2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩53頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、研究目的:
  1、通過(guò)神經(jīng)病學(xué)評(píng)分及曠場(chǎng)試驗(yàn),探討醋甲唑胺對(duì)SAH小鼠的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)及認(rèn)知功能的影響。
  2、通過(guò)FJB染色及TUNEL法檢測(cè)出血側(cè)腦皮層及海馬的變性和凋亡神經(jīng)元的變化,探討醋甲唑胺對(duì)SAH小鼠神經(jīng)元凋亡的影響。
  3、通過(guò)免疫組織化學(xué)和western blot檢測(cè)醋甲唑胺對(duì)SAH后凋亡關(guān)鍵分子caspase-3蛋白的影響,初步探討醋甲唑胺處理影響SAH后神經(jīng)元凋亡的分子機(jī)制。
  研究方法:<

2、br>  1.小鼠SAH模型的建立及分組
  雄性C57BL/6J小鼠(25-30g)隨機(jī)分為假手術(shù)組、未用藥組及醋甲唑胺組。用血管內(nèi)插線(xiàn)法建立小鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型,激光多普勒血流儀記錄血流量的變化。假手術(shù)組穿刺過(guò)程僅感到阻力但不穿破血管。醋甲唑胺組術(shù)后30分鐘開(kāi)始腹腔注射醋甲唑胺(20mg/kg),以后每12小時(shí)注射一次,一般用藥至處死的各時(shí)相點(diǎn),最長(zhǎng)不超過(guò)72小時(shí)。其余兩組在相同時(shí)相注射等量的PBS。
  2.蛛網(wǎng)膜下

3、腔出血程度的判定
  對(duì)本實(shí)驗(yàn)所有需術(shù)后24小時(shí)處死的小鼠進(jìn)行出血評(píng)分。術(shù)后24h處死小鼠并快速取腦,照相機(jī)拍攝腦基底池部出血情況,根據(jù)Sugawara等報(bào)道的方法進(jìn)行出血等級(jí)判定。
  3.神經(jīng)功能損害評(píng)分
  假手術(shù)組選5只小鼠作為對(duì)照,其余每組隨機(jī)抽取9只進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分及曠場(chǎng)試驗(yàn)。神經(jīng)功能評(píng)價(jià)采用Garcia評(píng)分系統(tǒng),總分為5—18分。
  4.認(rèn)知功能評(píng)價(jià)
  分別在術(shù)后第3d、7d、14d進(jìn)行

4、曠場(chǎng)試驗(yàn)。每次試驗(yàn)記錄小鼠在曠場(chǎng)內(nèi)5 min的行為表現(xiàn),統(tǒng)計(jì)分析其運(yùn)動(dòng)總距離及中央格時(shí)間。
  5.腦水腫的檢測(cè)
  假手術(shù)組選5只小鼠作為對(duì)照,其余每組隨機(jī)抽取9只,SAH后24h,麻醉后斷頭處死取腦,迅速秤重,隨后放置在烤爐內(nèi),100℃烘烤24小時(shí),再秤重。以公式計(jì)算含水量:(濕重一干重)/濕重×100%。
  6.腦血管痙攣的檢測(cè)
  每組隨機(jī)抽取8只小鼠。手術(shù)后24h處死小鼠,采用印度墨水/明膠灌注固定腦

5、血管,照相后用Image J軟件進(jìn)行腦血管直徑的檢測(cè)及比較。
  7.FJB及TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)元的變性和凋亡
  每組隨機(jī)抽取9只小鼠,手術(shù)后24h,中性多聚甲醛行腦血管灌注后取腦,固定后石蠟包埋,連續(xù)冠狀切片后FJB法檢測(cè)大腦皮層及海馬區(qū)變性壞死神經(jīng)元的比例;TUNEL法檢測(cè)大腦皮層及海馬細(xì)胞凋亡的變化。
  8.免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大腦皮層及海馬區(qū)的活化型caspase-3的表達(dá)及分布情況。
  9. W

