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文檔簡介
1、目的:以MCF-7細胞、轉(zhuǎn)染空載體的MCF-7細胞、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染M-CSF的MCF-7細胞為模型,探討胞質(zhì)M-CSF對人乳腺癌MCF-7細胞抗藥性的影響及可能機制。
方法:采用MTT及臺盼蘭染色法檢測細胞的存活率;高效液相色譜法檢測細胞內(nèi)藥物濃度;RT-PCR鑒定耐藥基因MDR1的表達;Western Blotting鑒定細胞耐藥P-糖蛋白(P-gp)及抗凋亡蛋白Bcl-2的表達。
結(jié)果:對照組轉(zhuǎn)染空載體的MCF-7細胞
2、(命名為MCF-7-C細胞)和MCF-7細胞與實驗組轉(zhuǎn)染M-CSF的MCF-7細胞(命名為MCF-7-M細胞)比較:MTT及臺盼蘭拒染實驗顯示細胞在阿霉素(Adriamycin, ADM)、紫杉醇(TAX)等藥物的作用下MCF-7-M的存活率均高于對照組細胞(p<0.05),對照組之間無顯著差異(p>0.05)。高效液相色譜實驗顯示:阿霉素同一藥物濃度在實驗組MCF-7-M細胞內(nèi)的藥物濃度明顯少于對照組細胞(p<0.01);紫杉醇在對照
3、組中均可測出,且組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05),但實驗組MCF-7-M細胞內(nèi)由于藥物濃度過低儀器未檢測。RT-PCR實驗顯示MCF-7-M細胞的MDR1基因表達量較MCF-7-C細胞和MCF-7細胞高(p<0.01)。Western blot實驗顯示MCF-7-M細胞的Bcl-2、P-gp蛋白表達量高于MCF-7-C細胞和MCF-7細胞(p<0.01)。
結(jié)論:胞質(zhì)M-CSF能增加人乳腺癌MCF-7細胞對阿霉素和紫杉醇的
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