（R0853、0840，P均5IFNG啟動(dòng)子區(qū)CPG島甲基化水平對(duì)同一CPG位點(diǎn)四組樣本之間甲基化水平分析未發(fā)現(xiàn)明顯差異，對(duì)四組樣本之間所有CPG位點(diǎn)總甲基化水平分析也未發(fā)現(xiàn)明顯差異。結(jié)論1母體甲基供體缺乏能夠加劇子代小鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎發(fā)病。2甲基供體缺乏飲食可以引起子代結(jié)腸黏膜IFNΓ表達(dá)增高，參與實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎發(fā)病。3甲基供體缺乏并非通過(guò)IFNG啟動(dòng)子區(qū)CPG島低甲基化，從而導(dǎo)致IFNΓ表達(dá)增高，進(jìn)而加重實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎。

簡(jiǎn)介：顱面畸形（CRANIOFACIALDEFMITY，CD）是一種影響人類頭、面、頸發(fā)育的先天性疾病，占先天性出生缺陷病的四分之三。眶距過(guò)寬是某些顱面畸形疾病的臨床表現(xiàn)，常伴隨其他特殊癥狀出現(xiàn)，如突眼、并趾、智力異常等。目前已知多種顱面畸形如顱面裂隙畸形、顱縫早閉癥等均可表現(xiàn)出眶距過(guò)寬，雖然染色體的變異或基因突變可引起眶距過(guò)寬相關(guān)疾病的發(fā)生，但目前其致病機(jī)制尚不清楚。在詳細(xì)收集家系臨床信息的基礎(chǔ)上，本課題從染色體到基因水平對(duì)兩個(gè)表現(xiàn)出遺傳性眶距過(guò)寬家系進(jìn)行了系統(tǒng)研究。通過(guò)探尋兩個(gè)家系相應(yīng)疾病的致病原因，為同類型疾病的診斷以及臨床干預(yù)治療提供理論依據(jù)，基因診斷明確后可為患者及其家庭成員進(jìn)行發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估甚至指導(dǎo)產(chǎn)前診斷。第一部家系一的臨床檢查及遺傳學(xué)研究1、材料和方法11臨床檢查分別采集家系一患者及正常成員的詳細(xì)病史、遺傳學(xué)信息，患者進(jìn)行必要的體格檢查及相關(guān)?？茩z查；12全血基因組DNA提取抽取家系患者及正常成員的外周血液樣本，提取全血基因組DNA；13核型分析對(duì)家系一患者進(jìn)行染色體G顯帶核型分析實(shí)驗(yàn)，觀察染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)量的情況；14ACGH檢查采用微陣列比較基因組雜交技術(shù)檢測(cè)患者是否存在染色體拷貝數(shù)變異（COPYNUMBERVARIANTCNV）；15CNV驗(yàn)證對(duì)ACGH發(fā)現(xiàn)的CNV設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，利用熒光定量PCR進(jìn)行了家系共分離驗(yàn)證；針對(duì)缺失片段的STS區(qū)域進(jìn)行雜合性缺失分析（LOSSOFHETEROZYGOSITYLOH），確定CNV的遺傳方式。2、結(jié)果家系一先證者主要表現(xiàn)為輕度到中度智力障礙和眶距過(guò)寬、高額頭和寬鼻根等特殊面容；患者III3臨床表現(xiàn)與之相似但無(wú)明顯智力發(fā)育障礙。先證者有兩個(gè)哥哥，已故，均表現(xiàn)出嚴(yán)重的智力障礙和發(fā)育障礙。家系的其他成員身體均健康，智力正常?；颊吆诵头治鼋Y(jié)果正常，ACGH檢查發(fā)現(xiàn)患者II3和III3各自攜帶3個(gè)CNV，結(jié)合家系正常成員ACGH結(jié)果分析和DGV、ISCA數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，鎖定CHR14Q3232Q3233的微重復(fù)和CHR17P133的微缺失為家系的致病CNV。熒光定量PCR和LOH分析間接證明了這兩個(gè)CNV的致病性和遺傳途徑。3、結(jié)論本研究中患者同時(shí)攜帶CHR14Q3232Q323微重復(fù)和CHR17P133微缺失兩種拷貝數(shù)變異并表現(xiàn)出兩種綜合征的臨床特征。上述兩個(gè)拷貝數(shù)變異為該家系遺傳性眶距過(guò)寬的致病原因，本研究首次發(fā)現(xiàn)患者同時(shí)攜帶這兩種CNV并且出現(xiàn)在同一綜合征里。第二部家系二的臨床檢查及遺傳學(xué)研究1、材料和方法11臨床檢查分別采集家系二患者及正常成員的詳細(xì)病史、遺傳學(xué)信息，患者進(jìn)行必要的體格檢查及相關(guān)?？