豬水泡病病毒RNA的檢測及VP1基因在原核中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、豬水泡病是由豬水泡病病毒引起的豬的一種烈性傳染病,與口蹄疫和水泡性口炎等被國際動物衛(wèi)生組織列為A類傳染病。該病自爆發(fā)以來,受到世界各國的高度重視,國內(nèi)外對本病的診斷和檢測方法及其分子生物學特性進行了大量的研究。為滿足出入境檢疫的需要,在查閱大量文獻的基礎(chǔ)上,對病毒RNA的檢測和VP1基因的原核表達做了進一步的研究。試驗一RT-PCR檢測豬水泡病病毒的建立及應(yīng)用根據(jù)GenBank已發(fā)表的序列,設(shè)計了兩對引物,用RT-PCR及RT-nPCR

2、方法檢測SVDV的RNA,并進行了特異性和敏感性測定。試驗二豬水泡病病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1基因的核苷酸序列分析提取SVDV毒株的RNA,RT-PCR擴增了包括VP1基因在內(nèi)的約872bp的DNA片段。經(jīng)純化后,與pMD18-T載體連接,轉(zhuǎn)化Escherichia coli,篩選獲得陽性克隆菌株,采用雙脫氧DNA末端終止法測得了VP1基因的核苷酸序列,并與國內(nèi)外已發(fā)表的VP1基因序列及其推導(dǎo)的氨基酸序列進行了比較分析。試驗三豬水泡病病毒結(jié)構(gòu)蛋

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