去甲基化抑制劑和紫杉醇對(duì)中低不同分化胃癌細(xì)胞株的作用.pdf

1、目的：通過培養(yǎng)中分化胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901以及低分化胃腺癌細(xì)胞BGC823，觀察5-氮雜—2ˊ—脫氧胞苷(5-aza—2ˊ—deoxycytidine；5-Aza—CdR)、紫杉醇分別以及聯(lián)合用藥后對(duì)胃腺癌細(xì)胞的增殖能力、凋亡、以及抑癌基因表達(dá)的影響，探討不同細(xì)胞周期特異性藥物的聯(lián)合對(duì)胃癌細(xì)胞的影響。 方法：分別及聯(lián)合應(yīng)用兩藥后， MTT法檢測(cè)藥物對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901、BGC-823的增殖活性；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞

2、周期分布和凋亡；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)檢測(cè)藥物處理前后抑癌基因PTEN和上皮細(xì)胞鈣粘蛋白(E—cadherin；E—cad)mRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1．在SGC7901細(xì)胞中，紫杉醇的IC50濃度(48h)為1.68×10-9mol/L，5-Aza—CdR的IC50濃度為8.96×10-6mol/L。在BGC823細(xì)胞中，紫杉醇的IC50濃度(48h)為4.67×10-8mol/L，5-Aza—C的IC50

3、(48h)濃度為4.13×10-4mol/L。在兩藥物各自的IC50濃度聯(lián)合應(yīng)用后，BGC823細(xì)胞的抑制率為75.36％，SGC7901細(xì)胞的抑制率為82.18％。兩藥物在聯(lián)用后對(duì)中分化胃腺癌細(xì)胞SGC-7901有明顯的協(xié)同效應(yīng)(P＜0.01)，對(duì)低分化胃腺癌細(xì)胞BGC-823的藥物協(xié)同作用不明顯(P＞0.05)。 2．通過細(xì)胞流式儀，我們可觀察到紫杉醇可以使細(xì)胞阻滯在G2/M期，5-Aza—CdR可以使細(xì)胞阻滯在S期，在兩藥

4、聯(lián)合作用后，細(xì)胞阻滯在兩個(gè)周期，凋亡率增加，尤以SGC-7901敏感。 3．在RT—PCR實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)紫杉醇對(duì)PTEN和E—cad mRNA的表達(dá)沒有影響，5-Aza—CdR可以使其重新表達(dá)，在兩藥聯(lián)合作用后，PTEN和E—cad mRNA的表達(dá)量較5-Aza—CdR單獨(dú)作用明顯增多，說明紫杉醇可以促進(jìn)5-Aza—CdR對(duì)抑癌基因的再活化作用。 結(jié)論： (1)5-Aza—CdR和紫杉醇對(duì)胃癌細(xì)胞株SGC-790

5、1，BGC-823均有增殖抑制作用，兩藥聯(lián)合作用后，增值抑制作用增強(qiáng)，在SGC-7901細(xì)胞上表現(xiàn)出明顯的協(xié)同效應(yīng)，而在BGC-823細(xì)胞上則不明顯。 (2)5-Aza—CdR可以使中低不同分化的胃癌細(xì)胞阻滯在S期，紫杉醇可以使細(xì)胞阻滯在G2/M期，在兩藥聯(lián)合應(yīng)用后，胃癌細(xì)胞在這兩個(gè)周期均有分布，并且凋亡率較單藥作用明顯增加。 (3)5-Aza—CdR可以使抑癌基因E—cad和PTEN mRNA重新表達(dá)，紫杉醇不能，但其