茩z查；12全血基因組DNA提取抽取家系患者及家系其他成員的外周血液樣本，提取全血基因組DNA；13已知基因篩查利用SANGER測(cè)序?qū)蜻x疾病致病基因的外顯子及其旁翼區(qū)的堿基序列進(jìn)行基因突變檢測(cè)；14核型分析對(duì)家系所有患者進(jìn)行染色體G顯帶核型分析實(shí)驗(yàn)，觀察染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)量的情況；15ACGH檢查采用微陣列比較基因組雜交技術(shù)檢測(cè)患者染色體拷貝數(shù)變異情況；16二代測(cè)序探尋致病基因選取合適的樣本進(jìn)行全外顯子組測(cè)序以及分析測(cè)序數(shù)據(jù)，根據(jù)家系遺傳特征制定個(gè)性化篩選策略并篩選出可能的候選基因，基于GO的候選基因功能進(jìn)行富集分析。2、結(jié)果家系二連續(xù)3代均有患者表現(xiàn)出嚴(yán)重的眶距過(guò)寬的面部異常，遺傳方式呈顯性遺傳。部分患者除了明顯的眶距過(guò)寬的表現(xiàn)之外，還有其他特殊癥狀，家系其他成員身體健康。經(jīng)過(guò)已知致病基因篩查、染色體核型分析、ACGH檢查未找到相關(guān)染色體變異和致病基因突變位點(diǎn)。全外顯子組測(cè)序以及相關(guān)數(shù)據(jù)分析獲得96個(gè)候選基因，GO分析發(fā)現(xiàn)在“肽酶活性”功能和“細(xì)胞粘附”功能領(lǐng)域候選基因富集程度較高。3、結(jié)論家系二患者的致病原因復(fù)雜，經(jīng)過(guò)已知基因篩查、核型分析和ACGH的檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)患者存在致病位點(diǎn)或染色體變異，排除家系疾病原因與染色體異常或PFEIFFER綜合征、CROUZON綜合征、APERT綜合征和顱額鼻綜合征相關(guān)。根據(jù)二代測(cè)序以及數(shù)據(jù)分析提示家系二患者疾病的致病基因可能與某些“肽酶活性”和“細(xì)胞粘附”功能相關(guān)。

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)收集遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)（THELAZIACALLIPAEDATCP）人體感染標(biāo)本，對(duì)其進(jìn)行病例資料分析、形態(tài)學(xué)觀察和遺傳變異研究，初步獲得遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)病的流行特征，了解遵義及周邊地區(qū)TCP形態(tài)特點(diǎn)及種間和種內(nèi)進(jìn)化關(guān)系，不僅為遵義及周邊地區(qū)結(jié)膜吸吮線蟲(chóng)病的防治提供依據(jù)，也為豐富TCP基因組序列信息奠定基礎(chǔ)。方法1、遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、遵義市航天醫(yī)院眼科采集TCP感染者成蟲(chóng)標(biāo)本，獲得感染者病例資料；2、光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡下觀察TCP雌、雄蟲(chóng)形態(tài)特征和超微結(jié)構(gòu)；3、HE染色法觀察TCP雌、雄蟲(chóng)橫切和縱切組織結(jié)構(gòu)特征；4、利用試劑盒提取遵義及周邊地區(qū)不同來(lái)源地蟲(chóng)體DNA，分別進(jìn)行18SRRNA、COX1兩個(gè)基因的PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)；5、對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，利用CLUSTALX183進(jìn)行比對(duì)，并用MEGA701軟件基于最大似然法（ML）進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果1、病例資料分析結(jié)果顯示遵義及周邊地區(qū)TCP人體感染病例為散發(fā)，病例近年逐漸增多，每年8～11月為高發(fā)期；感染者集中在35～60歲；女性多于男性；以農(nóng)村患者居多，其中正安縣病例最多，約13患者家中養(yǎng)有狗、貓。2、遵義及周邊地區(qū)人體感染TCP形態(tài)特征與其他地區(qū)蟲(chóng)體基本相同；掃描電鏡下觀察遵義及周邊地區(qū)TCP超微結(jié)構(gòu)與其他地區(qū)蟲(chóng)體存在一定差異，遵義及周邊地區(qū)TCP口囊底部有兩塊半月形的咽門(mén)結(jié)構(gòu)，成蟲(chóng)尾部腹面末端1對(duì)尾乳突上未觀察到有新月形開(kāi)口。3、HE染色結(jié)果顯示TCP體表結(jié)構(gòu)為鋸齒狀皺褶，為多肌型線蟲(chóng)；體壁由角皮層、皮下層和縱肌層組成，體內(nèi)有消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等。