60%~70%最大攝氧量跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組差異表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本研究探討4周60％～70％最大攝氧量跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠右心室肌蛋白質(zhì)組差異表達(dá)的影響，篩選出對(duì)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激敏感的目標(biāo)蛋白質(zhì)點(diǎn)，并對(duì)部分目標(biāo)蛋白質(zhì)的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，為科學(xué)指導(dǎo)運(yùn)動(dòng)健身及慢性心血管疾病的運(yùn)動(dòng)康復(fù)研究提供新的思路及理論依據(jù)。
　　 方法：將20只SD雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，以跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)的方式，復(fù)制遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷至24m·min—1的4周60％～70％最大攝氧量運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型；提取右心室肌組織的全蛋白進(jìn)行

2、雙向凝膠電泳分離，運(yùn)用ImageMaster2D Platinum圖像分析軟件對(duì)2—DE膠進(jìn)行分析，選擇差異表達(dá)上調(diào)5倍以上及下調(diào)至1/5以下的12個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)作為備選目標(biāo)蛋白質(zhì)點(diǎn)，用串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜蛋白質(zhì)儀(ULGRAFL—FLEX—TOF/TOF)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)對(duì)部分目標(biāo)蛋白質(zhì)的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。
　　 結(jié)果：①大鼠經(jīng)4周60％～70％最大攝氧量運(yùn)動(dòng)后，與對(duì)照組相比，心臟重量增加的百

3、分率為0．62％，而心臟重量指數(shù)增加13．7％。心臟重量指數(shù)的增高有顯著性差異(P<0．05)。②2—DE圖譜上，對(duì)照組檢測(cè)蛋白質(zhì)點(diǎn)437±17個(gè)，實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)448±19個(gè)；運(yùn)動(dòng)后47個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)發(fā)生了較明顯的變化。③通過對(duì)差異表達(dá)上調(diào)5倍以上及下調(diào)至1/5以下的12個(gè)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，共鑒定出了11個(gè)蛋白，這些蛋白分別是：線粒體琥珀酸脫氫酶輔酶黃素蛋白亞基、線粒體—吡咯啉—5—羥酸酯脫氫酶、線粒體ATP合酶α亞基、Josephin—1、谷

4、胱甘肽S—轉(zhuǎn)移酶Mu2、線粒體細(xì)胞色素b—cl聯(lián)合體亞基、心肌肌動(dòng)蛋白α、核苷二磷酸激酶B、微管動(dòng)力調(diào)控蛋白、泛素融合降解1、腺苷酸激酶同工酶1。④逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：運(yùn)動(dòng)組大鼠心肌肌動(dòng)蛋白α1、腺苷酸激酶同工酶1、谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶Mu2、核苷二磷酸激酶B、線粒體ATP合酶亞基a等的mRNA相對(duì)凈光密度值低于對(duì)照組(p>0．05)，表達(dá)水平下降；Josephin域蛋白1的mRNA相對(duì)凈光密度值高于對(duì)照組(p>0．05)，表達(dá)水平