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1、目的:1觀察不同濃度尿酸鹽對人血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷相關(guān)因子表達(dá)的影響,明確高尿酸血癥對人內(nèi)皮細(xì)胞的損傷是直接作用還是通過單核細(xì)胞釋放炎癥因子的間接作用。 方法:體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞并將內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞共培養(yǎng),對照組不用尿酸鹽刺激,刺激組分別用395μ mol/L(低2),789μmol/L(低1),1184μ mol/L(中),1579μ mol/L(高1),1974μ mol/L(高2)等不同濃度尿酸鹽刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞48小時
2、,用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測定上清液白細(xì)胞介素1(IL-l)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)、血漿纖溶酶原激活抑制劑-1( PAI-1)等因子表達(dá)水平,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT- PCR)技術(shù)測定血管內(nèi)皮細(xì)胞人尿酸鹽轉(zhuǎn)運子(hUAT) mRNA的表達(dá)。 結(jié)果:①IL-1、TNF-α的表達(dá):內(nèi)皮細(xì)胞組:二者的表達(dá)在中、高1、高2濃度組與對照組比有明顯升高,有顯著性差異(P<0
3、.05),共培養(yǎng)組上述趨勢更顯著;②ICAM-1的表達(dá):內(nèi)皮細(xì)胞組:ICAM-1表達(dá)在高2濃度組與對照組比較有明顯升高,有顯著性差異(P<0.05),共培養(yǎng)組:高1、高2濃度組與對照組比較均可見有意義的ICAM-1表達(dá)(P<0.05);③PAI-1的表達(dá):內(nèi)皮細(xì)胞組:PAI-1的表達(dá)在高1、高2濃度組與對照組相比有明顯升高,有顯著性差異(P<0.05),共培養(yǎng)組:在中、高1、高2濃度組與對照組比較均可見有意義的PAI-1表達(dá)(P<0.0
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