人腸道病毒71型衣殼蛋白VP1、VP2、VP3、VP4的構(gòu)建、表達及抗原性研究.pdf

1、人腸道病毒71型(EV71)屬于小RNA病毒科、腸道病毒屬的成員，是手足口病的主要病原體。手足口病和中樞神經(jīng)感染是EV71病毒感染引起的兩大常見臨床癥狀。目前針對EV71病毒感染的治療還沒有特異和高效的藥物，也沒有預(yù)防性疫苗上市。滅活疫苗的研究還處于Ⅰ期臨床試驗階段；基因工程重組蛋白疫苗尚處于動物實驗階段，需要尋找好的有效抗原蛋白。因此，本論文在原核表達系統(tǒng)E.coli中高效表達了EV71四種衣殼蛋白：VP1、VP2、VP3、VP4，表

2、達產(chǎn)物均以包涵體形式存在；包涵體經(jīng)過純化、復(fù)性后的SDS-PAGE電泳純度平均達到90％以上。動物實驗結(jié)果顯示VP1、VP4蛋白具有良好的免疫原性，產(chǎn)生高抗體滴度；VP2、VP3無明顯的免疫原性，沒有檢測到抗體滴度；僅VP1免疫血清具有中和活性。通過本論文實驗，加深了對EV71四種衣殼蛋白的認識；證實了VP4因為沒有產(chǎn)生中和抗體，不具有成為基因工程重組蛋白疫苗候選抗原的潛力。同時證實了原核表達的VP2、VP3抗原蛋白經(jīng)過去變性劑初步復(fù)性