2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、α-法尼烯是一種存在于生物體中的倍半萜類物質(zhì),已知與植物的抗冷性、昆蟲的誘導(dǎo)及冷藏蘋果和梨果實重大生理病害一虎皮病的發(fā)生有關(guān),是蘋果果實中重要的香氣成分之一。α-法尼烯的生物合成是通過類異戊二烯途徑中的甲羥戊酸途徑,α-法尼烯合成酶是調(diào)控α-法尼烯合成的關(guān)鍵酶,催化FPP轉(zhuǎn)變?yōu)棣?法尼烯。
   本實驗根據(jù)Genbank中注冊的α-法尼烯合成酶基因全長序列設(shè)計特定引物,利用RT-PCR的方法擴增青香蕉蘋果α-法尼烯合成酶基因的全

2、長,構(gòu)建表達載體,優(yōu)化番茄(中蔬6號)的再生和遺傳轉(zhuǎn)化體系,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化番茄,初步獲得轉(zhuǎn)基因植株,并研究了生理特性。
   主要結(jié)果如下:
   1、構(gòu)建了pBI-AFS正義表達載體,并轉(zhuǎn)化番茄,得到轉(zhuǎn)AFS基因的番茄。
   2、以番茄子葉為材料,優(yōu)化了番茄的再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系,最適宜番茄子葉再生的培養(yǎng)基為MS+ZT2.0mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂6.0g/L,生根培養(yǎng)基為

3、MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖30.0g/L+瓊脂6.0g/L,確定在再生過程中Kan選擇壓為50mg/L;抑菌過程中頭孢霉素100mg/L為宜。
   3、通過克隆青香蕉蘋果的α-法尼烯合成酶基因(AFS)片段,構(gòu)建pEASYE1-AFS-原核表達載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,制備抗體,進行了Western雜交分析,顯示該基因在番茄中成功表達。
   4、高溫處理后轉(zhuǎn)AFS基因番茄比野生型番茄具有較高的耐熱性,高溫脅迫條件下

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