遞增運動負(fù)荷訓(xùn)練對大鼠心房肌蛋白質(zhì)組影響的研究.pdf

1、本研究主要探討遞增運動負(fù)荷訓(xùn)練對大鼠心房肌蛋白質(zhì)組的影響，以篩選出心房肌組織中對運動應(yīng)激具有重要意義的差異性表達(dá)的目標(biāo)蛋白質(zhì)，在蛋白質(zhì)組學(xué)水平上研究運動性疲勞的發(fā)生、發(fā)展的規(guī)律。研究運用蛋白質(zhì)組學(xué)的理論與技術(shù)方法，將10只雄性SD大鼠，分為運動組(n=5)和對照組(n=5)。遞增運動負(fù)荷訓(xùn)練7周，力竭運動后6小時，運動組和對照組同時麻醉處死。提取心房肌組織的全蛋白，依次對樣品蛋白進(jìn)行PH梯度-SDS雙向凝膠電泳分離蛋白、改良考馬氏亮藍(lán)方

2、法染色、基質(zhì)輔助激光解吸離子化飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜分析。 測得運動組和對照組蛋白質(zhì)斑點數(shù)目分別是354±40個和382±24個，匹配率分別為68.67％±9.87％和72.67％±8.62％，相關(guān)系數(shù)為0.71；共獲得具有兩倍以上差異性表達(dá)的蛋白質(zhì)點104個；運動后上調(diào)兩倍以上的蛋白質(zhì)點66個，其中運動后上調(diào)五倍以上的蛋白質(zhì)點18個，未見運動后新增的蛋白質(zhì)點；運動后下調(diào)兩倍以上的蛋白質(zhì)點38個，其中運動后下調(diào)五倍以上的蛋白質(zhì)點23個

3、，運動后消失的蛋白質(zhì)點7個。選擇差異性表達(dá)五倍以上的蛋白質(zhì)點為目標(biāo)蛋白進(jìn)行質(zhì)譜分析，共鑒定出5個蛋白質(zhì)點：運動后上調(diào)的蛋白質(zhì)有心房型心肌肌球蛋白輕鏈-1、谷草轉(zhuǎn)氨酶；運動后下調(diào)、“缺失”的蛋白質(zhì)有α-心肌型肌球蛋白重鏈。 實驗結(jié)果表明:在運動應(yīng)激狀態(tài)下，大鼠心房肌蛋白質(zhì)發(fā)生了明顯的差異性表達(dá)，這些差異性表達(dá)的蛋白質(zhì)點為進(jìn)一步深入研究具有運動性疲勞特征的新的目標(biāo)蛋白提供了充分的實驗依據(jù)；運動應(yīng)激條件下大鼠心房肌蛋白質(zhì)的差異性表達(dá)與

4、心肌組織的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、能量代謝、物質(zhì)代謝以及心肌功能的改變有關(guān)。2-DE圖譜中，運動組表達(dá)量明顯下調(diào)和消失的目標(biāo)蛋白質(zhì)，經(jīng)質(zhì)譜鑒定，與肌肉收縮、運動能力下降及運動性疲勞的發(fā)生有關(guān)；運動組表達(dá)量明顯上調(diào)的目標(biāo)蛋白質(zhì)，與長期遞增運動負(fù)荷訓(xùn)練對組織細(xì)胞的損傷有關(guān)。值得一提的是，通過蛋白質(zhì)組學(xué)方法成功篩選出的心房型心肌肌球蛋白輕鏈-1、谷草轉(zhuǎn)氨酶等蛋白質(zhì)，對機體可能產(chǎn)生的負(fù)面影響，在運動醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的研究尚未展開，為研究運動性心臟疲勞提供了新的思路