AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白原核表達(dá)及條件優(yōu)化.pdf

1、口蹄疫(Foot and mouth disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV)引起的偶蹄動(dòng)物發(fā)生的高度接觸性的傳染病。由于其爆發(fā)會(huì)對(duì)畜產(chǎn)品進(jìn)出口帶來嚴(yán)重影響，造成全球經(jīng)濟(jì)的巨大損失，因此被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(World organization foranimal health，OIE)列為A類家畜傳染病之首。VP1蛋白是口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，是主要的中和抗原位點(diǎn)，可以誘

2、導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性反應(yīng)。 本實(shí)驗(yàn)將Asia I型FMDV VP1基因通過與pGEM-T載體連接，得到連接質(zhì)粒pGEM-KZ-VP1，經(jīng)過菌落擴(kuò)增、酶切回收純化VP1基因片段，將其與原核表達(dá)載體pET-28a連接，成功構(gòu)建重組表達(dá)載體pET28-K2/03VP1。將重組載體轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21中，用不同的IPTG濃度及不同誘導(dǎo)時(shí)間誘導(dǎo)菌株表達(dá)VP1蛋白，分析不同IPTG濃度及不同誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)蛋白表達(dá)量的影響，