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文檔簡介
1、目的: 探討5-雜氮-2’-脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對人胃癌細(xì)胞系BGC823細(xì)胞株RIZl基因的去甲基化轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用及對細(xì)胞株生長增殖的影響,尋找胃癌治療的新靶點(diǎn)。方法:使用3種不同濃度5-Aza-CdR干預(yù)胃癌BGC823細(xì)胞,通過甲基化特異性PCR(MSP)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測藥物干預(yù)前后RIZl基因的甲基化狀態(tài)和RIZlmRNA的表達(dá);通過MTT法檢測細(xì)胞增殖活性,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期及細(xì)胞凋
2、亡的改變。 結(jié)果: 未經(jīng)5-Aza-CdR處理的BGC823細(xì)胞中RIZl基因啟動子區(qū)域CpG島高甲基化,且RIZlmRNA不表達(dá),經(jīng)2,5,10μmol/L 5-Aza-CdR處理48h后,RIZl基因啟動子區(qū)域高甲基化得到逆轉(zhuǎn),細(xì)胞中均有RIZl mRNA表達(dá),相對定量值分別為0.509,0.716,0.831;3種濃度5-Aza-CdR處理BGC823細(xì)胞后,與對照組比較,細(xì)胞增殖速度出現(xiàn)不同程度減慢(P<0.05
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