4、遵義及周邊不同地區(qū)（正安縣、綏陽(yáng)縣、桐梓縣、習(xí)水縣等）TCP18SRRNA基因序列同源性為99％～100；遵義及周邊地區(qū)多數(shù)樣本18SRRNA基因與日本OITA（AB5382821）樣本同源性為100，系統(tǒng)發(fā)育分析顯示同在一個(gè)分支。5、遵義及周邊不同地區(qū)TCP樣本COX1基因同源性為98～100，與羅馬尼亞（KP0877961）、日本OITA（AB5382831）樣本等其他地區(qū)COX1基因同源性為95～98。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示正安1號(hào)與日本OITA（AB5382831）在一個(gè)分支；習(xí)水等遵義及周邊地區(qū)多數(shù)樣本的COX1基因與遵義市區(qū)2號(hào)、正安（2、3）號(hào)之間的親緣關(guān)系較近；遵義市區(qū)1號(hào)則與羅馬尼亞（KP0877961）、塞爾維亞（KJ4339831）樣本序列在同一分支。結(jié)論1、遵義及周邊地區(qū)TCP人體感染病例為散發(fā)，近年逐漸增多；2、遵義及周邊地區(qū)TCP蟲(chóng)體的形態(tài)特征與其他地區(qū)基本一致，但掃描電鏡下有一定區(qū)別；3、18SRRNA基因同源性高，可以作為T(mén)CP有效檢測(cè)基因；COX1基因則存在一定的種內(nèi)和不同地域差異，可作為T(mén)CP種群遺傳變異的有效分子標(biāo)記。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R7379學(xué)號(hào)2014010062重慶醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文（學(xué)術(shù)學(xué)位）（學(xué)術(shù)學(xué)位）論文題目DKK2在人結(jié)在人結(jié)直腸癌中表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其抑制結(jié)腸癌中表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究作者姓名王燦王燦一級(jí)學(xué)科名稱臨床醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科名稱腫瘤學(xué)腫瘤學(xué)論文答辯年月20172017年5月指導(dǎo)教師姓名（職稱、單位名稱）陶謙陶謙教授教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院任國(guó)勝任國(guó)勝教授教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院目錄英漢縮略語(yǔ)句名詞對(duì)照英漢縮略語(yǔ)句名詞對(duì)照1中文摘要中文摘要2英文摘要英文摘要4論文正文論文正文DKK2在人結(jié)在人結(jié)直腸癌中的表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其抑制結(jié)腸癌中的表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞生直腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究7前言前言7第一章第一章探討探討DKK2在人結(jié)在人結(jié)直腸癌細(xì)胞株和結(jié)腸癌細(xì)胞株和結(jié)直腸相關(guān)組織樣本的表達(dá)腸相關(guān)組織樣本的表達(dá)111實(shí)驗(yàn)材料與方法實(shí)驗(yàn)材料與方法132結(jié)果結(jié)果183討論討論19第二章第二章探討探討DKK2基因啟動(dòng)子在人結(jié)基因啟動(dòng)子在人結(jié)直腸癌中的甲基化癌中的甲基化211實(shí)驗(yàn)材料與方法實(shí)驗(yàn)材料與方法232結(jié)果結(jié)果263討論討論31第三章第三章探討探討DKK2抑制人結(jié)抑制人結(jié)直腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的機(jī)制腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的機(jī)制331實(shí)驗(yàn)材料與方法實(shí)驗(yàn)材料與方法342結(jié)果結(jié)果433討論討論54全文總結(jié)全文總結(jié)57參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)58文獻(xiàn)綜述文獻(xiàn)綜述63致謝致謝74攻讀學(xué)位攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文期間發(fā)表的論文75

