從麥門冬湯對人血管內(nèi)皮細(xì)胞因子的影響探討硬皮病治療中“肺主皮毛”的血管機(jī)制.pdf

1、目的：硬皮病即系統(tǒng)性硬化?。╯ystemic sclerosis，SSc）屬于中醫(yī)“皮痹”范疇，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為“肺主皮毛”，治肺代表方“麥門冬湯”在治療硬皮病的過程中的機(jī)制值得探討?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為SSc發(fā)病機(jī)制主要有血管異常、膠原異常及自身免疫異常三種假說。其中血管異常是最常見和最容易引起關(guān)注的病理改變，小動脈和微血管的異常發(fā)生在系統(tǒng)性硬化的始動階段。目前多項研究顯示，血管張力的控制受神經(jīng)肽、血管內(nèi)皮和血小板三方面的因素調(diào)節(jié)，而系統(tǒng)性硬化患者

2、血管早期損傷和血小板活化等因素，導(dǎo)致血管活性物質(zhì)的異常釋放，引起神經(jīng)-內(nèi)皮等調(diào)控異常，造成血管痙攣。這也是雷諾現(xiàn)象發(fā)生的主要機(jī)制之一。Takhashi等認(rèn)為，內(nèi)皮細(xì)胞損傷常伴有內(nèi)皮細(xì)胞的功能障礙。內(nèi)皮細(xì)胞是人體一大分泌腺體，可分泌并釋放多種血管活性物質(zhì)，例如細(xì)胞粘附分子-1（VCAM-1）、細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）、P選擇素（P-selectin）、NO等。內(nèi)皮損傷、功能障礙，勢必導(dǎo)致內(nèi)皮內(nèi)分泌功能失調(diào)，常表現(xiàn)為縮血管物質(zhì)如內(nèi)

3、皮素-1（ET-1）增加和舒血管物質(zhì)如NO降低。其中VCAM-1、ICAM-1、P-selectin主要介導(dǎo)炎癥與免疫應(yīng)答，內(nèi)皮素-1（ET-1）、NO則直接影響血管的收縮。所以通過體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，觀察用藥前后 VCAM-1、ICAM-1、內(nèi)皮素、P選擇素、NO等指標(biāo)的變化，為麥門冬湯治療硬皮病和中醫(yī)“肺主皮毛”理論提供現(xiàn)代醫(yī)學(xué)支持。
　　方法：將60只清潔級SD大鼠隨機(jī)分為實驗組、對照組、空白對照組，每組20只。實驗組

4、分別用麥門冬湯灌胃（麥門冬湯4.24g/100g/d，每日1次灌胃，共一周）和當(dāng)歸四逆湯灌胃，（當(dāng)歸四逆湯2.44g/100g/d，每日1次灌胃，共一周）空白對照組按實驗組劑量給予同體積生理鹽水灌胃一周。3組大鼠末次給藥6h后腹主動脈取血，離心取上清，經(jīng)滅活處理，無菌過濾器過濾、分裝，-70℃保存?zhèn)溆?。將提取的含藥血清用完全培養(yǎng)基分別稀釋為5％、10%、20%含藥血清的低、中、高組，另加入薄芝糖肽組作為西藥組與中藥組進(jìn)行對比。用MTT法

5、檢測含藥血清對內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響，用elisa法檢測含藥血清對內(nèi)皮細(xì)胞分泌ET-1的影響，用硝酸根還原法檢測含藥血清對NO的影響，用流式細(xì)胞技術(shù)檢測含藥血清對內(nèi)皮細(xì)胞分泌P-selectin、VCAM-1、ICAM-1的影響。
　　結(jié)果：（1）20%的麥門冬湯作用人血管內(nèi)皮細(xì)胞24h時抑制率最高。
　?。?）麥門冬湯組的內(nèi)皮素-1雖較生理鹽水組有升高但卻可以明顯使NO升高，一定程度上拮抗了內(nèi)皮素-1的收縮血管作用，減少對血管