醒腦靜注射液對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后海馬神經(jīng)元凋亡的影響.pdf

1、研究背景：醒腦靜注射劑(Xingnao jing injection XNJJ)是一種中藥注射劑，現(xiàn)代研究表明XNJJ可以抑制SAH后的腦血管痙攣，并且改善腦組織缺血缺氧狀態(tài)，明顯提高昏迷患者的清醒率，具有腦護(hù)作用，已廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)急、危、重癥的搶救治療，在蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)的治療中也常有應(yīng)用。多種研究表明抑制凋亡也可以發(fā)揮腦保護(hù)作用，因此本研究通過建立大鼠SAH模型觀測(cè)海馬神經(jīng)

2、元凋亡的情況，探討醒腦靜對(duì)神經(jīng)元凋亡的影響，旨在為臨床上防治SAH后的腦損傷提供理論依據(jù)。細(xì)胞凋亡是在細(xì)胞內(nèi)外特定的生理或病理性因素的誘導(dǎo)下發(fā)生的，目前認(rèn)為，細(xì)胞內(nèi)的基因直接控制著細(xì)胞凋亡的發(fā)生和發(fā)展。細(xì)胞外部因素通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而影響這些基因的表達(dá)或其表達(dá)產(chǎn)物的活化，從而間接地調(diào)控細(xì)胞凋亡。有關(guān)凋亡機(jī)制的研究很多，不同種類、不同生長(zhǎng)發(fā)育階段的細(xì)胞具有不同的細(xì)胞凋亡途徑，但是這種不同主要表現(xiàn)在早期誘發(fā)凋亡的分子機(jī)制有很大差別，而凋亡一經(jīng)起始

3、，不同的早期凋亡信號(hào)都匯集到一條共同的執(zhí)行通路，導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生相似的特征性的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)改變，而Caspase-3是Caspase家族中重要的一員，被證實(shí)處于該執(zhí)行通路的下游，是各種凋亡通路的共同的下游效應(yīng)部分，它直接或間接的酶解一系列細(xì)胞存活所必需的蛋白，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。Bcl-2家族在神經(jīng)細(xì)胞的凋亡抑制過程中是不可缺少的，是一個(gè)凋亡抑制基因，Bcl-2蛋白可以通過減少細(xì)胞內(nèi)和核內(nèi)的濃度，直接控制線粒體外膜通透性的從而調(diào)控凋亡信號(hào)的轉(zhuǎn)

4、導(dǎo)。Bax也是重要的促凋亡基因，其誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制是Bax同源二聚體的形成，Bcl-2蛋白的抑制凋亡作用則要通過與Bax結(jié)合形成異源二聚體來實(shí)現(xiàn)。Bcl-2/Bax組成一個(gè)平衡體系，Bax過表達(dá)則細(xì)胞凋亡加速，Bcl-2過表達(dá)則細(xì)胞凋亡被抑制，Bc1-2/Bax的比率決定細(xì)胞凋亡是否發(fā)生。被釋放入胞質(zhì)中的Cyte-c在ATP或dATP的輔助下可以引起Caspase家族的活化誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生，在凋亡因素的刺激下，Cyte-c的釋放及重新分布受

5、Bax等因素的調(diào)控。Bax參與了線粒體膜結(jié)構(gòu)的變化，并與Cyte-c的釋放密切相關(guān)。
　　 方法：選擇成年雄性Wistar大鼠35只，采用新鮮自體股動(dòng)脈血枕大池二次注入法建立SAH模型，大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、生理鹽水對(duì)照組、SAH組、XNJJ治療1組、XNJJ治療2組，每組7只，用Rea1-Time PCR技術(shù)檢測(cè)海馬神經(jīng)元中凋亡分子Caspase-3和Bax以及抗凋亡分子Bc1-2在各組的變化情況，并用Western blo

6、t進(jìn)一步驗(yàn)證此變化。
　　 結(jié)果： SAH后海馬神經(jīng)元中Caspase-3和Bax的表達(dá)均有不同程度上升(P＜0.05)，Bc1-2也有所上升(P＜0.01)。XNJJ治療1組及2組Caspase-3和Bax的表達(dá)較SAH組下降(P＜0.01)，而Bc1-2變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了SAH時(shí)有凋亡的發(fā)生，同時(shí)證實(shí)了XNJJ有抗凋亡的作用，并由此推斷XNJJ可以抑制海馬神經(jīng)元凋亡，具有腦保