簡(jiǎn)介：背景目前，創(chuàng)傷是世界范圍內(nèi)的一個(gè)較為嚴(yán)重的公共健康問(wèn)題，也是青年人致死的主要原因。隨著治療手段和護(hù)理技術(shù)的不斷發(fā)展，嚴(yán)重創(chuàng)傷病人也逐漸能夠在創(chuàng)傷中生存下來(lái)。然而創(chuàng)傷后并發(fā)癥仍然是住院病人致死的主要原因。因此，在第一時(shí)間預(yù)測(cè)并阻止創(chuàng)傷并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展將會(huì)是治療創(chuàng)傷的一項(xiàng)有效措施。眾所周知，膿毒癥以及多器官功能障礙綜合征MODS是較為常見(jiàn)且嚴(yán)重的創(chuàng)傷并發(fā)癥。當(dāng)機(jī)體遇到微生物侵襲后所發(fā)生的超過(guò)機(jī)體承受能力的炎癥反應(yīng)是膿毒癥發(fā)生的根本原因。眾多炎癥因子的產(chǎn)生和釋放也將會(huì)促進(jìn)血管內(nèi)凝血和多器官功能障礙的發(fā)生。這種過(guò)度的炎癥反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制或許能為我們探索膿毒癥以及多器官功能障礙的相關(guān)危險(xiǎn)因素提供有價(jià)值的線索。白介素6（INTERLEUKIN6，IL6）是一種由內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞等產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它能夠刺激B、T等淋巴細(xì)胞，而且可以誘導(dǎo)發(fā)熱。目前的一些研究證實(shí)IL6在細(xì)菌入侵機(jī)體時(shí)所發(fā)生的炎癥反應(yīng)中扮演者重要的角色。TOLL樣受體2TOLLLIKERECEPT2，TLR2是TLR家族中的一員，它能夠識(shí)別一系列的細(xì)菌脂蛋白分子。有研究認(rèn)為T(mén)LR2蛋白分子是抵抗感染的最原始屏障中的一員。截止目前，越來(lái)越多的學(xué)者試圖探索IL6和TLR2兩個(gè)基因上的單核苷酸多態(tài)性與膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的臨床關(guān)聯(lián)性。在這些常見(jiàn)的SNP位點(diǎn)中，IL6174GC和TLR2ARG753GLN兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)被廣泛研究。然而，目前的結(jié)果卻存在較大的爭(zhēng)議。因此，我們?cè)谡撐牡牡谝徊糠滞ㄟ^(guò)META分析進(jìn)一步探索IL6174GC和TLR2ARG753GLN兩個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)膿毒癥發(fā)生和發(fā)展的影響。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（PEROXISOMEPROLIFERATACTIVATEDRECEPTS，PPARS）是一類核受體超家族的轉(zhuǎn)錄因子。它們?cè)谡{(diào)節(jié)代謝、細(xì)胞的增殖和分化以及免疫反應(yīng)等過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。目前為止，在人類中共發(fā)現(xiàn)了PPAR家族的三種亞型，即PPARΑ、PPARΒΔ以及PPARΓ。除了關(guān)于PPAR家族成員在代謝方面重要作用的報(bào)道之外，人們開(kāi)始越來(lái)越多地探索該家族成員在炎性疾病的發(fā)生和發(fā)展中的作用。這其中包括炎性腸病、腫瘤和蛋白尿性腎病等較為常見(jiàn)的炎性疾病。目前的研究顯示這類受體能夠?qū)FΚB的下游的炎性目的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，這或許是該家族成員發(fā)揮抗炎作用的一種較為常見(jiàn)的機(jī)制。而且PPAR家族成員的配體能夠?qū)ρ装Y反應(yīng)發(fā)生部位的白細(xì)胞聚集過(guò)程產(chǎn)生抑制作用。因此，探索PPAR家族成員在膿毒癥和多器官功能障礙發(fā)生發(fā)展中的潛在作用或許對(duì)我們進(jìn)一步明確該疾病的病理生理以及治療起到重要的作用。近期，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性SNP對(duì)創(chuàng)傷后不同患者的炎癥反應(yīng)差異有著重要的作用。雖然現(xiàn)階段不少學(xué)者已經(jīng)對(duì)PPAR家族基因在炎性疾病中的作用展開(kāi)一定的研究，但是針對(duì)該家族成員的等位基因突變對(duì)創(chuàng)傷后膿毒癥以及MODS的影響卻少有探究?；谝陨闲畔?，我們?cè)谡撐牡牡诙糠滞ㄟ^(guò)在PPAR家族成員的全基因范圍內(nèi)挑選SNP位點(diǎn)，繼而探索其對(duì)創(chuàng)傷后膿毒癥和多器官功能障礙的影響。