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文檔簡介
1、第一部分
曲古霉素A和5-氮雜胞苷對細胞因子誘導(dǎo)損傷的胰島β細胞的保護作用
目的:探討在細胞因子誘導(dǎo)條件下曲古霉素A(TSA)和5-氮雜胞苷(5-AzaC)對胰島β細胞增殖、凋亡及功能的影響。
方法:體外培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細胞(RIN-m5f)至指數(shù)增長期,根據(jù)干預(yù)方案進行分組:正常細胞組、IL-1β/IFN-γ組、TSA+IL-1β/IFN-γ組(不同TSA濃度)、5-AzaC+IL-1β/IF
2、N-γ組(不同5-AzaC濃度)、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組。采用噻唑藍(MTT)比色法檢測β細胞增殖活性、膜聯(lián)蛋白V-FITC/PI檢測β細胞凋亡率、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測葡萄糖刺激胰島素分泌能力。
結(jié)果:TSA+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組細胞增殖活性分別為79.2%、82.9%、89.1%,與IL-1β/
3、IFN-γ組(33.9%)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05);TSA+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組凋亡率分別為8.2%、10.5%、7.9%,與IL-1β/IFN-γ組(16.6%)相比凋亡率降低,具有統(tǒng)計學(xué)差異(均P<0.05);TSA+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組
4、細胞葡萄糖刺激胰島素分泌能力部分恢復(fù)[(5.53±0.16) ng/ml、(5.70±0.18) ng/ml、(5.90±0.10)ng/ml],與IL-1β/IFN-γ組(3.21±0.17)ng/ml比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。
結(jié)論:曲古霉素A和5-氮雜胞苷可以抑制細胞因子誘導(dǎo)的胰島β細胞凋亡和恢復(fù)β細胞的胰島素分泌功能。
第二部分
曲古霉素A和5-氮雜胞苷對高糖誘導(dǎo)損傷的胰島
5、β細胞的保護作用
目的:探討高糖誘導(dǎo)條件下曲古霉素A(TSA)和5-氮雜胞苷(5-AzaC)和對胰島β細胞增殖、凋亡及功能的影響。
方法:體外培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細胞(RIN-m5f)至指數(shù)增長期,根據(jù)干預(yù)方案進行分組:正常細胞組、高糖(HG)組、TSA+HG組(不同TSA濃度)、5-AzaC+HG組(不同5-AzaC濃度)、5-AzaC+TSA+HG組。采用噻唑藍(MTT)比色法檢測β細胞增殖活性、膜聯(lián)蛋白V-
6、FITC/PI檢測β細胞凋亡率、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測葡萄糖刺激胰島素分泌能力。
結(jié)果:TSA+HG組、5-AzaC+HG組、5-AzaC+TSA+HG組細胞增殖活性分別為79.2%、81.8%、87.5%,與HG組(63.2%)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05);TSA+HG組、5-AzaC+HG組、5-AzaC+ TSA+HG組細胞凋亡率分別為10.4%、9.9%、8.7%,與HG組(15.8%)相比凋亡
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