5-氮雜-2-脫氧胞苷及曲古抑菌素A對胃癌SGC-7901及其CHFR基因表達的影響.pdf

1、目的：胃癌是全球最常見的癌癥致死原因之一,胃癌每年新發(fā)病例數(shù)約占全球新發(fā)病人數(shù)的一半。眾所周知,表觀遺傳學改變是胃癌最重要的發(fā)病機制,DNA甲基化和組蛋白修飾是表觀遺傳學改變主要的兩種形式。抑癌基因的表觀遺傳學改變是胃癌發(fā)生最重要的因素。CHFR是有絲分裂細胞檢查點基因與胃癌的發(fā)生、發(fā)展都有密切關(guān)系。我們實驗室前期已經(jīng)展示了抑癌基因啟動子區(qū)與腫瘤的發(fā)展關(guān)系密切。本研究主要探討DNA甲基化抑制劑5-氮雜-2-脫氧胞苷和組蛋白去乙?；敢种?/p>

2、劑曲古抑菌素A對胃癌SGC-7901和MGC-803細胞株的增殖及對CHFR基因表達水平的影響。
　　方法：體外培養(yǎng)胃癌細胞株SGC-7901和MGC-803,將實驗分為對照組:未加任何藥物組;5-Aza-dC組:濃度為10μmol/L;TSA組:濃度為1μmol/L;5-Aza-dC+TSA組:向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入10μmol/L的5-Aza-dC,培養(yǎng)24小時后再加入含1μmol/LTSA的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。觀察5-Aza-dC或TS

3、A單獨或聯(lián)合作用于SGC-7901和MGC-803細胞株24,48和72小時,應(yīng)用CCK-8法觀察其細胞的抑制率,細胞抑制率=[1-(實驗組吸光值-空白組吸光值)/(對照組吸光值-空白組吸光值)]×100％;通過流式法觀察5-Aza-dC或TSA單獨或聯(lián)合作用SGC-7901和MGC-803細胞株48小時的細胞凋亡率。同樣方法,用RT-PCR、Western Blotting觀察CHFR基因的mRNA和蛋白表達的水平。
　　結(jié)果：

4、對于SGC-7901細胞株,5-Aza-dC單獨處理24、48與72小時的抑制率分別為19.3%、31.8%和52.5%;TSA組分別為16.3%,33.2%和62.0%;二藥聯(lián)合組分別為33.1%,49.7%和70.0%;而在MGC-803細胞株,5-Aza-dC單獨處理組的抑制率分別為22.0%,37.8%和56.2%;TSA組分別為23.4%,40.8%和66.3%;二藥聯(lián)合組分別為37.9%,55.6%和77.2%。對于SGC-

5、7901細胞株,5-Aza-dC單獨處理48小時的凋亡率分別為11.47%;TSA為13.57%;聯(lián)合組為18.12%,而對于細胞株MGC-803,5-Aza-dC組為17.43%;TSA組為21.43%;聯(lián)合組為28.65%。對于SGC-7901細胞株,CHFR的mRNA相對表達量,對照組為0.061±0.0001,5-Aza-dC為0.167±0.034,TSA組為0.132±0.009,聯(lián)合組為0.265±0.005。對于SGC-

6、7901細胞株,CHFR蛋白的相對表達量,對照組為0.074±0.006,5-Aza-dC為0.431±0.020,TSA組為0.290±0.061,聯(lián)合組為0.590±0.048。
　　結(jié)論：5-Aza-dC和TSA單獨處理均能抑制SGC-7901和MGC-803細胞的增殖,其中MGC-803細胞比SGC-7901對這二種藥物處理更敏感,且成時間依賴性,二藥抑制腫瘤細胞增殖作用之間存在協(xié)同作用。進一步通過作用機制的分析,我們發(fā)現(xiàn)