材料和方法1META分析我們首先通過(guò)PUBMED，EMBASE和WEBOFKNOWLEDGE三個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)已發(fā)表文獻(xiàn)進(jìn)行檢索。兩位實(shí)驗(yàn)人員按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立對(duì)檢索的文獻(xiàn)展開(kāi)篩查，并完成對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)的提取工作。由于目前人們對(duì)膿毒癥的遺傳模型還不確定，所以我們采用等位基因模型BVSA、共顯性模型BBVSAA、隱性模型BBVSABAA以及顯性模型BBABVSAA分別進(jìn)行META分析。我們用比值比和95％置信區(qū)間來(lái)評(píng)價(jià)相應(yīng)的SNP位點(diǎn)和膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。Z檢驗(yàn)用于評(píng)價(jià)合并后的比值比。除此之外，我們又分別進(jìn)行了亞組分析、異質(zhì)性分析、敏感性分析以及發(fā)表偏倚的檢測(cè)來(lái)進(jìn)一步評(píng)價(jià)相關(guān)SNP位點(diǎn)與膿毒癥的風(fēng)險(xiǎn)。2PPAR家族基因多態(tài)性與創(chuàng)傷后膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的臨床關(guān)聯(lián)性研究我們研究中共納入734例中國(guó)創(chuàng)傷病人，所有患者均為生活在重慶的漢族人。基因的研究區(qū)域包含轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游延伸3KB區(qū)域、終止密碼下游延伸3KB以及基因的所有外顯子和內(nèi)含子。通過(guò)登錄HAPMAP數(shù)據(jù)庫(kù)的網(wǎng)站，我們獲得上述研究區(qū)域內(nèi)的所有SNP位點(diǎn)信息。利用HAPLOVIEW軟件對(duì)PPARΑ、PPARΒ和PPAR?；蜓芯繀^(qū)域內(nèi)的所有SNP位點(diǎn)分別構(gòu)建單倍型。共計(jì)挑選出9個(gè)標(biāo)簽SNP位點(diǎn)。我們使用改進(jìn)的多重高溫連接酶檢測(cè)反應(yīng)IMLDR技術(shù)對(duì)所收集的樣本DNA展開(kāi)基因分型工作。另外，我們采用酶聯(lián)免疫反應(yīng)的方法對(duì)經(jīng)過(guò)LPS刺激后的外周血白細(xì)胞的腫瘤壞死因子Α表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果1META分析我們的結(jié)果顯示共有20個(gè)研究和7個(gè)研究分別探索了IL6174GC位點(diǎn)的基因多態(tài)性與膿毒癥的發(fā)生和死亡的相關(guān)性。META分析顯示目前在四種遺傳模型下，并沒(méi)有直接的證據(jù)證明IL6174GC位點(diǎn)的突變與膿毒癥的發(fā)生和死亡存在明顯的相關(guān)性。同樣的，亞組分析結(jié)果也顯示二者之間沒(méi)有必然的相關(guān)性存在。雖然我們?cè)陔[性模型下發(fā)現(xiàn)IL6174GC位點(diǎn)的突變與膿毒癥的死亡率有統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性，但是經(jīng)過(guò)BONFERRONI校正后這種關(guān)聯(lián)性消失。在TLR2ARG753GLN位點(diǎn)的基因多態(tài)性和膿毒癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的META分析中我們共納入了12項(xiàng)研究，包含898名膿毒癥病人和1517名對(duì)照。結(jié)果顯示在等位基因模型和顯性模型下，TLR2ARG753GLN位點(diǎn)的多態(tài)性和膿毒癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在明顯的關(guān)聯(lián)。另外，亞組分析與總的分析結(jié)果一致，TLR2ARG753GLN位點(diǎn)的多態(tài)性能夠影響膿毒癥的發(fā)生。2PPAR家族基因多態(tài)性與創(chuàng)傷后膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的臨床關(guān)聯(lián)性研究研究中的734名病人均存活48小時(shí)以上。隨訪發(fā)現(xiàn)共有300人發(fā)生膿毒癥，其中138人46％出現(xiàn)病原菌血培養(yǎng)陽(yáng)性。374人51％發(fā)生器官功能障礙，其中116人發(fā)生兩個(gè)或兩個(gè)以上器官功能障礙。