不同含油量甘藍(lán)型油菜品系比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、甘藍(lán)型油菜是重要的油料經(jīng)濟(jì)作物，是食用植物油的重要來源。高含油量已成為油菜育種的重要目標(biāo)，目前對含油量形成的分子機(jī)理的了解仍然較少，蛋白質(zhì)組學(xué)實驗技術(shù)是研究種子含油量性狀的有用技術(shù)手段。本文首先建立了適合于甘藍(lán)型油菜雙向電泳的體系，然后利用該體系對不同含油量甘藍(lán)型油菜成熟種子總蛋白以及油體蛋白進(jìn)行比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究，結(jié)果如下：
　　 （1）建立了一種適合甘藍(lán)型油菜的雙向電泳體系，找到了合適的蛋白提取方法和IEF 聚焦程序。研究

2、表明，采用TCA-丙酮提取方法、pH 4-7 范圍膠條以及改進(jìn)的IEF 聚焦程序，可以得到較好的蛋白質(zhì)雙向電泳結(jié)果。所建立的實驗體系在甘藍(lán)型油菜的幼苗、葉片、莖和種子中，都能得到較好的蛋白質(zhì)雙向電泳結(jié)果，表明該體系對甘藍(lán)型油菜普遍適用，為油菜蛋白質(zhì)組學(xué)的研究打下了基礎(chǔ)。
　　 （2）通過TEM 技術(shù)比較研究了不同含油量甘藍(lán)型油菜油體解剖結(jié)構(gòu)的差異，結(jié)果表明，高含油量的種子一般油體形態(tài)都比較小且排列緊密；低含油量的種子一般油體形態(tài)

3、較大且出現(xiàn)超大油體結(jié)構(gòu)，大體積的油體，特別是超大油體，對于細(xì)胞空間的利用率，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及小油體緊密排列的結(jié)構(gòu)，不利于油份的積累和儲藏，最終含油量也相對較低。進(jìn)一步分析可知，低含油量種子的種胚中，蛋白質(zhì)儲藏腔明顯多于高含油量種子的種胚，這表明低含油量種子儲藏蛋白的能力較高含油量種子強(qiáng)，其總蛋白質(zhì)的含量也相對較高。
　　 （3）通過對不同含油量甘藍(lán)型油菜成熟種子總蛋白的2-DE 差異蛋白質(zhì)組研究，共鑒定出120個差異蛋白，這些蛋白按照功

4、能可分為碳水化合物代謝蛋白、細(xì)胞增殖/分裂蛋白、細(xì)胞防御蛋白、氨基酸合成蛋白、蛋白質(zhì)合成蛋白、次生代謝蛋白、儲藏蛋白、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白以及不明分類蛋白9 大類。進(jìn)一步分析可知，絕大部分差異點(diǎn)蛋白均屬于儲藏蛋白、細(xì)胞防御蛋白、碳水化合物代謝蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，這表明脂肪酸含量差異的形成，是一個極為復(fù)雜的生理生化過程。
　　 （4）通過對不同含油量甘藍(lán)型油菜成熟種子油體蛋白的2-DE 差異蛋白質(zhì)組研究，共鑒定出34個差異蛋白，這些蛋白按照功能可