6、estern blot法檢測(cè)腦組織caspase-3蛋白的表達(dá),用ImageJ軟件進(jìn)行半定量分析。
  10.所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用單因素方差分析,兩兩比較采用t檢驗(yàn),取P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  研究結(jié)果:
  1. SAH總死亡率為25.3%,其中假手術(shù)組無(wú)死亡,未用藥組26.1%,醋甲唑胺組24.4%,未用藥組與醋甲唑胺組死亡率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差

7、異(p>0.05)
  2.出血程度方面,假手術(shù)組無(wú)出血;未用藥組的蛛網(wǎng)膜下腔出血評(píng)分為8.50±2.17,醋甲唑胺組為8.09±1.81,兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。腦血流量方面,未用藥組和醋甲唑胺組手術(shù)過(guò)程中各時(shí)間點(diǎn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。
  3.神經(jīng)病學(xué)評(píng)分,假手術(shù)組24h、48h、72h分別為17.5±0.55、18、18,未用藥組分別為10.33±2.55、12.56±2.13、14.11±2.2

8、6,醋甲唑胺組分別為12.67±2.00、14.67±1.66、16.00±1.00,三組組間各時(shí)間點(diǎn)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。24h、48h、72h醋甲唑胺組好于未用藥組小鼠(P  4.假手術(shù)組3d、7d及14d的曠場(chǎng)試驗(yàn)運(yùn)動(dòng)總距離及中央格時(shí)間與未用藥組及醋甲唑胺組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。醋甲唑胺組各時(shí)間點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)總距離及中央格時(shí)間較未用藥組改善明顯(p<0.05);
  5.在出血側(cè)大腦半球,醋甲唑胺組腦含水量(77

9、.78%±0.43%)較未用藥組腦含水量(78.27%±0.48%)減少(P<0.05);
  6.三組的大腦前及頸內(nèi)動(dòng)脈直徑比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。未用藥組(87.11±6.73)及醋甲唑胺組(89.39±7.22)的大腦中動(dòng)脈直徑較假手術(shù)組的大腦中動(dòng)脈直徑(106.89±8.66)明顯變小(PO.05);
  7.假手術(shù)組偶見(jiàn)FJB陽(yáng)性細(xì)胞,醋甲唑胺組出

10、血側(cè)腦皮層及海馬區(qū)FJB陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(40×)分別為30.89±7.08、16.33±7.77,與未用藥組(42.64±11.58、31.55±4.95)比較明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
  8.假手術(shù)組偶見(jiàn)TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞,醋甲唑胺組出血側(cè)腦皮層及海馬區(qū)TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞(40×)比值分別為12.14%±8.33%、10.42%±12.92%,與未用藥組(25.84%±9.66%、23.60±7.22%)比較明顯

11、降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
  9.假手術(shù)組偶見(jiàn)caspase-3免疫陽(yáng)性表達(dá)于胞漿;醋甲唑胺組出血側(cè)腦皮層及海馬區(qū)caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞(40×)比值分別為20.64%±10.93%、23.67%±9.77%,與未用藥組(44.57%±8.50%、41.96%±16.90%)比較明顯降低,差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
  10.免疫蛋白印跡結(jié)果顯示,假手術(shù)組無(wú) caspase-3表達(dá)(0.751±0.

12、001),未用藥組caspase-3表達(dá)明顯(0.916±0.089),醋甲唑胺組caspase-3表達(dá)為0.758±0.007,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
  結(jié)論:
  1.醋甲唑胺可減輕SAH后的腦水腫,抑制腦皮層和海馬神經(jīng)元的變性凋亡,早期可改善SAH小鼠的神經(jīng)功能,遠(yuǎn)期可改善SAH小鼠的認(rèn)知功能。
  2.醋甲唑胺可能通過(guò)抑制凋亡關(guān)鍵分子caspase-3的活化表達(dá),抑制神經(jīng)元的凋亡,從而對(duì)SAH后的腦損

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論