統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)呼吸道感染是最常見(jiàn)的感染類型。在所有PPAR家族的SNP位點(diǎn)中我們篩選出9個(gè)標(biāo)簽SNP位點(diǎn)，分別為RS135551、RS5769178、RS4253711、RS4823613、RS6902123、RS2016520、RS4684846、RS10865710和RS1822825。除RS2016520位點(diǎn)位于5UTR位置和RS10865710位點(diǎn)位于EXONA2位置以外，其余位點(diǎn)均位于內(nèi)含子區(qū)域內(nèi)。在我們的研究人群中，這9個(gè)標(biāo)簽SNP位點(diǎn)的最小等位基因頻率MAF分別為76％RS135551、15％RS5769178、144％RS4253711、232％RS4823613、31％RS6902123、304％RS2016520、458％RS4684846、346％RS10865710和455％RS1822825。所有位點(diǎn)的基因型在研究人群中的分布均滿足哈代溫伯格平衡。進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析顯示，我們所研究的每一個(gè)SNP位點(diǎn)的不同基因型的人群在性別、年齡和ISS評(píng)分上都沒(méi)有明顯的差異。PPAR?；騌S10865710位點(diǎn)攜帶G等位基因的病人與攜帶C等位基因的病人相比會(huì)明顯提高膿毒癥的發(fā)生率和MODS評(píng)分（隱性模型下該位點(diǎn)突變與膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性P0002，與多器官功能障礙評(píng)分的相關(guān)性P0041顯性模型下位點(diǎn)突變與膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性P0046）。對(duì)該位點(diǎn)在等位基因模型下進(jìn)行回歸分析時(shí)我們發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)與膿毒癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)仍有明顯的相關(guān)性P0001。而其他八個(gè)位點(diǎn)在我們的研究中并未發(fā)現(xiàn)與創(chuàng)傷后膿毒癥和MODS評(píng)分具有明顯的相關(guān)性。進(jìn)一步分析顯示，在60例創(chuàng)傷病人的標(biāo)本（RS10865710位點(diǎn)基因型為GG、GC和CC的樣本各20例）中，RS10865710位點(diǎn)的突變與LPS誘導(dǎo)外周白細(xì)胞后腫瘤壞死因子Α的表達(dá)水平有明顯的相關(guān)性。攜帶G等位基因的病人腫瘤壞死因子Α的表達(dá)水平明顯高于攜帶C等位基因的病人顯性模型下P0041，隱性模型下P0027。結(jié)論本文第一部分結(jié)果顯示TLR2ARG753G1N位點(diǎn)的多態(tài)性可以顯著影響膿毒癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。因此，該位點(diǎn)或許能夠用于膿毒癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)警診斷。然而，META分析結(jié)果表明IL6174GC位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)膿毒癥的發(fā)生率和死亡率并沒(méi)有明顯影響。我們需要大樣本的研究來(lái)進(jìn)一步證實(shí)我們的結(jié)論。第二部分中，我們?cè)赑PAR家族三個(gè)成員基因的研究區(qū)域內(nèi)共挑選出9個(gè)SNP位點(diǎn)。結(jié)果顯示在中國(guó)漢族人中PPARΓ基因RS10865710位點(diǎn)的突變與創(chuàng)傷后膿毒癥和MODS的風(fēng)險(xiǎn)具有明顯的相關(guān)性。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)突變與LPS誘導(dǎo)的外周白細(xì)胞的腫瘤壞死因子Α的表達(dá)水平有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。因此，該位點(diǎn)今后或許可以用來(lái)對(duì)創(chuàng)傷后病人進(jìn)行膿毒癥和多器官功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

