不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠下丘腦的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、研究目的：下丘腦是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動(dòng)的神經(jīng)中樞，也是功能復(fù)雜的神經(jīng)內(nèi)分泌中樞。下丘腦參與運(yùn)動(dòng)過程中心血管、內(nèi)分泌與免疫等機(jī)能的調(diào)節(jié)，與運(yùn)動(dòng)性疲勞的產(chǎn)生、恢復(fù)有重要的聯(lián)系。目前關(guān)于運(yùn)動(dòng)與下丘腦的研究主要集中在內(nèi)分泌、神經(jīng)遞質(zhì)與氧化應(yīng)激等方面，而對(duì)下丘腦蛋白質(zhì)組的變化極少有人涉及。本研究通過實(shí)驗(yàn)觀察不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠下丘的代謝、超微結(jié)構(gòu)、以及生化指標(biāo)的影響，應(yīng)用雙向電泳建立運(yùn)動(dòng)大鼠下丘腦蛋白質(zhì)表達(dá)圖譜，比較分析不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠下丘腦蛋白質(zhì)組的差異

2、表達(dá)，篩選并鑒定相關(guān)蛋白質(zhì)，分析其功能及特點(diǎn)，為深入了解運(yùn)動(dòng)對(duì)下丘腦的代謝與神經(jīng)內(nèi)分泌等功能的影響及調(diào)控機(jī)制提供參考依據(jù)。
　　 研究方法：2月齡雄性SD大鼠40只，體重160—180g。隨機(jī)分為3組，對(duì)照組、中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組與大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組，分別進(jìn)行8周中等強(qiáng)度與大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)，顯微鏡觀察下丘腦形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，測定CK、血氨、HB、BUN等血液生化指標(biāo)與下丘腦SOD、MDA、T—AOC自由基代謝指標(biāo)，應(yīng)用雙向電泳與質(zhì)譜技術(shù)等分析下丘腦蛋

3、白質(zhì)組的差異表達(dá)。
　　 研究結(jié)果：(1)運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響，中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞核變粗，突觸增多，大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞的間隙增大，細(xì)胞核大小變化不均勻，部分神經(jīng)細(xì)胞染色異常；(2)不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后肌酸激酶活性與血氨濃度升高，尿素生成增多，大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組由于負(fù)荷較大，疲勞程度較深，血紅蛋白含量降低；(3)不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后大鼠下丘腦氧自由基增多，中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)能使機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)的能力得到增強(qiáng)，

4、大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組下丘腦的自由基大量產(chǎn)生，抗氧化酶活性受到抑制；(4)通過雙向電泳分離大鼠下丘腦組織蛋白質(zhì)，建立不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)大鼠下丘腦蛋白質(zhì)表達(dá)譜，與對(duì)照組比較，中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)與大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)大鼠下丘腦部分蛋白質(zhì)的表達(dá)有顯著差異，(5)通過比較分析與篩選差異顯著的蛋白質(zhì)點(diǎn)，共鑒定出18個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì)。它們分別屬于細(xì)胞骨架蛋白、熱休克蛋白、抗氧化蛋白、代謝酶、信號(hào)傳導(dǎo)蛋白以及1個(gè)分子量為59.87kD的未知功能蛋白質(zhì)。
　　 研究結(jié)論：經(jīng)過

5、8周的不同負(fù)荷跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，大鼠血液生化指標(biāo)、下丘腦神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、氧自由基代謝以及蛋白質(zhì)組表達(dá)譜發(fā)生了相應(yīng)變化。中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)能夠促進(jìn)下丘腦的新陳代謝、抗氧化酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)蛋白的表達(dá)，對(duì)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞骨架蛋白的重新排列，調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能產(chǎn)生了良好的促進(jìn)作用；大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)使下丘腦氧化應(yīng)激程度加深，對(duì)下丘腦的調(diào)節(jié)功能產(chǎn)生了抑制作用。本研究的結(jié)果顯示，應(yīng)用雙向電泳與質(zhì)譜分析能夠?qū)ふ遗c鑒定差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，為進(jìn)一步研究運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)下丘腦的代謝與神經(jīng)內(nèi)分