春化過程對甘藍(lán)型油菜甲基化水平及蛋白質(zhì)影響的分析.pdf

1、大多數(shù)一年生或二年生的冬性植物（如油菜、小麥）在其種子萌動期或營養(yǎng)生長初期必須經(jīng)過一定時期的低溫處理（通常為4℃，2-8周）才能開花。這一低溫處理一定時期從而促進(jìn)植物開花的作用稱為春化作用。春化作用(vernalization)是低溫需求型植物成花所必需的發(fā)育階段，在植物成花誘導(dǎo)中，低溫是一個重要物理因子，是一種受遺傳控制的生理過程，此過程中，核酸和蛋白質(zhì)的變化已引起了許多研究者的重視，其中最初的認(rèn)識是對蛋白質(zhì)含量變化的認(rèn)識，多年來一直

2、被作為廣泛的研究和探討對象。種植在我國的90％的油菜屬冬性油菜，春化作用是調(diào)節(jié)植物由營養(yǎng)生長過度到生殖生長的關(guān)鍵途徑之一，經(jīng)受一段時間的低溫處理后，這些冬油菜才能度過春化，在苗期開花結(jié)實。DNA去甲基化已被證實在植物春化作用中起到中重要作用，同時也發(fā)現(xiàn)植物在春化過程中，體內(nèi)的蛋白質(zhì)不論是種類還是數(shù)量，都會發(fā)生變化。對于春化過程中甲基化模式以及蛋白質(zhì)差異表達(dá)，目前研究主要集中于模式植物擬南芥，近年來在小麥、白菜等植物上也有報道。
　

3、　 本文以甘藍(lán)型油菜金裕油品種為實驗材料，將甘藍(lán)型油菜在初春時以5d為間隔時間分期播種在實驗田中，通過間隔時間的長短不同來模擬油菜植株通過低溫春化作用的時間，把植物現(xiàn)蕾開花視為油菜通過春化的關(guān)鍵點，對田間所種植株進(jìn)行統(tǒng)計記錄，調(diào)查各個時期通過春化的植株所占的比率;運用甲基敏感擴(kuò)增片段多態(tài)性(MSAP)的技術(shù)，檢測各個時期樣品的全基因組甲基化模式水平，用統(tǒng)計分析軟件對實驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，證實在春化作用下，對植株基因組DNA甲基化水平模

4、式有影響;對現(xiàn)蕾與未現(xiàn)蕾的油菜葉片分別取樣混合，采用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)做出其蛋白質(zhì)圖譜，通過PDQuest軟件分析，比對現(xiàn)蕾與未現(xiàn)蕾油菜葉片蛋白圖譜的差異，證實在春化作用中現(xiàn)蕾植株與未現(xiàn)蕾植株蛋白數(shù)量和種類存在差異。
　　 主要結(jié)果報告如下:
　　 (1)不同播期（春化時間長短不同）的甘藍(lán)型油菜，隨著播種日期的延長，依次表現(xiàn)為全部現(xiàn)蕾、部分現(xiàn)蕾、未現(xiàn)蕾。與最后一期未現(xiàn)蕾的相比，植株基因組DNA甲基化水平都有所降低，但降低

5、的水平不同。植株基因組DNA甲基化水平相對越低，植株通過春化的比率相對越高;同一期里面，通過春化的植株基因組DNA甲基化水平(12.50％)略低于未通過春化的植株(13.38％)。不同播期的甘藍(lán)型油菜的DNA甲基化水平有顯著的差異，并且隨著播期的延遲DNA甲基化水平呈現(xiàn)下降的趨勢，說明通過春化作用的甲基化水平要比未通過春化作用的甲基化水平低。DNA甲基化水平的變化，勢必會影響基因的表達(dá)，從而造成表型的差異。
　　 (2)使用PD