一種低分子肝素完全降解產(chǎn)物的色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法.pdf

1、肝素是一類帶有大量負(fù)電荷，異質(zhì)性的線性糖胺聚糖，主要存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞外基質(zhì)中。肝素是由重復(fù)的二糖單元組成的線性多糖，重復(fù)的二糖單元由己糖醛酸(HexA)和D-葡萄糖胺(GlcN)通過1-4糖苷鍵連接形成。二糖單元中的己糖醛酸可能是β-D-葡萄糖醛酸或者是α-L-艾杜糖醛酸。己糖醛酸可能是2-O-硫酸化，葡萄糖胺可能是6-O-硫酸化，N-硫酸化，N-乙?；?-O-硫酸化。肝素作為臨床抗凝血藥物廣泛用于血栓性疾病的預(yù)防和治療。然而，肝

2、素作為抗凝血藥物具有一定的副作用，如引起出血現(xiàn)象，血小板減少癥和骨質(zhì)疏松癥等，因此限制了其臨床應(yīng)用。
　　低分子量肝素(Lowmolecularweightheparin，LMWH)是由肝素多糖制備得到的一類新型抗凝血藥物。LMWH具有分子量低、抗血栓作用強、生物利用度高和血漿半衰期長等特點，被廣泛用于抗凝血藥物。隨著LMWH仿制藥的出現(xiàn)，對LMWH結(jié)構(gòu)和組成分析以及精細(xì)結(jié)構(gòu)的分析鑒定是必不可少的。
　　我們建立了一種新的基

3、于反相(RP)-高效液相色譜(HPLC)-二極管陣列檢測器(DAD)-電噴霧電離質(zhì)譜(ESI-MS)分析方法用于LMWH精細(xì)結(jié)構(gòu)組成分析。本論文中兩種低分子量肝素達(dá)肝素鈉和依諾肝素鈉用肝素酶完全降解后通過柱前衍生方法與衍生試劑2-氨基吖啶酮（AMAC）結(jié)合，應(yīng)用RP-HPLC-DAD-MS方法分析達(dá)肝素鈉和依諾肝素鈉兩種低分子肝素完全降解組分，成功分離并鑒定到17種達(dá)肝素鈉完全降解組分和15種依諾肝素鈉完全降解組分，通過該實驗方法各組分