簡(jiǎn)介：藥物研發(fā)是一項(xiàng)投入高產(chǎn)出低的工作，如何提高藥物研發(fā)效率是醫(yī)藥行業(yè)面臨的一個(gè)主要問(wèn)題。研究新藥從老藥出發(fā)可以極大地降低藥物研發(fā)的難度。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，二代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，人類基因組的注釋信息越來(lái)越豐富。分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的突破使研究者們可以更深入地理解人類疾病，為發(fā)展新的藥物研發(fā)方法奠定了理論基礎(chǔ)。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究者注意到基因的遺傳信息運(yùn)用到藥物研發(fā)的潛力。GWASDB、OMIM、HGMD等數(shù)據(jù)庫(kù)都收集了大量的影響人類表型的遺傳學(xué)變異信息。然后根據(jù)藥物靶標(biāo)互作信息，可以找到有遺傳信息的基因?qū)?yīng)的藥物，從而預(yù)測(cè)藥物的潛在活性。但是這種藥物活性預(yù)測(cè)方法效率比較低，藥物的富集效率只有5％10。如何提高藥物預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率是一個(gè)有挑戰(zhàn)性的問(wèn)題。考慮到疾病的致病因子往往不止一個(gè)，因此針對(duì)多個(gè)疾病相關(guān)基因開(kāi)展藥物發(fā)現(xiàn)將提高藥物富集效率，加快藥物研發(fā)進(jìn)度。據(jù)此，本論文采用靶標(biāo)系統(tǒng)遺傳學(xué)方法，建立了藥物活性預(yù)測(cè)模型。首先，整合了7個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)收集的遺傳變異信息和DGIDB中的藥物活性信息。為了統(tǒng)一基因和藥物相關(guān)的疾病描述，使用醫(yī)學(xué)一體化系統(tǒng)UMLS中的醫(yī)學(xué)主題詞表MESH標(biāo)準(zhǔn)化了各來(lái)源的疾病描述。從而獲得了每一類疾病的若干致病基因和治療藥物。然后，從致病基因出發(fā)尋找與其相互作用的藥物，發(fā)現(xiàn)在絕大多數(shù)疾病中多靶標(biāo)的藥物比單靶標(biāo)藥物更容易產(chǎn)生相應(yīng)的治療活性，在此基礎(chǔ)上提出了基于系統(tǒng)遺傳學(xué)的藥物預(yù)測(cè)模型。使用支持向量機(jī)、樸素貝葉斯和邏輯回歸三種機(jī)器學(xué)習(xí)方法，對(duì)246種疾病構(gòu)建了基于兩個(gè)遺傳特征的預(yù)測(cè)模型。使用5折交叉驗(yàn)證的方法，評(píng)價(jià)模型的表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)84種疾病模型的PRECISION達(dá)到了080。針對(duì)精神分裂癥，使用與該疾病關(guān)聯(lián)較強(qiáng)的“TOP”基因，并建立了4特征的藥物預(yù)測(cè)模型。模型的各項(xiàng)評(píng)價(jià)指標(biāo)比2特征的模型均有提升。說(shuō)明基于系統(tǒng)遺傳學(xué)的藥物預(yù)測(cè)模型可以有效地提高預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率，并有良好的擴(kuò)展?jié)摿?。最后，為了便于同行使用本文的方法，我們建立了TSGDBIBIHZAUTSGDBHTML，實(shí)現(xiàn)了藥物活性預(yù)測(cè)的網(wǎng)絡(luò)服務(wù)。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R395密級(jí)不保密UDC610學(xué)校代碼11065碩士學(xué)位論文高密市原發(fā)性驚厥型癲癇遺傳流行病學(xué)調(diào)查杜省古王春霞教授精神病與精神衛(wèi)生學(xué)2016年11月25日關(guān)鍵詞原發(fā)性驚厥型癲癇；遺傳；流行病學(xué)關(guān)鍵詞原發(fā)性驚厥型癲癇；遺傳；流行病學(xué)GEICEPIDEMIOLOGICALINVESTIGATIONONGAOMICITYPRIMARYCONVULSIVEEPILEPSYABSTRACTOBJECTIVETOEVALUATETHEPRIMARYCONVULSIVEEPILEPSYGEICEFFECTMETHODSCLUSTEREPIDEMIOLOGICALINVESTIGATIONMETHODSTOMEETTHEPRIMARYCONVULSIVEEPILEPSYCRITERIAFTHEDIAGNOSISOF536CASESOFTHEPROBFAMILIESCOMETOSURVEYTOFINDAPOSITIVEFAMILYHISTYOFPATIENTSWITHFACEDETECTIONRATEIS100THISSTUDYWONDUCTEDINGAOMICITYCONVULSIVEEPILEPSYEPIDEMIOLOGICALINVESTIGATIONBASEDONTHECONTROLGROUPNOMEGAOMICITYTOTHECONVULSIVEEPILEPSYGROUPEPIDEMIOLOGYPREVALENCEDATAFTHECONTROLRESULTSTHERESULTSWEREINVESTIGATEDTHEPROBONETWORELATIVESOF16489PERSONS8CASESWEREFOUNDINPATIENTSWITHEPILEPSYPROBSRELATIVESPREVALENCERATEOF0049GAOMICITYCONVULSIVEEPILEPSYEPIDEMIOLOGICALDATAOUTCOMEGROUPSINTHEPREVALENCERATEIS0063THEREWASNOSTATISTICALSIGNIFICANCEP05631ACCDINGTOTHEFALCONERTHRESHOLDMODELTHEYTHEHERITABILITYESTIMATESFIRSTDEGREERELATIVESOFH2246NOTMETHAN60DOESNOTCONFMTOTHEDOMINANTRECESSIVEINHERITANCESEXLINKEDINHERITANCEPOLYGENESINHERITANCEMODELTWORELATIVESOFB0157GEICALLYUNRELATEDCONCLUSIONSTHEGEICFACTSINPRIMARYCONVULSIVEEPILEPSYETIOLOGYISNOTIMPTANTCONSIDERINGITSCAUSEMAYBEASSOCIATEDWITHCHILDHOODNEURODEVELOPMENTALABNMALITIESPOSTGRADUATESTUDENTSHENGGUDUPSYCHIATRYPSYCHOLOGYDIRECTEDBYPROFCHUNXIAWANG

簡(jiǎn)介：中大劑量阿糖胞苷鞏固治療細(xì)胞遺傳學(xué)低中危的年輕急性髓細(xì)胞白血病療效分析⑧論文作者簽名鄉(xiāng)收指導(dǎo)教師簽名龕整論文評(píng)閱人1錢(qián)美華主任醫(yī)師浙江省人民醫(yī)院評(píng)閱人2婁曼L至副主任逝洹太堂醫(yī)堂暄隨屬筮二醫(yī)院評(píng)閱人3垂萱副主堡浙江太堂醫(yī)堂暄隨屬筮二醫(yī)睦答辯委員會(huì)主席湯永民教授浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院委員1韭堂進(jìn)主堡醫(yī)垣蘊(yùn)趔壹紅土室金醫(yī)院委員2重漁洼熬拯逝選太堂醫(yī)堂醫(yī)隨屬筮二醫(yī)醫(yī)委員3佟紅墊熬拯浙江太堂醫(yī)堂院隨屬筮二醫(yī)院委員4童囪民主任醫(yī)短浙江盆厶民醫(yī)院答辯日期2016年5月30日浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文致謝致謝歲月如梭，轉(zhuǎn)眼間，即將畢業(yè)，站在畢業(yè)的門(mén)檻上，回首往昔，奮斗和辛勞成為絲絲記憶，甜美與歡笑也都?jí)m埃落定，浙江大學(xué)以其優(yōu)良的學(xué)習(xí)風(fēng)氣、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲蟹諊涛仪髮W(xué)，以其博大包容的情懷胸襟、浪漫充實(shí)的校園生活教育我成人。值此畢業(yè)論文完成之際，我謹(jǐn)向所有關(guān)心、愛(ài)護(hù)、幫助我的人們表示最誠(chéng)摯的感謝與最美好的祝愿。本論文是在我的導(dǎo)師金潔教授的悉心指導(dǎo)之下完成的，在論文的編寫(xiě)過(guò)程中，從論文的立題、研究方案的確立到論文的寫(xiě)作過(guò)程，每一步都得到恩師孜孜不倦的教誨和無(wú)私的幫助。恩師高尚的品德、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度、敏銳的科研思維、精湛的臨床技能、不斷進(jìn)取的探索精神都是我學(xué)習(xí)的榜樣，將使我受益終生忠心感謝浙醫(yī)一院血液科錢(qián)文斌教授、盂海濤主任、麥文淵主任、佟紅艷主任、王蕾老師、韋菊英老師、俞文娟老師、毛莉萍老師等醫(yī)護(hù)人員在臨床學(xué)J過(guò)程中對(duì)我的指導(dǎo)和幫助，感謝錢(qián)劫靖老師、王敬瀚老師、婁引軍老師、王華鋒老師，索珊珊博士在論文寫(xiě)作及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)中給予的支持和幫助，感謝余夢(mèng)霞博士、馬志新博士、黃淑娟博士、陳曉常碩士、李霞碩士、朱雙麗碩士、賀嘯碩士、閆霄碩士等在數(shù)據(jù)收集及論文寫(xiě)作中的陪伴及幫助最后，感謝我的父母、親人對(duì)我無(wú)微不至的關(guān)懷和照顧，感謝一路陪伴著的室友、同學(xué)和朋友對(duì)我的支持和鼓勵(lì)，感謝醫(yī)路生涯上指導(dǎo)幫助過(guò)我的師兄師姐師弟師妹們，感謝成長(zhǎng)道路上遇到過(guò)的所有友善的人們。